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目的 探寻UVB诱导的衰老(UVB-SIPS)成纤维细胞分泌的细胞外基质(ECM)对HaCAT细胞增殖的影响以及FAK和PI3-K/Akt信号途径在其中所起的作用.方法 连续亚细胞毒剂量UVB辐照诱导皮肤成纤维细胞衰老,制备由衰老成纤维细胞分泌的ECM,接种HaCAT细胞至ECM包被的平皿,观察空白ECM、未衰老的ECM和光老化的ECM对HaCAT增殖、凋亡等功能的影响.免疫印迹法检测细胞内FAK和Akt磷酸化水平的时相性变化.在干预研究中,采用细胞松弛素D和渥曼青霉素阻断FAK和PI3-K/Akt信号通路,对比观察对细胞功能和信号的影响.结果 ①3组均可见Akt轻度但无显著差异的磷酸化的增加;但U-VB-SIPS组的FAK信号发生最快最明显的增加.②2μM细胞松弛素D可明显抑制FAK和Akt磷酸化;同时,细胞的凋亡率也显著增加.③以400 nM渥曼青霉素预处理细胞,明显抑制Akt磷酸化,同时3组的凋亡水平分别达15.8%、23.4%和21.8%.④细胞松弛素D和渥曼青霉素均明显抑制了光老化的ECM促细胞增殖效应.结论 在本系统中FAK/PI3-K/Akt信号途径发挥抑制细胞凋亡的作用.阻断该信号通路可完全破坏UVB-SIPS成纤维细胞分泌的细胞外基质对HaCAT的促增殖作用. 相似文献
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目的 研究佛波酯对培养的人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞环氧合酶-2(COX-2)表达水平的影响,探讨佛波酯的皮肤细胞毒性机制。方法 以体外培养的HaCaT细胞为对象,采用RT-PCR和Western印迹方法,检测HaCaT 细胞经0.1,1.0,10 mg/L佛波酯处理24 h后COX-2 mRNA和蛋白表达情况。结果 对照组HaCaT 细胞COX-2 mRNA和蛋白微弱表达或不表达,1.0,10.0 mg/L佛波酯组COX-2 mRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组和0.1 mg/L佛波酯组(P值均 < 0.01),而且10.0 mg/L佛波酯组均高于1.0 mg/L佛波酯组,差异均有统计学意义(P < 0.01)。结论 佛波酯可能通过上调HaCaT细胞表达COX-2,促进前列腺素的合成释放,参与皮肤角质形成细胞恶性肿瘤的发生。 相似文献
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目的:研究观察5-氨基酮戊酸(5-ALA)联合强脉冲光(IPL)光动力疗法(5-ALA-IPL-PDT)对成纤维细胞分泌表型的影响及其信号通路机制.方法:成纤维细胞接种至培养板,采用不同浓度的5-ALA处理细胞2 h后给予不同剂量的IPL辐照.免疫印迹法(Western-blot)观察有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关家族成员[细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、P38]的蛋白磷酸化水平.ELISA法检测转化生长因子(TGF)-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-1水平的变化.结果:①与空白组比较,IPL+ALA(0.5 mmol/L)组、IPL+ALA(1.0 mmol/L)组,MMP-1浓度分别增加94.7%和111.4%,而TGF-β1浓度分别降低34.8%和39.1%(P < 0.05);②IPL+ALA(0.5 mmol/L)组与IPL组比较,ERK、P38和JNK分别增加113.1%、36.1%和67.3%(P < 0.05).结论:5-ALA-IPL-PDT可刺激MAPK家族分子(ERK、P38、JNK)的活化,诱导成纤维细胞MMP-1的分泌,而抑制TGF-β1的分泌. 相似文献
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目的:利用反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscopy, RCM)检测面部皮炎患者蠕形螨感染情况并分析其与皮损表现类型的相关性。方法:皮肤科门诊收集考虑合并蠕形螨感染的面部皮炎患者,使用RCM检测皮损处毛囊蠕形螨感染数量。Spareman相关分析法分析蠕形螨感染数量与各种皮损类型的相关性。结果:共收集381例患者(男83例,女298例),男性患者蠕形螨阳性率为74.7%,女性阳性率为72.8%,总阳性率为72.7%。Spareman相关分析提示蠕形螨感染数量与红斑相关系数为0.357(P<0.01),与鳞屑相关系数为0.365(P<0.01)。结论:红斑、鳞屑皮损毛囊蠕形螨数量更多。 相似文献
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目的:观察EtNBSe(5-ethylamino-9-diethylamino benzo[a]phenoselenazinium chloride)联合光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人包皮成纤维细胞体外增殖及分泌表型的影响。方法:成纤维细胞接种至培养板,采用不同浓度的EtNBSe处理细胞2h后,给予同一时间剂量的红光辐照,MTT法检测细胞的功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平的变化。结果:(1)与空白组比较,细胞接受EtNBSe-PDT处理后,EtNBSe(60、120pM)组有增殖活性(P0.05);(2)与空白组比较,EtNBSe(60、120pM)组,TGF-β1浓度分别增加28.57%和45.11%(P0.05)。结论:EtNBSe-PDT可促进体外生长的成纤维细胞增殖活性,诱导成纤维细胞TGF-β1的分泌。 相似文献
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