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1.
抗菌肽分泌型载体的构建及转基因马铃薯中蛋白的胞外分泌 总被引:10,自引:0,他引:10
马铃薯青枯病是一种维管束病害。为使抗菌肽分泌到细胞外以提高抗菌能力,将抗菌肽m Cecropin B或Shiva A基因分别和大麦(淀粉酶的信号肽序列连接后,克隆到经改造的植物表达载体pBI121中,构建成分泌型表达载体。经冻融法转入根癌农杆菌LBA4404,叶盘法转化马铃薯栽培品种米拉,Southern杂交证明外源基因已整合到马铃薯基因组中。用透射电镜观察到加接信号肽序列的转基因植株茎、叶的细胞 相似文献
2.
3.
耐除草剂转基因水稻基因飘流可能产生的环境安全问题是人们关注的焦点之一,并已成为耐除草剂转基因水稻能否在我国生产上发挥效益的限制因素。基因拆分技术能够有效地控制转基因目标性状飘流,为培育耐除草剂转基因水稻提供新的途径和思路。本研究将耐除草剂基因G2-aroA拆分成N端(EPSPSn,1~295aa)和C端(EPSPSc,296~435aa),分别与SspDnaE蛋白内含肽的N端(Intein-N)和C端(Intein-C)连接形成融合基因EPSPSn-In与Ic-EPSPSc,并分别通过农杆菌介导法转入受体材料中花11。Southern杂交证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因为单拷贝插入。侧翼序列分析证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因分别插入第2和第6染色体。利用四引物法筛选出转基因水稻En-12和Ec-22的纯合系,并通过有性杂交获得同时含有EPSPSn-In与Ic-EPSPSc的转基因水稻En×Ec。草甘膦抗性分析发现,单独含有1个基因片段的转基因水稻En-12和Ec-22不具有耐受草甘膦特性,而同时含有2个基因片段的转基因水稻En×Ec具有耐受草甘膦的特性,说明拆分后的2个蛋白片段在intein的介导下重新组装成完整有功能蛋白,并赋予转基因水稻耐受草甘膦的特性。转基因水稻En×Ec与含有完整G2-aroA转基因水稻G2-6相比,其耐受草甘膦的能力有所下降,但能够满足生产需求。本研究结果为利用基因拆分技术培育转基因耐草甘膦水稻提供了科学依据,同时也为利用基因工程手段培育转基因杂交稻提供了新的技术平台。 相似文献
4.
5.
[目的]为了保证扬州盐水鹅的卫生质量和品质。[方法]对扬州盐水鹅在不同保存温度下菌落总数、菌相和pH值的变化进行试验性观察。[结果]当菌落总数达到106 cfu/g、腿肌pH值为6.5以上时,均有异味产生;腐败过程中的优势菌种,37℃为肠球菌属和葡萄球菌属,20℃为变形杆菌属,4℃为假单胞菌属;对于当天制作并于中午出售的盐水鹅,其保存期限建议值为:37℃不超过7 h,20℃不超过24 h,4℃不超过6 d。[结论]该研究为建立健全可供盐水鹅新鲜度鉴定使用的卫生评价指标提供了依据。 相似文献
6.
转5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因抗草甘膦烟草和棉花的获得 总被引:12,自引:0,他引:12
以从抗草甘膦的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)G2中克隆的、并按双子叶植物偏爱密码子改造的5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因aroAG2M为目的基因,用菊花Rubisco小亚基的启动子驱动,在基因的5'端加叶绿体定位信号肽,构建植物表达载体。用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的叶盘法转化烟草(Nicotiana tabacum)获得转基因植株,PCR检测表明,外源基因已整合到烟草基因组中。转基因和非转基因植株6~8叶龄苗的叶片涂抹不同浓度的草甘膦异丙胺盐,表明转基因植株可抗4‰浓度的草甘膦,而非转基因对照植株则在2‰草甘膦时即死亡。花粉管通道法转化棉花(Gossypium hirsutum),得到3株具有草甘膦抗性的转基因植株,PCR和Southern检测显示,外源基因已整合到棉花基因组中,田间喷洒草甘膦异丙胺盐水剂,表明T1代转基因植株具有草甘膦抗性。 相似文献
7.
8.
水稻两系法育种虽然取得了很大成就,但在理论和实践上还有许多不完善的地方需要解决。GB028S的选育成功,标志着光敏不育系在北方直接利用成为可能。同时也为两系不育系的选育提供了方法。根据杂交后代的生育特点,提出 50.0cm+26.7cm×16. 7cm的高产栽培新技术。 相似文献
9.
绿鑫钾镁肥是一种矿物型钾肥.试验结果表明,绿鑫钾镁肥作为底肥一次性施入35kg/667m^2可比施用硫酸钾10kg/667m^2增产9%左右:施用量过多或过少都不利于经济效益的提高。 相似文献
10.