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2.
以奶牛原代培养细胞PBMC(peripheral blood mononuclear cells)和商业化细胞系MDBK(madin-darby bovine kidney)为细胞模型,采用MTS、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)及Western blot等方法检测不同程度的冷热应激对牛PBMC和MDBK细胞活力及HSP70表达水平的影响,分析不同温度的冷热应激条件下细胞活力和HSP70表达变化的规律,以及不同类型细胞应答冷热应激的差异。结果显示,冷应激和热应激均会使细胞活力降低,应激强度越大,细胞活力越低;冷热应激会调控细胞中HSP70的表达水平,重度冷应激(10℃)下调HSP70的表达,而热应激则上调HSP70的表达,但若超过细胞耐受极限度HSP70表达开始下降;HSP70表达水平应对冷热应激的变化与细胞的类型和冷热应激强度有关。结果表明,冷热应激会降低细胞活力,调控细胞HSP70的表达水平,HSP70的表达变化能够反映细胞冷热应激的强度,可作为评价奶牛冷热应激反应的澘在分子标记在奶牛个体中进行深入研究。 相似文献
3.
4.
将鸡传染性贫血病毒M9905株VP1、VP2基因分别或同时克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDUAL中,然后转化到DHIOBAC感受态细胞中与Bacmid杆状病毒穿梭载体进行转座重组,最后将重组子转染Sf9昆虫细胞,得到分别或同时含VP1、VP2基因的重组杆状病毒rBacVP1、rBacVP2及rBacVP1—2。PCR扩增结果证实VP1、VP2基因重组到杆状病毒基因组中;SDS-PAGE电泳分析和间接免疫荧光试验结果表明VP1、VP2基因在重组病毒中得到了表达。 相似文献
5.
本根据当前知识经济社会对计算机应用人才的实际需要。针对职业技术学校培养实用型.技能型人才的目标。分析了职业技术学校计算机教育的现状和存在的问题。初步探讨了学校学生所学计算机知识与实际应用的差距和职业技术学校非计算机专业计算机课程的设置和教学方法.. 相似文献
6.
以甘蓝显性雄性不育系C08-11为母本,以萝卜自交系Q07-12为父本进行属间杂交,对杂交子房和胚珠进行离体培养,筛选适合甘蓝与萝卜属间杂种胚挽救的适宜取材时间、培养基及外源添加物。结果表明,胚珠培养优于子房培养;所有处理子房培养仅获得3株杂交苗,取材时间以授粉后第9天为宜,B5培养基中添加合适的生长调节剂、水解酪蛋白和活性炭为子房培养所必需;胚珠培养各处理共获得29株杂交苗,适宜取材时间为蕾期授粉后第14天、花期授粉后第16天,对生长调节剂的需求取决于不同取材时期及培养基。 相似文献
7.
8.
<正> 鱼类的营养学实验是鱼类研究必不可少的内容之一,目前,这方面的工作尚有缺陷,造成实验误差。 实验误差主要来自:①环境因素,如:实验室的地理位置、门窗的大小和位置、容器的形状和大小,还有水质、水流、噪声、振动、光照等的不同。②生物因素,如鱼类的病害、鱼类的个体和健康状况的差异、其它水生生物和人类的行为和干扰等。饵料的原材料、添加剂不同,混合不均等。 为了减少和降低实验的误差,首先选择实验室的环境条件应尽可能一致,容器的大小和形状也要统一,实验用鱼的个体大小和健康状况及其它条件都应保持一致。其次,实验组的设定应是随机的;观测的独立性也很重要。实验的误差和偏差在同一组鱼类中的一种影响涉及该组中的每一尾鱼。再次,一组实验应有2~3次重复;一个独立的组不能影响另一个独立组,因此,每一个实验容器应作为一个组的 相似文献
9.
<正> 江西省粮油食品进出口公司于1986年11月从深圳正大康地公司种猪场购进一批美国迪卡白父母代种猪交东乡县农科所繁殖生产。该批种猪共100头。其中公猪10头,母猪90头。公猪A、D型。个体重最大的110公斤,最小为31公斤,大致为160日龄左右。母猪为C、D型。最大个体重75公斤,最小个 相似文献
10.
SMD残留检测的ELISA方法的建立和初步应用 总被引:12,自引:0,他引:12
用戊二醛法将SMD与载体蛋白BSA偶联 ,制备合成抗原SMD BSA作免疫原 ,同法合成包被抗原SMD OVA ,免疫健康家兔获得抗血清。分别用双向琼脂扩散试验和ELISA试验对抗血清进行定性定量测定 ,结果表明所获抗血清特异性针对SMD。用所制备的抗血清建立间接竞争ELISA方法。优化了ELISA的工作条件 ,方阵测定确定了包被抗原最佳浓度 (50 μg/mL) ,抗血清最佳稀释度 (1∶1 0 0 ) ,酶标抗体的最适工作稀释度 (1∶50 0 ) ,并建立了ELISA标准工作曲线。工作曲线表明在 1 0~ 2 0 0 0 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。该法检测底限为 63μg/L,低于国际规定残留限量 (1 0 0 μg/kg)和国内规定残留限量 (30 0 μg/kg)的要求。本法同时测定了回收率以及实际样品血清中的SMD的残留含量 相似文献