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为建立猪瘟病毒(CSV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)现场快速鉴别检测方法,参照GenBank中CSV和PRRSV特异性基因序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测CSV和PRRSV的一步法荧光RT-PCR方法,并验证了该方法的特异性、敏感性、重复性。结果显示,该方法检测CSV和PRRSV的灵敏度分别可达0.25和1.99 TCID_(50)/100μL,对猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。本试验建立的TaqMan一步法荧光定量RT-PCR检测方法,可对CSV和PRRSV进行快速诊断,适合现场检测。 相似文献
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猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、高度接触性猪呼吸道传染病,给养猪业造成很大的危害,猪流感病毒也可感染人类,威胁人类的生命健康。文内通过综述我国猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法的研究进展情况,以期对猪流感的诊断和防控工作提供参考。 相似文献
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为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)核酸的荧光PCR方法,试验根据GenBank中ASFV的p72基因和PCV2的ORF1基因序列,分别设计特异性引物,通过对加样体系和扩增程序的优化,建立了检测ASFV和PCV2的双重SYBR GreenⅠ荧光PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价,最后对收集的临床样品进行检测。结果表明,最终确立的20μL反应体系中各引物最佳添加量为:F1 0.7μL、R1 1.0μL、F2 0.8μL和R2 1.5μL;优化后的扩增反应程序为:95℃预变性3 min; 94℃变性5 s, 54℃退火20 s (此处收集荧光),40个循环。该方法具有很好的特异性,不与其他常见猪病原体发生交叉反应。检测ASFV和PCV2的灵敏度分别可达5.6 copies/μL和3.2 copies/μL,Tm值的批内和批间变异系数均不高于1.0%,对14份临床样品的检测结果与参比方法一致。本研究所建立ASFV和PCV的双重SYBR GreenⅠ荧光PCR方法敏感性高,特异性好,可用于临床2种疾病的快速检测。 相似文献
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非洲猪瘟病毒感染猪后可引起猪高热、皮肤和内脏器官出血,死亡率可达100%。2018年8月我国报道首例非洲猪瘟病例,目前除台湾外全国各省份均有发病,给我国养猪业造成的损失惨重。分子生物学方法是确诊非洲猪瘟的最快速、有效和实用的方法,文章综述了6种常用检测方法,为非洲猪瘟的确诊和防控工作提供了参考,希望对养猪业有所帮助。 相似文献
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猪布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种慢性细菌性传染病。仔猪和老龄猪对该病具有一定抵抗力,症状表现不明显,性成熟期猪易感性增高,母猪表现为流产、产死胎、不孕等,公猪表现为睾丸炎、腱鞘炎和关节炎等。文章主要从猪布鲁氏菌病的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断及防控措施等几个方面进行阐述,以期为该病的诊断及防控提供参考。 相似文献