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实验探讨了大豆黄酮(DAI)对伊莎鸡卵泡发育及其芳香化酶(P450arom)mRNA表达的影响。实验选取16只产蛋后期伊莎鸡,等分为对照组和DAI处理组。对照组饲喂基础日粮,实验组在基础日粮中添加10 mg/kgDAI。实验持续7周后,分离排卵前卵泡(F1、F2、F3……)的颗粒层及小黄卵泡和大白卵泡,通过RT-PCR法检测P450arom mRNA表达的相对丰度。结果表明:DAI明显提高了伊莎鸡小黄卵泡和大白卵泡的数量,P450arommRNA在伊莎鸡不同发育阶段卵泡中的表达存在差异,部分卵泡P450arom mRNA表达的相对丰度显著增加。因此,在产蛋后期伊莎鸡基础日粮中添加DAI可增加不同发育阶段卵泡的数目,上调部分卵泡中与发育相关的基因表达以促进卵泡发育。 相似文献
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利用牛垂体细胞体外无血清培养技术,研究了促甲状腺素释放素(TRH)、促性腺激素释放素(GnRH)、促黄体激素(LH)和催乳素(PRL)对牛垂体细胞PRL分泌的调节。细胞在培养箱内预培养24小时后开始各项处理,以后隔24小时采集培养液一次,并换新的相同处理的培养液。结果表明:GnRH和TRH在第一次处理时均能显著增加PRL的分泌。加入1、10、100ng/ml的GnRH可使PRL分泌量分别增加53%(P<0.05)、111%(P<0.01)和60%(P<0.01),而TRH只有在10、100ng/ml的剂量时明显引起PRL释放增加(P<0.01)。第二次处理时细胞对TRH的反应消失,但对GnRH的反应却发生了逆转,PRL分别降低了70%(P<0.05)、68%(P<0.05)和73%(P<0.05)。表明GnRH和TRH在培养初期具有促进垂体细胞释放PRL的作用。LH(1、10、100ng/ml)对牛垂体细胞PRL的分泌无影响。但LH和TRH合用时,100ng/ml LH可明显地降低由TRH引起的PRL分泌(P<0.05)。PRL本身对牛垂体细胞的分泌有自我调节作用,100、1000ng/ml的PRL处理细胞使其分泌的PRL显著下降,分别降低70%(P<0.05)和100%(P<0.001)。此外1000ng/ml的PRL可显著地抑制由GnRH在第一次处理时引起的PRL释放。本实验在垂体细胞水平说明多种激素对PRL的分泌调节具有调控作用。 相似文献
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奶牛酪蛋白αs1基因片段的扩增及泌乳素对其基因表达的影响 总被引:3,自引:1,他引:3
从泌乳中国黑白花奶牛的乳腺组织中提取基因组RNA,根据报道的奶牛酪蛋白αs1 mRNA序列设计其上、下游引物,用RT-PCR进行cDNA扩增,获得1条434bp的片段。测序分析结果表明,该片段为奶牛酪蛋白αs1 cDNA的部分序列,编码130个氨基酸组成的多肽;除一个碱基发生变异外,其余部分与报道的乳腺酪蛋白αs1cDNA序列完全一致。以此为基础,并以GAPDH为内标,研究了不同浓度泌乳素对旋转培养下奶牛乳腺组织酪蛋白αs1基因表达的影响。结果表明,奶牛乳腺组织在培养24h后,泌乳素为10μg/mL组的酪蛋白αs1基因表达水平最高,且显著高于对照组和2.5μg/mL组(P〈0.01),而与5.0和7.5μg/mL组之间差异不显著(P〉0.05);对照组与2.5、5.0和7.5μg/mL组之间,2.5μg/mL组与5.0、7.5和10.0μg/mL之间差异均极显著(P〈0.01),而5.0μg/mL以上的3组之间差异不显著(P〉0.05)。结果提示,泌乳素的添加浓度以5.0μg/mL为佳。 相似文献
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探讨了前列腺素PGF2α类似物氯前列烯醇(Cloprostenol,CLO)对鸡等级前小黄卵泡颗粒细胞增殖的作用及其信号转导途径。颗粒细胞经16 h预培养后用CLO处理24 h,测定细胞的增殖情况。结果显示:0.1~10μg/L的CLO促进了颗粒细胞的增殖,10μg/L时刺激效果最为明显。蛋白激酶A(PKA)激活后颗粒细胞数量增加,PKA抑制剂H89抑制了CLO的促增殖作用。PKC的激活或抑制对CLO的促增殖作用无显著影响。这表明,CLO可通过PKA途径促进鸡等级前小黄卵泡颗粒细胞的增殖。 相似文献
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前言精液可以在-196℃的液氮中保存,解冻后仍具有较高的受精能力。尽管如此,冷冻—解冻后的精液中仍有不少精子死亡和失去活力。因此,为了获得较高的受精率,输精剂量一定要高于新鲜精液。卵黄或牛奶是牛冷冻精液稀释液的基本成分。试验发现与甘油类似的其他冷冻保护剂的 相似文献
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本实验建立了肝细胞体外培养的二种方法。①组织块-细胞培养法:取7~10日龄兔新鲜肝脏,剪成1 mm~3的组织块,洗涤后种植于培养瓶中,加入含5%胎牛血清(FCS)的199培养液,待组织块周围长出大片肝细胞时。用0.25%胰蛋白酶(含0.03%EDTA)消化液分离肝细胞,并进行传代,得到较纯的肝细胞。②肝细胞直接培养法:0.5mg·mL~(-1)胶原酶 相似文献
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多种动物血清中生物活性LH/CG的放射受体测定法(RRA) 总被引:1,自引:0,他引:1
利用绵羊卵巢黄体细胞膜作为 LH / CG受体来源 ,以放射性12 5 I- h CG作为示踪标记配体 ,以高纯度的h CG为标准品建立标准曲线 ,建立了一种有效的 LH- RRA测定方法。它能够直接检测多种动物血清中与受体结合的具有生物活性的 LH的动态变化。该法测定程序简单 ,在 2 h内完成并获得可重复性结果。测定方法的灵敏度为 0 .3ng/管 ,批内和批间误差分别为 ( 3.4 1± 3.14 ) %和 ( 8.70± 7.93) %。动物 (牛、兔、猪 )垂体液中 LH含量反应曲线和 h CG标准曲线平行良好。牛、羊、猪、兔、鼠和仓鼠血清中 LH的剂量反应曲线和h CG标准曲线的平行性表明 ,该 LH- RRA可以用来检测不同动物血清中的具有生物活性的 LH变化。回收试验表明 ,在该测定方法中加入 3、10、30 ng h CG时的回收率分别为 ( 10 0 .59± 5.55) %、( 99.55± 9.86 ) %、( 10 4 .2 8± 7.4 5) %,说明测定结果的正确性。该 LH - RRA的测定结果反映了动物正常的生理状态。本试验垂体中有活性的 LH水平远远高于外周循环中的水平 ,雌、雄动物循环血液中的 LH含量不一致。 相似文献