龙眼体胚发生早期miR166初级体的克隆与表达分析

为了解龙眼miR166初级体基因Pri-miR166 S53结构特点及其前体和成熟体在龙眼体胚发生早期的表达模式,采用SMART~(TM) RACE试剂盒和PCR扩增技术克隆龙眼体胚早期miR166基因的初级体(Pri-miR166 S53),确认其转录起始位点,并预测其含有的潜在ORF;利用龙眼基因组数据库提取其启动子序列,预测其含有的顺式作用元件;用实时荧光定量PCR对龙眼体胚发生早期及不同激素处理下的胚性愈伤组织中miR166基因的前体(Pre-miR166 S53)和成熟体(miR166a.2)表达模式进行分析。结果表明:获得长317 bp的Pri-miR166 S53基因初级体序列,对其进行翻译,得到一条长13个氨基酸序列的miPEP(MLCFVDALFLIST)。利用生物信息学软件分析Pri-miR166 S53基因的启动子序列发现,除了具有TATA/CAAT-box外,还含有生长素、脱落酸、乙烯、水杨酸、茉莉酸甲酯及spl、HSE等特异作用元件。实时荧光定量PCR分析表明,在2,4-D调控的龙眼体胚发生早期过程中,从胚性松散型愈伤组织发育到球形胚的过程中,Pri-miR166 S53基因的前体pre-miR166 S53和成熟体miR166a.2都表现为下调趋势;而在无2,4-D调控的龙眼体胚发生早期中,pre-miR166 S53和miR166a.2表达模式不同。此外,pre-miR166S53随ABA和乙烯处理浓度升高呈下调表达,而对不同浓度2,4-D处理无应答;miR166a.2随2,4-D、ABA处理浓度升高呈下调表达,而在乙烯处理下呈上调表达。上述研究结果提示miR166前体和成熟体在对外源激素应答的模式上并不呈简单线性相关,可能存在多层次、多方位的调控。     

槲皮素对苎麻、涤纶的吸附性能初步研究

本文以生物黄酮配基槲皮素为分散染料,对苎麻分别在77℃乙醇染浴中和在93℃水染浴中进行了染色实验,并与合成纤维涤纶进行对比,为苎麻和涤纶用天然染料进行染色的工艺选择提出了初步方案。结果表明槲皮素是一种理想的环保天然分散染料。     

畜牧业安全生产与环境保护

在畜牧业快速发展的同时,出现了环境污染和畜产品安全问题.为适应新时期农业经济结构战略性调整和加入WTO需要,农业部从2002年开始在全国范围内全面推进"无公害农畜产品行动计划".提高农畜产品质量安全水平,是农业经济结构战略性调整的重要内容,也是应对入世挑战,提高我国农畜产品市场竞争力的一项重要举措,对于保护消费者合法权益和增加农民收入都有重要意义.     

浅谈如何做好生猪定点屠宰检疫工作

生猪定点屠宰检疫工作,是生猪产品质量安全的基础和保证,是控制和切断疫病传播蔓延,保障人民健康的重要手段。本人在泸西县城生猪定点屠宰场从事检疫工作已有7年的经历,据统计,7年来共检疫定点屠宰生猪达27.77万头,在实践中,对生猪宰前检疫、宰后检验,总结出了一套行之有效的技术措施。现将生猪屠宰检疫（验）的技术、步骤、要点及处理方法作简要阐述。     

遗传改良生物(GMO)检测方法

随着全球GMO(Genetically Modified Organisms,缩写为GMO)的快速发展和美国、阿根廷、加拿大、中国等16个国家6 000万hm2的大面积种植,ISTA对转基因作物(transgenic crop)检测十分重视,已组织3次GMO能力测试.现将ISTA技术委员会B·卡勒特编写的有关GM种子测定方法整理编译于后,供我国读者参考.     

以沙棘标准化促进沙棘资源建设和产业开发

沙棘大规模的种植与开发是近20多年来,随之沙棘标准不断完善,现已颁布行业标准10项、地方标准20多项、企业标准多项,基本形成了比较完善的标准化体系。沙棘标准涵盖了种子、苗木、育苗、种植、验收、效益监测、沙棘汁加工、沙棘果叶的采摘、沙棘籽油、沙棘黄酮、沙棘原汁等资源建设、行业管理、产品加工及产品标准等各个方面。这些标准的出台,有效地规范了育种、育苗、种植和管护过程,提高了种植成活率、保存率和成材率,加快了标准化示范区建设,提升了产品的质量和资源开发综合效益。     

中药现代提取技术

中药成分复杂,为了提高疗效、减小使用剂量、便于制剂,需要经过提取、纯化处理。中药的提取纯化是一个复杂过程,传统方法包括溶剂分离法、溶剂萃取法、沉淀法、盐析法、透析法及结晶法。随着科学技术的发展,现代提取技术的出现,从根本上克服了传统提取纯化方法的缺点。论文对中药现代提取方法进行了综合分析。     

大宗工业用户基本电费计收及注意事项

<正>近年来,国家为完善两部制电价计收方式,促进企业转型升级,降低实体经济成本,对基本电费计收规则进行了较大修改。为便于农电同仁熟练掌握,笔者简单进行以下归纳,不妥之处请指正。1收取基本电费的目的大工业用户所适用的两部制电价包含电度电价和基本电价,通过电度电价收取的是电度电费,     

奶牛继发性爬卧病的治疗

<正>奶牛爬卧可能由多种因素所致,包括代谢、外伤、感染、变性和中毒等。若牛长时间躺卧(一般24 h)后牛依然无法站立,由于重压对其肌肉和神经造成损害,就可能发展为母牛卧地不起综合征的继发性爬卧病。本文重点介绍本病的治疗方法。1一般性处理爬卧母牛常出现低血钙,如果钙剂治疗对患有低血钙     

文心兰HSP70基因的克隆及表达分析

为研究文心兰热激蛋白70基因（命名为OnHSP70）的分子特性及表达特点,以文心兰‘柠檬绿’（Oncidium hybridum ‘Honey Angel’）为材料,采用RT-PCR技术克隆OnHSP70,利用生物信息学方法分析其分子特性,通过qRT-PCR技术分析其在不同组织及不同非生物胁迫处理下的表达特点。生物信息学分析表明：该基因开放阅读框为1944 bp,编码647个氨基酸,翻译的蛋白为稳定蛋白,属于HSP70超家族,其蛋白二级结构由41.11%的α-螺旋、17.77%的延伸链、7.73%的β-转角和33.38%的无规卷曲组成,具有2个高度保守的功能域。聚类分析表明：该蛋白与铁皮石斛和深圳拟兰的HSP70亲缘关系较近。qRT-PCR分析表明：文心兰HSP70在4种不同组织器官中具有表达差异性,在花中的表达量最高;高温处理后基因的表达量明显上升;40 ℃高温胁迫4 h时表达量达峰值;茉莉酸甲酯及水杨酸处理时表达量呈现下调响应。本研究为后期该基因功能研究及提高文心兰对高温的适应性提供理论基础。