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为构建布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因的原核表达载体,并进行表达、鉴定。从羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M株的基因组中克隆BMEI0742基因片段,亚克隆到pMD19-T载体中并测序,克隆至表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-BMEI0742利用大肠杆菌进行表达,并进行Western-Blot检测,对该蛋白功能进行生物信息学分析。成功构建了pET-28a-BMEI0742原核表达载体,SDS-PAGE检测结果显示,重组蛋白的分子量约是50 ku,BMEI0742蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。本研究成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因,并成功获得了BMEI0742蛋白,该蛋白具有与布鲁氏菌自身蛋白相同的抗原性,为布鲁氏菌翻译延伸因子Tu,为进一步研究其免疫性和保护性以及在布鲁氏菌的致病机制奠定基础。 相似文献
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为研究乳酸菌对菊芋茎叶青贮品质和发酵特性的影响,以菊芋茎叶为试验材料,利用青贮发酵罐调制青贮饲料。以添加0.2%乳酸菌(T)为试验组,不添加乳酸菌(C)为对照组,分别在发酵1、7、15、30、60 d开封,分析添加乳酸菌对菊芋茎叶营养品质、发酵特性及体外产气量和干物质消化率(IVDMD)的影响。结果表明:1)盛花期菊芋茎叶DM含量为320.7 g/kg(鲜样基础),可溶性糖(WSC)含量为22.60%(DM基础),缓冲能值为50.62 mEq/kg(DM基础),较适合制作青贮饲料。2)添加乳酸菌可降低菊芋茎叶青贮饲料pH值、乙酸、丁酸和NH3-N含量(P<0.05),增加乳酸含量、DM含量、WSC含量,提高感官品质(P<0.05),而对中性洗涤纤维(NDF)及酸性洗涤纤维(ADF)无显著影响(P>0.05)。3)随着发酵时间的延长,两处理青贮菊芋的pH值、DM和WSC含量均表现出逐渐下降的趋势,而乙酸、丁酸、NH3-N和乳酸含量则在第7天显著增加,之后趋缓,第60天最高。4)添加乳酸菌可以增加青贮菊芋体外24 h总产气量和I... 相似文献
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