乳清急性期蛋白、乳酶作为奶牛隐性乳腺炎诊断指标的研究

为探索奶牛隐性乳腺炎快速、敏感的早期诊断指标,采集患隐性乳腺炎奶牛乳汁,研究其对乳清急性期蛋白含量、乳酶活性的影响,并做和乳汁体细胞数(somatic cell count,SCC)的相关性分析。结果显示:2组奶牛(健康奶牛与患隐性乳腺炎奶牛)乳清中HP、SAA、AGP、CRP含量均差异显著(P0.01),且与SCC呈极显著正相关(P0.01),相关性系数(r)分别为:HP(r=0.806)、SAA(r=0.662)、AGP(r=0.604)、CRP(r=0.717)。2组奶牛乳清中LDH、MPO、NAG、CAT活性差异极显著(P0.01),且与SCC呈极显著正相关(P0.01),相关性系数(r)分别为:LDH(r=0.729)、MPO(r=0.433)、NAG(r=0.932)、CAT(r=0.430)。结果提示:乳清中HP、SAA、AGP、CRP等急性期蛋白含量与LDH、MPO、NAG、CAT等乳酶活性均有可能作为奶牛隐性乳腺炎的诊断指标,但其具体诊断指示量还需进一步研究。     

3个黄牛品种的myostatin 5''调控区多态与生长性状的相关分析

用PCR-RFLPs方法对南阳牛、秦川牛、郏县红牛3个品种共411个个体的myostatin 5'调控区的单核苷酸多态性(SNPs)进行分析.结果表明,3个品种在myostatin 5'调控区T→A突变以等位基因T为主,仅在郏县红牛中发现1个AA型纯合体,郏县红牛品种显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P＜0.05),其它品种处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05).对黄牛myostatin 5'调控区T→A突变与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状进行相关分析,结果显示,TT型南阳牛6月龄的胸围和胸围指数显著低于TA型个体,TT型南阳牛18月龄的体高显著高于TA型个体(P＜0.05),但基因型对秦川牛和郏县红牛生长性状的效应不显著(P＞0.05).提示在南阳牛的育种实践中应该综合考虑南阳牛生长阶段和所要选择的性状.     

南阳牛IGF2基因第2外显子多态性及其与生长发育相关性研究

以126头纯种南阳黄牛为研究材料，利用PCR-RFLPs技术对胰岛素样生长因子2（IGF2）第2外显子的多态性及其与生长发育的相关性进行了分析。结果表明：南阳牛在该位点的遗传多态性丰富。检测到2种等位基因A和B，频率分别为0．6865和0．3135，A等位基因在群体中是优势等位基因；BB型个体的6、12、18、24月龄体斜长和胸围，12、18和24月龄的坐骨端宽，初生、6月龄和24月龄体重等体征性状显著地优于AA型；6月龄体斜长、12月龄的胸围、18月龄和24月龄坐骨端宽也显著优于杂合型。初步推断JGF2基因是非常有价值的辅助选择标记，可为南阳牛肉用型方向选择提供理论依据。     

SC1(pluripotin)对昆明小鼠胚胎干细胞分离培养的影响

比较了在无血清培养体系中分别添加小分子化学物质pluripotin(SCl)和白血病抑制因子(LIF)对昆明小鼠ES细胞未分化状态的维持作用,并探讨了SC1在培养液中的最佳浓度.以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)为饲养层,以含LIF的添加血清替代品(KSR)的培养基(ESC-SR)为对照,分别用SC1浓度为0.3、1、3μmol/L的ESC-SR培养液对昆明小鼠胚胎进行分离培养.结果显示:胚胎在添加3 μmol/L SC1的ESC-SR培养液中ICM形成率显著高于对照组(P＜0.05),形成的ES集落与对照组形态差异不明显,最高传至第7代,并且在无饲养层条件下可以传至第6代而保持未分化状态.不同浓度SC1培养液中,胚胎在SC1浓度为0.3 μmol/L组的F2代形成率显著高于1 μmol/L组和3μmol/L组(P＜0.05),所分离的细胞AKP染色呈阳性,Oct4、Nanog和Sox2的免疫荧光染色均显阳性,具有ES细胞的特点.结果表明,ESC-SR培养液中SC1可以替代LIF用于小鼠ES细胞未分化状态的维持,并且可以在无饲养层条件下进行昆明小鼠ES细胞的培养.     

河南省牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查与分析

为了解河南地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)的感染情况及主要基因型,用商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对来自河南省14个市和不同地区的40个规模化奶牛养殖场共5 486份血清中BVDV抗原进行检测,同时对ELISA方法检测的97份抗原阳性样本,用套式逆转录-聚合酶链式反应(nRT-PCR)进行BVDV抗原检测和基因分型。结果表明,A10奶牛场BVDV抗原阳性率最高,为7.8%(11/141),A11、A17奶牛场BVDV抗原阳性率最低,为0.66%(1/151)。不同牛场的BVDV抗原阳性率为0～7.8%,平均阳性率为1.77%;河南地区牛病毒性腹泻病毒的基因型均为BVDV-1型,未发现其他基因型。提示BVDV在河南省规模化奶牛场存在,但不同地区、不同牛场的BVDV阳性率不同,主要以BVDV-1型感染为主。     

超数排卵对奶牛产奶量及繁殖能力的影响

用FSH+PGF_(2)对16头黑白花奶牛进行超数排卵处理。超排前4d和超排1～10d日均产奶量差异不显著(P>0.05)。超排采胚后1头因年老淘汰,1头冲胚时发现患有慢性卡他性脓性子宫内膜炎进行治疗未配,其余14头冲胚后发情正常,人工授精后均妊娠,和正常牛发情配种妊娠率无差异。超数排卵对奶牛产奶量及繁殖能力无影响。     

现场分割奶牛胚胎产生同胚双犊的研究

采用简易徒手胚胎分割法,一分为二分割奶牛胚胎。应用非手术方法,每头受体移植成对二分胚。移植4头受体,2头妊娠,其中1头产公犊1头,1头产母犊2头。该母犊为同胚双犊,健康,发育正常。     

小鼠胚胎直接投入液氮冷冻保存试验

室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9％(254/292),胚胎形态正常率为77.1％(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4％(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43％(3/7),产仔率为10.9％(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25％(3/12)。     

犊牛阿维菌素中毒的组织病理学观察

本试验应用常规石蜡切片技术,H.E染色镜检观察阿维菌素中毒犊牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠系膜淋巴结、空肠、瘤胃8个组织器官,结果表明:各脏器主要病理变化是出血和瘀血;心肌纤维断裂、变性坏死,间质内充满大量炎性细胞;肝脏实质细胞肿胀,脂肪变性,叶间静脉内出现均质红染浆液;肺泡内有浆液渗出;肾小管凝固性坏死,肾小球肿胀,间质内出现水肿液;淋巴结淋巴中心细胞坏死。这些器管组织的损伤变化,有助于进一步探索阿维菌素中毒的发病机制及病理特征,从而为及时对发病动物进行确诊治疗提供形态学依据。