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介绍了在不解体车用发动机的情况下,通过测试曲轴箱窜气量的大小,即可检测活塞环与气缸壁的磨损程度的一种专用检测仪器,并以EQ6100发动机的结构特点为例,设计了专用测试用传感器,测出了其特性曲线,用低功耗单片机MSP430作为微控制器核心,构造了该测量仪器。测试结果表明:该仪器抗扰能力强,测试精度高,测试简单、方便,为发动机故障诊断提供了依据,用户可把仪器的结构、参数稍加改动即可应用于其它类型发动机的不解体故障诊断,具有一定的通用性。 相似文献
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哺乳动物胚胎分割技术研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
胚胎分割是指将哺乳动物的胚胎采用手术或非手术的方法从子宫或输卵管中取出,人为的利用机械或化学方法将其分割成2个或多个部分,分割后的每个部分在适宜的条件下进行体外培养、移植回受体子宫或输卵管(或不经过培养直接移植),可从1枚胚胎获得2个或多个基因型和表型一致的后代。胚胎分割技术可用于扩增可用的优良胚胎的数目和生产同卵双胎、同卵多胎的克隆动物,可用于濒危动物的保护,也可为早期胚胎遗传疾病的检查和性别鉴定等技术提供一种活体组织检查的方法。作者将介绍胚胎分割的研究进展、技术方法及其相关问题。 相似文献
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小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR技术,从小鼠基因组中克隆了1.6kb乳清酸蛋白(WAP)基因5′上游调控序列,经酶切和测序证实与已知序列基本一致.为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达,将此序列与报告基因CAT融合,构建了pWAP-CAT-polyA乳腺定位表达载体,脂质体包裹后,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达.分别于家兔分娩后1~10 d采奶,用ELISA检测乳汁中CAT含量.结果表明,所构建的载体在家兔乳腺中能够表达,表达水平在家免分娩后1~5 d较高. 相似文献
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本研究采用爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞(JBCFF),并以发生重编程的细胞为核供体进行体细胞核移植,研究其对克隆效率的影响.分别超排3只爪蟾,收集卵母细胞后提取其抽提物,用BCA蛋白浓度测定试剂盒确定其蛋白含量,SDS-PAGE分析其中所含蛋白的种类.应用细胞膜透化剂Digitonin对建立的JBCFF进行通透处理和PI染色,筛选最适浓度;并用获得的抽提物处理牛体细胞,获得重编程细胞.以发生重编程的体细胞为供体进行核移植,同时比较离子霉素+6-DMAP和A23187+6-DMAP两种组合激活后克隆胚的体外发育能力.结果,3个爪蟾卵母细胞抽提物样品的蛋白浓度分别为56.2255、64.6570和71.2158 μg/mL,其中所含蛋白种类一致,主要集中在40~55、70~100 ku之间.经过连续的筛选,透化剂Digitonin对JBCFF通透处理的最适浓度为7 μg/mL,PI染色显示透化效率为55.44%.爪蟾卵母细胞抽提物与体细胞共孵育后继续培养6~7 d,细胞聚集形成"克隆簇".分别以"克隆簇"细胞和未处理细胞为核供体,制备的重构胚在融合率(92.83%和96.04%)、卵裂率(89.64%和89.78%)和囊胚率(24.06%和23.12%)均无显著差异(P>0.05);离子霉素+6-DMAP和A23187+6-DMAP两种激活方式对克隆胚胎的分裂率(92.16%和92.28%)和囊胚率(23.21%和24.18%)均无显著影响(P>0.05).爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛体细胞发生重编程,并恢复到较低的分化状态,但没有显著促进克隆胚胎的体外发育,可见缺少对胚胎发育起重要作用的重编程过程,还需要继续深入研究. 相似文献
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我国岩溶分布非常广。随着时代进步,我国水利工程建设也在迅猛发展,而修建在岩溶地区的水库自然也越来越多。在岩溶发育的岩基上筑坝,水库修建的基础处理以及水库周边和库区渗漏通道的防渗处理对于水库的安全以及建成后的使用是极为重要的。本文结合一些岩溶区暗河水库防渗灌浆成功的案例,对此进行了总结与探讨。 相似文献
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卵母细胞的化学去核是采用干扰染色体分离或纺锤体正常功能的化学试剂,使其所有染色质通过纺锤丝牢固结合,并借助极体排出的惯性将所有染色质全部带出胞外,达到去核目的。目前以化学去核处理的MⅡ期卵母细胞为受体,已获得克隆小鼠。然而,第一次减数分裂期的小鼠卵母细胞经化学去核后,进行核移植还未见报道。与传统的机械去核相比,该方法对卵母细胞无机械损伤,完全是极体的自然排放;同时细胞质及其中核重编程相关因子损失量小;而且高效、省时,程序简单,所得的卵胞质或许更适合于供体细胞核的重编程。剪取超排小鼠的卵巢,以注射器刺破有腔卵泡后获得卵母细胞和卵丘细胞复合体,进行体外成熟培养。成熟培养5 h后去除卵丘细胞,挑选生发泡破裂的细胞顺序移入含脱羰秋水仙碱(DC,0.4μg/mL,2 h)和DC(0.4μg/L) 放线菌酮(CHX,50μg/mL)的M16培养液中继续培养,直到第一极体排出。去核卵胞质与胎儿成纤维细胞用植物凝集素(PHA,200μg/mL)粘合后,转入电击槽;施加1个5 V/mm、3μs交流电脉冲和2个92 V/mm、70μs直流电脉冲进行电融合。3 h后,以SrCl2激活6h,于四孔培养皿中制作的“孔中孔”(well of well)体外培养重构胚。试验重复3次,共计698个卵母细胞,获得的重构胚融合率和激活率分别为84.8%和93.6%;胚胎2-细胞发育率为24.7%,4-细胞率为6.74%;2-细胞期克隆胚移植假孕受体后,没有获得怀孕受体。试验分别以“血清饥饿”胎儿成纤维细胞、新鲜细胞和冷冻保存细胞为供体作核移植,结果表明,冷冻保存细胞的融合率(69.3%)与其余两组(80.6%和84.8%)呈显著差异(P<0.05);激活率、2-细胞和4-细胞发育率,则三组间差异不显著(P>0.05)。本研究将化学去核与无透明带技术相结合,完全丢弃了传统核移植的显微操作及其繁琐程序,属手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,同时提高了核移植的生产力,最终提高核移植总效率。 相似文献
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利用PCR技术从雄性中国荷斯坦牛的基因组DNA中克隆了Y染色体性别决定基因(Sex-deter-m in ing R eg ion on the Y Chrom osom e,SRY)的编码区全长序列,构建了表达载体pET-28a/SRY,并将其在大肠杆菌(E.coli)中进行了诱导表达,对表达产物进行了检测。结果表明,SRY基因编码区长687 bp,编码229个氨基酸;表达载体pET-28a/SRY构建成功;表达产物中含有相对分子质量为33 ku的SRY蛋白。 相似文献
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为了提高F413曲轴的加工精度,研制了在线测量仪器,设计了专用测试用传感器。该仪器将单片机与人工神经网络相结合用于主动测量,综合了单片机和人工神经网络的优点,克服了传统位移传感器输出电压与位移量难以线性化等缺点,实时显示被磨削曲轴相对于标准轴的大径、小径的动态尺寸。测试结果表明:该仪器抗扰能力强,测控精度高,测试简单。用户可把仪器的结构、参数稍加改动即可应用于其它类型的曲轴进行在线检测,具有很强的实用性。 相似文献
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