朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶真核表达载体构建及在293T细胞中表达条件

乙酰胆碱酯酶(AChE;EC 3.1.1.7)是神经传导中调节神经递质乙酰胆碱水平的一种关键酶,是有机磷和氨基甲酸酯类农药的主要作用靶标。目前关于朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶的真核表达还未见报道。本研究拟构建朱砂叶螨AChE的真核表达载体,进行在293T细胞中表达条件摸索。将朱砂叶螨野生型ace完整读框和去掉3’疏水区的ace基因分别插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,经PCR和双酶切鉴定及测序验证后,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1/ace。采用GFP报告基因确定在293T细胞中表达条件摸索,结果表明293T细胞的最适转染时间为48h和LipofectamineTM2000转染试剂的最适加样量为20μL。本试验成功构建了朱砂叶螨AChE的真核表达载体,确定了在293T细胞中的表达条件,为后续筛选新型选择性AChE抑制剂奠定了基础。     

强化屋顶绿化养护 确保植物种植成活——北京地区屋顶绿化存在问题及解决方法的探讨

屋顶绿化是城市绿化的有益补充,在城市绿地资源高度紧张的情况下,它是提高城市绿化覆盖率,改善生态、景观环境,节约能源,缓解城市热岛效应,建设宜居城市的重要举措之一。因此,北京市把做好屋顶绿化工作作为为群众办实事、提高2008年奥运环境质量的重要举措来抓。近年来,北京市各区、县园林绿化主管部门在屋顶绿化协会和北京市园林绿化局的领导下,大力开展屋顶绿化工作,使全市屋顶绿化工作快速发展、成效显著。目前,北京市屋顶绿化工作已成为城市绿化美化工作的一项重要组成部分,     

朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶的表达纯化及其酶活测定条件优化

乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)是生物体内保证神经信号正常传递的关键酶,是有机磷和氨基甲酸酯类农药的作用靶标。现研究拟采用发酵罐培养含pET-30a/ace的表达菌株E.coli BL21(DE3),大量表达纯化螨AChE,利用单因素试验和正交试验优化AChE活性的测定条件。结果表明:发酵培养的重组菌株大量表达约为68kD的朱砂叶螨AChE蛋白。底物浓度、温度、pH和酶浓度等各测定因素对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶活性存在显著影响。确定朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶活性测定的最佳反应条件为:底物浓度1mmol/L,pH值7,温度35℃,酶浓度0.5mg/mL。通过体外发酵培养纯化获得了大量的朱砂叶螨AChE重组蛋白,确定了螨AChE活性测定的最佳条件,为进一步研究其酶学性质以及AChE抑制剂的体外筛选奠定基础。     

果实蝇饵剂对龙滩珍珠李橘小实蝇的田间防治效果

聪绿果实蝇饵剂是一种防治橘小实蝇的新型饵剂,在天峨县龙滩珍珠李果实膨大期进入转色期之前开始使用,连续3次,平均虫口减退率达80.47％,平均虫果率控制在3.12％.饵剂使用便捷,防治效果好,且不接触果实,还能减少农药使用量,值得推广应用.     

北京城区屋顶绿化几种主要有害生物的识别与防治初报

屋顶绿化与地面其它绿化形式一样．都存在着有害生物（病、虫及杂革）的威胁。本文列举了北京屋顶绿化中发现和常见的主要有害生物．记述了种类识别，形态特征、发生时期及防治方法。     

RSS提要分析与阅读器设计

RSS是在线分享内容的一种简易方式.网站提供RSS提要,方便用户获取网站内容的更新,而用户借助于RSS阅读器订阅这些RSS提要后,可以在不打开该网站页面的情况下获取相应的聚合信息.本文分析了RSS的概念及RSS提要文件的文件结构,并据此设计了一个RSS阅读器.     

花重北京城,赏花正当时(上)

正每年阳春三月,百花争艳!此时的北京城里春意正浓,姹紫嫣红,正是观花、赏花的好时节。居民朋友们纷纷走出家门,来到公园里、山野中感受着春天的气息,尽情享受着春花带来的无限生机和美丽,憧憬着一年的幸福生活。如此的美景还得益于北京今年特殊的气候。前阵子北京经历了有气象记载以来最温暖的一个春     

野生观赏花卉系列之＂紫花地丁＂

“紫花地丁”（Vi0IayedoensisMakino）是北方早春最著名的野花之一．它是堇莱科堇菜属多年生草本植物。为何说它是北方早春最著名的野花之一呢7那是因为”紫花地丁”是北方早春最早盛开的野生地被草本花卉之一。     

观赏野花系列之＂长瓣铁线莲＂

说起铁线莲．大家对它也许并不陌生,尤其是接触过园林以及花卉栽培等专业的人士更应对它们有一定的了解,因为铁线莲属植物在世界上被称之为“攀援皇后”,可谓大名鼎鼎。记得当年老师讲到铁线莲属植物时．精神抖擞、神采飞扬地描述着铁锨莲的美丽与神奇,老师说他在考察一次某某自然保护区时意外发现某种铁线莲属特有种。后又讲到了铁线莲属植物的应用前景．说它的观赏价值是多么多么的珍贵,甚至于在世界上都被称之为“攀援皇后”。     

塑料制品厂创业小指南

随着社会的进步,经济的发展,生活水平的提高,人们对产品的包装和形象的宣传越来越重视,对包装袋作为广告载体的认知度也越来越高。塑料袋低值易耗的特点,决定了市场的永不饱和,是真正的朝阳行业。巨大的市场为投资该行业的朋友提供了广阔的前景。成本分析办一个塑料制品加工厂,