环丙沙星衍生物的制备及其抗体特异性研究

本文研究了环丙沙星(CPLX)羧基衍生物及其抗体的制备,并对该衍生物抗体的特异性进行了测定。将环丙沙星与3-溴丙酸反应,生成环丙沙星的羧基衍生物(CPLX-COOH),通过制备液相进行纯化,用红外光谱(IR)、电喷雾电离质谱(ESI-MS)与核磁共振法(NMR)进行鉴定;将环丙沙星衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别制备免疫抗原(CPLX-COOH-BSA)和包被抗原(CPLX-COOH-OVA),并用紫外光谱法进行鉴定。用免疫抗原免疫BALB/c小鼠,制备环丙沙星衍生物多克隆抗体。通过ELISA方阵滴定法,确定包被抗原的最佳包被浓度和抗体最佳稀释度,建立了CPLX-COOH间接竞争ELISA检测方法,其半抑制浓度IC50为228.56 ng/mL,最低检出限(LOD)为25.527 ng/mL,该抗体具有广谱特异性,可与多种氟喹诺酮类药物发生交叉反应,可进行氟喹诺酮类药物残留的多元检测。     

藜麦多肽的制备及其抗氧化活性研究

目的 优选复合酶协同超声辅助法提取藜麦蛋白的工艺以及探讨藜麦多肽的抗氧化活性。方法 采用 Box-Behnken 响应面法,对超声辅助糖化酶-纤维素酶复合酶法进行优化。使用碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶制备藜麦多肽,通过 DPPH 法和 ABTS 法对其抗氧化活性进行探究。结果 根据响应面模型对复合酶超声辅助提取条件进行优化, 得到最佳提取条件：总加酶量 400 U/g、pH 5.0、时间 60 min。以最佳优化条件提取,藜麦抗氧化肽的 DPPH 自由基清除率最高达到 79.64%;ABTS 自由基清除率最高达到 76.14% 。结论 采用响应面法建 立的模型相对准确,藜麦蛋白的提取工艺优化方法可行;藜麦蛋白木瓜蛋白酶水解物具有较好的抗氧化活性,为藜麦作为功能食品深入开发提供依据。