细胞因子的检测及其在鸡免疫抑制病中的应用

细胞因子的检测方法分免疫学检测法、分子生物学检测法和生物学活性检测法。感染鸡的多种病毒引起的免疫抑制与细胞因子的分泌水平和表达异常有关。因此,对细胞因子的检测为鸡病毒性免疫抑制病的发病机理和防制方法的研究提供了重要依据。     

猪流感——不容忽视的潜在人兽共患病

猪流行性感冒(swine influenza,SI),简称猪流感,是由猪流感病毒(SIV)引起的猪的一种急性、热性和高度接触性呼吸道传染病.临床上以发病突然、病程短、发病率高和死亡率低为特点,全群常常几乎同时感染,如无并发症,多数病猪可于6～7 d后康复,因此常被人们所忽视.但是实际上SI不仅可引起病猪高热、食欲减退、咳嗽、呼吸困难,还可以造成病猪平均日增重降低、怀孕母猪流产,而且极易引起其他病毒和细菌的混合感染,使疫情变得更加严重.需要特别指出的是,SIV在流感病毒的种间传播中具有重要作用,对人类健康造成了很大的威胁.因此,正确认识SI不仅具有重要的经济意义,而且具有重要的公共卫生意义.本文就这方面研究进展做一综述,以更好地预防和控制流感.     

PRV和PCV2二重PCR检测方法的建立与初步应用

为建立同时检测猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)2种病毒的多重PCR,设计2对PRV和PCV2特异性引物,建立同时检测这2种病毒的二重PCR方法,并对采自呼吸障碍病猪的病料进行检测。结果表明,PRV和PCV2扩增产物分别为359bp和482bp,最小DNA质量分别是2.7pg和4.3pg。采自河南省的80份样品的总阳性率为85%(68/80),其中PRV和PCV2阳性率分别为28.8%(23/80)和77.5%(62/80),混合感染率达25%(17/68)。该多重PCR检测方法敏感、特异、快速,可用于临床样品PRV和PCV2检测。     

猪流感病毒NP基因的克隆及杆状病毒转移载体的构建

本研究通过RT-PCR扩增了猪流感病毒A/ Swine/ Inner Mongolia/ 547/ 01 (H3N2)的NP基因,并将其克隆入pMD 18-T载体.重组pMD 18-T经Sal I 和 EcoR I酶切后得到的NP基因插入pMelBacB载体的Sal I/EcoRI位点.PCR和限制性内切酶分析鉴定表明成功构建了pMelBacB-NP转移载体.这为开发NP诊断抗原和亚单位疫苗奠定了基础.     

猪圆环病毒Ⅱ型PCR检测方法的研究

【目的】建立快速、简便、特异的检测猪圆环病毒II型的PCR方法;【方法】根据已发表的猪圆环病毒II型基因序列设计合成了一对引物,用酚-氯仿法抽提可疑病料中的病毒DNA,应用PCR技术对猪圆环病毒进行基因扩增,PCR产物进行序列测定;以猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒为对照,进行特异性试验;取部分病料进行重复性试验;【结果】PCR方法扩增出了长度为702bp的片段,扩增产物经测序和序列分析表明扩增的序列为PCV2序列;猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒的PCR扩增均为阴性,与预期结果一致;部分病料PCR重复检测5次,检测结果完全一致;【结论】PCR检测方法可以对猪圆环病毒病作出敏感、特异、准确地诊断,该方法检测的基因最低模板量为2×10-5ng/ml。     

运输性应激对商品肉鸡的影响及其预防

<正>商品肉鸡的运输存在多种可造成潜在损伤的因素,机体面对这些突然的改变在短时间内很难适应,导致功能减退,代谢发生异常,轻则表现为失重,影响肉品及副产品质量,重则引起死亡。据调查发现,运输性应激引起的死亡率通常是0.1%～0.6%,对整个欧盟来说,大概相当于每年死掉     

《动物传染病学》课程互动式教学模式的探讨

互动式教学模式强调课堂上要同时发挥教师和学生双方的作用。《动物传染病学》是一门实践性很强的学科,该课程要求注重师生双方的互动关系,课堂上要求师生充分发挥各自的主体作用,使教与学得到有机的统一和密切的配合,从而提高教学效果。     

鸡白细胞介素-18(ChIL-18)重组蛋白的生物学活性检测

对含有鸡白细胞介素-18(ChIL-18)基因的质粒在大肠杆菌(Escherichia coli)内进行诱导表达,经亲和层析法对表达产物进行纯化,用微量细胞病变抑制法CEF-VSV系统,检测其对SPF鸡脾淋巴细胞诱导产生γ-干扰素(IFN-γ)的活性和其对病毒的抑制效果;用3H-TdR掺入法和MTT法分别检测其对T淋巴细胞诱导转化和NK细胞杀伤活性的作用。结果表明,经诱导表达出分子量44kD的目的蛋白(与GST融合表达),纯化后得到去除菌体蛋白的高纯度目的蛋白;该蛋白能够诱导脾细胞产生IFN-γ,当浓度为250ng/mL时诱导IFN-γ的活性最高,可达1×106U/mL;但该蛋白不能直接抑制水疱性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上生长;能够刺激淋巴细胞显著增殖,浓度为250ng/mL时效果最佳;适当浓度的rChIL-18蛋白能促进NK细胞的杀伤活性,浓度为150ng/mL时,作用最强。利用原核表达的重组鸡白细胞介素-18蛋白与天然鸡IL-18蛋白一样具有较广泛的生物学活性。