新疆日光温室高架基质促成栽培草莓品种比选试验

为促进新疆草莓产业转型升级和高质量发展,开展了新疆地区10个主流栽培草莓品种高架基质栽培比选试验。结果表明,在高架基质栽培下圣诞红和宁玉结果较早,香野长势较强,香野、圣诞红、黑珍珠和宁玉抗白粉病性强,艳丽和黑珍珠果实硬度高,红颜和黑珍珠可溶性固形物含量较高,可溶性糖以章姬、妙香7号和黑珍珠较高,糖酸比以红颜、章姬和妙香7号较高,Vc含量以妙香7号、黑珍珠和越秀较高,单果重以红颜和妙香7号较高,产量以红颜和香野较高。10个品种各有优缺点,可综合考虑本地需求及品种特性进行合理的品种配置。根据产量、可溶性固形物含量、糖酸比、白粉病病果率加权得分,筛选出新疆高架栽培具有一定推广前景的草莓品种有红颜、章姬、香野和粉玉1号。     

牛乳铁蛋白基因N-lobe的cDNA克隆及毕赤酵母表达载体的构建

以牛乳腺组织总RAN为模板,经RT-PCR得到牛乳铁蛋白基因的N-lobe片段并将其克隆到pGM-T克隆载体上,最后将其连入表达载体pPICZαA中,构建牛乳铁蛋白基因N-lobe的酵母表达载体。结果表明：克隆片段大小为1028bp,与Gen Bank中登录的序列的相应部位相比,所获牛乳铁蛋白N-lobe cDNA序列的同源性为99.7%;重组表达质粒经酶切和PCR鉴定构建正确,为酵母表达乳铁蛋白基因N-lobe奠定了基础。     

利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓皱缩病毒(SCV)和草莓镶脉病毒(SVBV)

[目的]通过对反应条件和参数的摸索与优化,建立多重RT-PCR检测方法,实现2种病毒的同时高效快速检测。[方法]通过CTAB法与试剂盒提取RNA,以优质的总RNA为模板,进行梯度PCR,结合扩增内标的检测体系,建立多重RT-PCR检测方法。[结果]建立了优化的SCV和SVBV的多重RT-PCR检测体系,可以对草莓田间植株进行快速稳定的病毒检测。[结论]该研究为草莓病毒检测提供一种方便、高效的分子生物学方法,为草莓无病毒苗的实际生产提供技术支撑。     

人参茎段组织培养研究

以MS为基本培养基,附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA,研究不同激素水平对人参茎段诱导不定芽的影响。结果表明:MS培养基+2,4-D 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+6-BA 0.5 mg/L诱导效果最好,出芽率可达100%。不定芽在适宜培养基上能快速增殖。带腋芽茎段在培养过程中可产生丛生芽,经继代培养可大量增殖。小苗在1/2 MS培养基中容易生根,健壮小苗经驯化后移栽,成活率可达100%,建立了人参的快繁体系。     

藤椒油的分子振动光谱分析研究

为开发藤椒油的鉴别和品质控制方法,利用红外光谱技术和激光拉曼光谱技术研究了藤椒油的分子振动光谱,并与市售品牌商品花椒油、菜籽油、花生调和油的光谱进行比较研究。结果表明,藤椒油的红外光谱有7个强吸收谱带和3个弱吸收谱带;拉曼光谱有8个强的拉曼散射峰和3个较强的特征拉曼散射峰,其中波数为1 260 cm~(-1)和1 305 cm~(-1)拉曼谱峰的强度相同,可作为鉴别藤椒油的拉曼光谱特征;藤椒油的红外光谱和拉曼光谱中有4个结构的分子振动模式,既有红外活性又有拉曼活性。     

