新兴猪IL-18成熟蛋白基因的克隆与序列分析

根据GenBank上登录的猪白细胞介素18(pIL-18)基因序列，设计了1对特异引物。利用RT-PCR对从3周龄新兴仔猪脾细胞中提取的总RNA进行了扩增，获得了约500bp的片段。将该片段克隆、鉴定、测序，证实已获得了新兴猪IL-18成熟蛋白基因片段，其大小为474bp，编码157个氨基酸，与GenBank上登录的猪IL-18成熟蛋白基因序列完全一致。     

不同消毒方法对种蛋消毒效果和孵化成绩的影响

禽用疫苗的生产中,病毒大多是通过鸡胚的培养来扩繁,因此生产中要使用大量的鸡胚.胚蛋的利用率是疫苗生产成本中的一个关键因素,现阶段我们采用对种蛋熏蒸消毒的方法来提高种蛋的利用率和减少种蛋在孵化过程中细菌感染的机率,起到了一定的作用,但是在生产中还是存在消毒方法单一,细菌容易产生抗药性等问题 [1～3].为了找到更适合我们实际生产的消毒液和消毒方法,进一步提高胚蛋的利用率和胚蛋表面无菌率,我们在种蛋入孵前选择不同的消毒液、不同的消毒方式、不同的消毒时间等途径进行消毒实验,希望找到合适的消毒液、消毒方法,从而达到提高疫苗生产中原料的利用率和无菌率,降低产品生产成本的目的.     

表达Omp1和Omp2的猪大肠埃希菌融合菌株R2的构建

为了构建猪大肠埃希菌融合菌株,在药敏试验和MIC试验的基础上,对猪大肠埃希菌HY2株(O101,Omp1)和GXA1株(O107,Omp2)进行交叉耐药培育.以HY2(O101,Omp1,Amir,Czls)和GXA1(O107,Omp2,Czlr,Amis)为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备两亲本菌株原生质体,通过聚乙二醇(PEG)助融,进行原生质体融合,得到3株双耐药融合菌株.结果表明,猪大肠埃希菌原生质体制备和再生的最适条件是:溶菌酶浓度为200 U/mL,作用时间为25 min.筛选得到3株融合菌株R1、R2、R3,均可凝集两亲本的O抗原,其中,R2凝集性更好更稳定.进一步结合SDS-PAGE分析,显示融合菌株R2能较好的表达两亲本菌株形状,经多次传代仍能够稳定遗传.     

高淀粉玉米品种的选育及特性

玉米作为制作淀粉的主要原材料,在各种领域当中都得到了广泛的应用,仅仅是将玉米作为原材料而衍生出来的工艺作品就能够达到一千余种.因此,需要针对高淀粉玉米品种进行合理的选育,并且还要分析其中的特性,为淀粉的制造提供重要的保障.本文简要探究了玉米淀粉综合加工利用现状,高淀粉玉米的概念以及类型,高淀粉玉米品种选育的研究现状以及高淀粉玉米品种选育目标与策略,为提高玉米的产量作出贡献.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶和奶粉中五种苯并咪唑类药物

为建立牛奶及奶粉中5种苯并咪唑类药物(阿苯达唑、芬苯达唑、奥芬达唑、噻苯达唑、苯硫氨酯)简便、准确的分析检测方法,以固相萃取为净化手段,采用Acquity UPLC^® BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱进行分离,电喷雾离子源(ESI⁺),多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,5种苯并咪唑类药物在1~500 μg·L^-1范围内呈线性相关,相关系数(r)均大于0.996,加标平均回收率介于91.7%~97.8%之间,相对标准偏差(RSD)在1.4%~6.5%之间,基质效应均小于15%。5种药物的检出限均在0.1~3 μg·kg^-1范围内,定量限均在0.5~10 μg·kg^-1范围内。该方法操作简单、快速且灵敏度高,重现性好,能够用于牛奶及奶粉5种苯并咪唑类药物的同时测定。     

