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高赖氨到基因导入玉米自交系的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对18个玉米自交系的组织培养,筛选到8个可以正常分化的自交系。用基因枪的方法对其中的4个自交系进行了遗传转化,将高赖氨酸基因导入玉米的胚性愈伤组织,以减少潮霉素筛选次数和筛选浓度的方法,得到分化再生植株,经分子检测,证明外源基因已成功整合到玉米基因组中。部分T0代植株正常结实,通过对T1代植株的分子检测,表明外源基因可以稳定遗传,对其中的转化植株所结的种子进行了赖氨酸含量的检测,发现赖氨酸含量最高提高了16%。 相似文献
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H5N2与H5N1禽流感油乳灭活疫苗免疫鹅群对H5N1流行株攻毒的保护效力及母源抗体对免疫效力的干扰 总被引:5,自引:0,他引:5
应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2灭活苗理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。 相似文献
3.
用水稻基因芯片筛选小麦耐旱相关基因 总被引:2,自引:0,他引:2
为了解小麦在干旱逆境条件下的基因转录规律,采用PEG6000对耐旱小麦(Triticum aestivum)品种旱选10号进行拟旱处理,分别提取0、1、6和24h植株的总RNA,经反转录荧光标记制备cDNA探针,并将其与含有6万Oligo的水稻全基因组芯片进行杂交,扫描采集数据后并进行结果分析。在1、6和24h样品中分别检测到差异表达基因166、207和328个,随着处理时间的延长,差异表达基因数目增加。对差异基因进行功能分类,能量代谢途径相关基因在1、6和24h差异表达基因总数中所占比例分别为4.2%、8.2%和16.8%,其中大部分为光合作用相关基因,并且主要表现为上调,但Psbr和Rubisco编码基因的转录水平为下调,暗示它们在耐旱反应中发挥着一定作用。 相似文献
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为调查湖北武汉、汉川、监利及咸宁地区19群中后期发生大肠杆菌征候群肉鸡的病因,临床调查后采集相应病料及血清,实验室研磨离心处理后备用。首先对病料进行相关病原的PCR检测;对采集的血清进行血清学检查。然后进行病例复制,病料攻毒1dSPF鸡观察病变,并采集SPF鸡病料和血清再进行相关抗原和抗体的检测。结果19份病料有10份出现CAVPCR阳性,3份REVPCR阳性,2份NDPCR阳性,3份IBDPCR阳性;304份血清系列病原ELISA抗体检测结果中CAV抗体阳性率和滴度水平均最高,其他检测项目未见规律性;SPF鸡病例复制出现CAV典型病变。研究表明湖北地区肉鸡中后期大肠杆菌感染与CAV的感染密切相关。 相似文献
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水稻高效RNA干涉体系的建立及其在受体激酶基因功能研究中的应用 总被引:8,自引:0,他引:8
利用RNA干涉(RNAi)技术,可以特异性的抑制真核生物体中目标基因的表达。本研究构建了适合水稻转化的RNAi诱导载体pCADS1341。为检测其有效性,使用它构建了针对GUS基因的RNAi载体,并利用基因枪转化法导入GUS基因稳定表达的转基因水稻愈伤组织。GUS染色分析结果表明该载体中RNAi诱导元件的瞬时表达可显著抑制GUS基因的表达。为探讨影响水稻中转基因诱导的RNAi效率的因素,对针对某个目标水稻基因的水稻RNAi植株进行了详细的分析。通过Southern和Northern杂交检测了T0代RNAi植株中T-DNA插入的拷贝数和目标基因的表达量,筛选出T-DNA为单拷贝插入,且目标基因的表达被高效抑制的株系。对来源于该株系的T1代植株进行了半定量RT-PCR检测,结果表明RNAi效应可以遗传给后代转基因水稻植株,但是不同个体中的RNAi效率存在差异。RNAi系统的表达量可能是决定RNAi效率的最关键因素。我们建立的高效RNAi技术体系对于水稻功能基因组学研究具有重要意义,利用这个系统我们已经构建了60多个水稻受体激酶基因的RNAi载体,系统的研究正在进行中。 相似文献
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经高赖氨酸基因导入玉米自交系的研究 总被引:22,自引:0,他引:22
通过对18个玉米自交系的组织培养,筛选到8个可以正常分化的自交系.用基因枪的方法对其中的4个自交系进行了遗传转化,将高赖氨酸基因导入玉米的胚性愈伤组织.以减少潮霉素筛选次数和筛选浓度的方法,得到分化再生植株.经分子检测,证明外源基因已成功整合到玉米基因组中.部分T0代植株正常结实,通过对T1代植株的分子检测,表明外源基因可以稳定遗传.对其中的转化植株所结的种子进行了赖氨酸含量的检测,发现赖氨酸含量最高提高了16%. 相似文献
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细胞周期蛋白CycD2基因是在拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组中发现的,对调节细胞周期具有重要作用的调控因子。研究利用RT-PCR技术由拟南芥幼苗mRNA扩增了CycD2基因,构建了超量表达载体并对单子叶植物水稻(Oryza sativa ssp. japonica)进行了转化。对获得的转基因植株进行半定量RT-PCR分析表明,CycD2 mRNA的确能够在水稻中积累。超量表达CycD2的转基因水稻植株在发育早期生长与发育加快,表现为幼苗植株根长和株高均显著高于对照(转空载体植株),加快了水稻的生长速率。 相似文献
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应用鸡胚成纤维细胞(CEF)扩增鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)并提纯后作为抗原建立了具有较高特异性和灵敏性的间接ELISA方法.通过方阵滴定法来确定抗原最佳包被浓度为2.7μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,其阳性临界值为OD≥0.113.将400份FPV免疫实验鸡血清用本方法进行检测,其阳性检出率为81.25%(325/400).此外,将该方法与琼脂扩散试验进行比较检测血清样品,结果显示本方法的灵敏度比琼脂扩散试验灵敏400~800倍,而且还有特异性强,操作简便、快速等优点. 相似文献