荷花转录组测序及花青素苷合成相关基因表达分析

以荷花不同花色品种‘青玉'和‘白洋淀红莲'为研究对象,运用高通量测序技术,对松蕾期的花瓣进行转录组测序,并对2个测序文库进行差异表达及实时荧光定量PCR分析。结果表明:共获得1 142条差异表达基因。筛选出与花青素苷合成相关的关键基因ANS、CHS、DFR、UF3GT。4个基因在两种荷花花瓣不同时期中的表达量存在显著差异,在松蕾期或初花期的表达量最高。     

大肠杆菌不耐热肠毒素A、B亚单位基因双价植物表达载体的构建

不耐热肠毒素LT是肠产毒性大肠杆菌（Enterotoxigenic E．coli，ETEC）分泌的一种热不稳定性肠毒素，由A、B两种亚单位组成的AB5型杂六聚体蛋白，是目前人们发现的最强有力的粘膜免疫原和粘膜免疫佐剂之一。本研究利用基因工程技术，从强致病菌株K88ac中，分别克隆了LTA和LTB基因，并利用高效植物表达载体pBI121、pBLG和pCAMBIA2300成功构建了带有内质网滞留信号RDEL／KDEL不耐热肠毒素A、B哑单位基因双价植物表达载体pCAMBIA2300-LTA—LTB。为研究LT全毒素在植物中的正确组装及进一步构建带有保护性抗原类全毒素嵌合植物疫苗奠定基础。     

和田地区烟粉虱种群生物型及番茄病毒病的检测

为了明确和田地区设施温棚烟粉虱种群的生物型及设施番茄黄化曲叶病的病毒种类,采集47团温棚7种寄主作物上的烟粉虱,利用特异性引物,通过普通PCR方法鉴定其生物型;对温棚采集的番茄病株,利用番茄黄化曲叶病毒、番茄褪绿病毒的特异性引物,通过RT-PCR检测确定番茄病毒种类.结果显示,和田地区温棚烟粉虱种群生物型均为Q型,番茄黄化曲叶病的病毒种类均为番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),由此得出和田地区番茄黄化曲叶病由Q型烟粉虱传毒,并提出病虫绿色防控措施.     

牛乳铁蛋白多肽的合成及抗菌活性试验

用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽LfcinB基因片段.合成片段与酵母表达载体DPICZα A重组,构建胞外分泌表达载体pPICZα A-LfcinB,通过限制性内切酶Sac Ⅰ酶切线性化,电击法转化毕赤酵母X-33宿主菌,Zeocin抗性筛选,经PCR检测LfcinB基因与毕赤酵母染色体稳定整合.阳性克隆经甲醇诱导表达LfcinB,诱导表达6 d,每24 h取上清1 mL,进行抑菌试验.结果表明,抗菌肽牛乳铁多肽基因已整合剑酵母细胞基因组中并获得表达,经0.5%甲醇在30℃诱导48 h可产生较高抗菌活性的抗菌肽,表达产物具有较强杀菌作用.     

十字花科蔬菜提取物对草莓专化型尖孢镰刀菌的抑菌活性研究

为研究不同十字花科植物提取物的抑菌活性,采用菌丝生长速率法,测定芥菜、茼蒿、甘蓝、油菜和雪里蕻提取物对草莓枯萎病原菌菌丝生长的抑制作用。结果表明,5种十字花科植物提取物均对草莓专化型尖孢镰刀菌有一定抑制作用,随提取物浓度降低,抑菌率呈现降低的趋势,浓度为1 g/mL时下提取物的抑菌率可达到73.13%～82.33%。通过毒力方程的测定,茼蒿的EC₅₀为0.413 0 g/mL,对尖孢镰刀菌抑制效果最好,芥菜、雪里蕻和油菜EC₅₀为0.473 5～0.491 5 g/mL,这3种植物提取液毒力相当,甘蓝的EC₅₀最高,对病原菌抑制效果最弱。进一步可利用十字花科植物之间的化感作用合理安排与草莓轮、间作,减轻草莓枯萎病病害发生,为草莓枯萎病防治和植物源农药先导化合物的研发提供技术依据。