禽类呼肠孤病毒的分子生物学

禽类呼肠孤病毒(Avianreovirus,ARV)能感染多种禽类,并能分离出病毒,感染的禽类包括:鸡(Olsonetal.,1957)、鹅(Krauss,1965)、火鸡(Simmonsetal.,1972)、番鸭(Gaudryetal.,1972)、鸽(McFerranetal.,1976)、北京鸭(Jones&Guneratne,1984)一些鹦鹉类(Meulemansetal.,1983)和其它野鸟(Heffals-Kedmannetal.,unpublished)。国内王锡坤(1985)首次证实我国存在鸡病毒性关节炎以来,相继分离到多株鸡源性的病毒株。近几年流行于江浙、广东和福建一带的番鸭“花肝病”经吴宝成(2001)等证实是由番鸭的呼肠孤病毒(Muscovryduckreovirus,DRV)感…     

鸡抗热应激制剂的研制与应用(一)抗热灵Ⅰ号的应用试验

热应激是养鸡业夏秋间影响鸡生产性能的重要因素,特别是我国南方各省受害更大。热应激的危害性主要表现有：鸡的热休克造成鸡的死亡,气温在３９℃４小时以上,鸡即可能中暑死亡;４１℃３小时死亡,４３℃２小时死亡［１］;产蛋量下降,气温在２５～３０℃之间,每升高１℃,产蛋量下降１５％,蛋重减轻０３克／枚［２］。此外,鸡的薄壳蛋及破壳蛋增多等。据生产经验,同一鸡种及相似的饲养管理条件,在我国南方饲养的种鸡或蛋鸡,每羽母鸡比北方的少产蛋２０～４０枚。Ｋｒｅａｇｅｒ（１９９３）报道,在鸡舍温度２６６℃以上时…     

中国禽(番鸭)呼肠孤病毒分离株S1基因全序列分析

采用RT-PCR技术,分别以DRV-YH、DRV-YJL两株中国禽(番鸭)呼肠孤病毒RNA为模板,扩增了S1全基因的cDNA片段.将S1 cDNA克隆到T载体后进行序列测定,测序结果表明所扩增的cDNA片段长1643个核苷酸,包含了完整的S1基因的三个开放阅读框架(ORF1,ORF2和ORF3)和基因两端的非编码区.核苷酸序列比较分析结果表明:DRV-YH与ARV-S1133,176分别有6个,10个核苷酸的差异,DRV-YJL与ARV-S1133,176分别有8个,12个核苷酸的差异,DRV-YH与DRV-YJL有4个核苷酸的差异.     

番鸭呼肠孤病毒的分离与鉴定

从番鸭肝“白点病”患鸭的肝脾匀浆中分离到 7个病毒分离株 .在电镜下观察到病毒粒子呈球形 ,无囊膜 ,有可见的双层衣壳结构 ,外壳直径 75nm,内核直径 50 nm;病毒核酸型为 RNA;不凝集鸡、鸭、兔、豚鼠红细胞 ,与禽呼肠孤病毒有一定的抗原相关性 ;对番鸭胚和鸡胚成纤维细胞可致感染细胞圆缩、融合 ,出现多核细胞和巨细胞 ,胞浆内有近核包涵体 ;试验感染 1日龄敏感雏番鸭死亡率达 10 0 % ,临床及病理变化与自然感染发病的番鸭基本一致 ,并可回收到该病毒 .结果表明 ,目前国内流行的番鸭肝“白点病”病原为呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属番鸭呼肠孤病毒     

禽呼肠孤病毒血清学相关性及S3基因序列同源性分析

采用血清学交叉中和试验方法,分析了4株禽呼肠孤病毒株CL(鸡源禽呼肠孤病毒)、YH和YB(鸭源禽呼肠孤病毒)及S1133(禽呼肠孤病毒标准株)之间抗原的相互关系;并对CL株的S3基因进行克隆测序,用DNAsis和Prosis等分析软件进行序列比较及推导氨基酸序列分析.结果表明:4株禽呼肠孤病毒株之间具有共同的群特异抗原,但不同病毒株间存在中和抗原位点的不对称性;血清学相关性与S3基因序列及其推导的σB蛋白氨基酸序列同源性不一致,表明禽呼肠孤病毒诱导机体产生特异性中和抗体的病毒蛋白不止σB蛋白一个,σB氨基酸序列同源性与血清学相关性没有必然的直接联系.     

番鸭呼肠孤病毒YB株σNS基因的克隆和序列分析

参考GenBank鸡正呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)和番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirns,DRV)σ非结构蛋白(σNS)基因序列设计合成1对引物,对番鸭呼肠孤病毒YB(DRV-YB)株σNS基因进行RT-PCR扩增,克隆到pMD18-T载体中,并对克隆产物进行PCR鉴定和测序...     

中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB株S4基因序列分析

应用非免疫番鸭胚增殖中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株,用LSTRIAZOL提取病毒RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株S4基因节段cDNA.将S4cDNA克隆到PMDl8-T载体上,并进行了鉴定和核苷酸序列测定.序列分析结果,克隆的S4cDNA共1 124bp,包括非编码区和完整的阅读框架.分子进化系统分析表明该毒株与禽呼肠孤病毒(鸡呼肠孤病毒)的亲缘关系较远,DRV-YB与DRV-89330同缘率为93.3%.     

新城疫V4＋C30复合疫苗的制备和免疫研究

将新城疫病毒V4株与克隆－30株组成复合疫苗，两疫苗株在等浓度（1：500稀释）条件下不存在明显的相互干扰现象，高浓度（1：10稀释）V4株可以抑制低浓度（1：500稀释）C30株致死鸡胚的能力，免疫研究表明，复合疫苗兼顾了两种疫苗株的优点。     

新城疫病毒和减蛋综合征病毒同鸭胚增殖的研究

鸭源新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｄ１０）和减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）可以在鸭胚中同时良好增殖，两种病毒的血凝价分别与单独接种时一致；同胚增殖病毒对鸭胚或ＳＰＦ鸡胚的感染能力和致病性分别与单独接种组无显著差异；利用同鸭胚增殖病毒的尿囊液制备的二联油乳剂灭活疫苗接种免疫鸡可以分别抵抗ＤＮＶ强毒和ＥＤＳＶ强毒的攻击。