基体改进剂对重楼中砷·汞含量测定的影响

[目的]探讨重楼中微量元素砷、汞含量的测定方法,为重楼药材毒副作用评价体系提供参考。[方法]采用石墨炉原子吸收光谱法（GFAAS）,通过对基体改进剂硝酸镍、氯化钯的用量,酸性介质,灰化温度,原子化温度等试验参数进行优化,探索了基体改进剂对重楼中砷、汞含量测定的影响。[结果]加入硝酸镍、氯化钯不仅能提高砷、汞的灰化温度和原子化温度,还能提高测定的灵敏度和精密度,且重现性好。[结论]加入基体改进剂的方法快速、可靠,为重楼中砷、汞含量测定提供了一种简便有效的方法。     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪的一种急性、高度传染性肠道疾病,给养猪业造成了严重的经济损失。本研究以纯化的PEDV 为包被抗原,通过优化 ELISA 反应条件,建立了间接 ELISA 抗体检测方法,其反应条件为：抗原最佳包被浓度为 20 μg/mL,血清标准品最佳稀释度为 1：500,包被时间为4℃过夜,5%小牛血清37℃封闭1 h,二抗 1：10 000稀释,37℃作用1 h,抗体临界值为 D_{450 nm}≥ 0.289判为阳性,D_{450 nm}≤ 0.236判为阴性,介于二者之间为可疑。检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、细小病毒和口蹄疫病毒标准血清抗体均为阴性,重复试验变异系数均小于10%,对江苏、江西、福建、广东地区74份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达84%,表明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于 PEDV 抗体检测和流行病学调查。     

鸡沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分型研究

为应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)从分子水平上对禽源沙门氏菌之间的差别进行分析和研究,本研究采用自动微生物鉴定仪对12株疑似鼠伤寒沙门氏菌和15株疑似鸡白痢沙门氏菌进行了鉴定.以限制性核酸内切酶Xba I对其全基因组DNA进行酶切、PFGE分型,Info Quest FP聚类分析软件对电泳结果进行分析.结果显示,共鉴定出11株鼠伤寒沙门氏菌、1株圣保罗沙门氏菌、6株阿姆斯特丹沙门氏菌、5株亚拉巴马沙门氏菌、1株鸡白痢沙门氏菌、2株纽波特沙门氏菌和2株肠炎沙门氏菌,一共分为12个PFGE型.实验结果表明,江苏地区存在有不常见的沙门氏菌血清型,同种血清型之间的基因型差别较小(相似值为0.85～1),不同血清型之间差别较大(相似值为0.45～0.70).PFGE能从分子水平上对禽源沙门氏菌的基因组DNA进行分型.     

石墨烯对低密度聚乙烯拉伸性能的影响

从改善低密度聚乙烯(LDPE)材料力学性能和抗老化性能出发,探讨了加入石墨烯对LDPE拉伸强度、断裂伸长、回弹性等拉伸性能和氙灯人工加速老化后拉伸性能的影响。结果表明:石墨烯能明显改善LDPE材料的拉伸性能和抗老化能力:拉伸性能的改善程度随石墨烯的添加而呈先增后减趋势,当石墨烯添加量为0.02wt%时,LDPE表现出最优的拉伸性能;较不含石墨烯的LDPE,石墨烯添加量为0.02wt%改性LDPE,加速老化后其抗拉强度、断裂伸长率和断后回弹率等拉伸性能均出现较低下降,但均优于未改性LDPE老化前的拉伸性能。     

利用家蚕蛹人工繁殖自蛾周氏啮小蜂的研究

初步研究了利用家蚕蛹大量繁殖白蛾周氏啮小蜂的可行性。观察了白蛾周氏啮小蜂在家蚕蛹上的发育历期,子代蜂的寿命及飞行能力,认为繁蜂的最佳蜂蛹比为15～20∶1;4次接蜂结果显示,周氏啮小蜂可以利用家蚕蛹连续繁殖,单蛹出蜂量及单雌产卵量均较高;利用家蚕蛹繁殖的白蛾周氏啮小蜂对国槐尺蛾蛹寄生率为76.7%,表明利用家蚕蛹繁殖的子代蜂对其他寄主具有较强的寄生能力。