鲁氏耶尔森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克隆、生物信息学与免疫原性分析

为筛选潜在的保护性抗原基因研制鲁氏耶尔森氏菌（Yersinia ruckeri）基因工程疫苗,实验利用特异性引物扩增分离自斑点叉尾（Ictalurus punctatus）的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并对其进行分子克隆,应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,并进行了omp F蛋白的表达和免疫原性检测。结果显示,omp F基因全长1 095 bp（Gen Bank登录号KP159420）,包含一个编码364个氨基酸的完整开放阅读框,其氨基酸序列具有极高保守性,与Y.ruckeri外膜穿孔蛋白omp F（Gen Bank登录号ADK27779.1）亲缘关系最近,序列一致性为99.2%,进化树聚为一支;具有1个革兰氏阴性菌穿孔蛋白保守结构域,存在1个信号肽和1个跨膜区,是一种跨膜蛋白;具有12个与免疫相关的抗原决定簇区域。SDS-PAGE分析发现该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀,经Western-bolt显示omp F蛋白具有较好的免疫原性。以上结果表明omp F基因可作为Y.ruckeri基因工程疫苗的候选抗原基因。 

     

肉仔鸡肾型传染性支气管炎和鸡新城疫混合感染的诊治

鸡传染性支气管炎雏鸡发病最为严重,以肾脏病变为主要特征,并伴有呼吸道症状主要集中在15～40日龄,肉仔鸡多发。采用新城疫、传支冻干苗倍量紧急接种的办法,一般能很快控制疫病,治疗效果较好。     

北方大棚茶生产加工技术

日照绿茶作为“南茶北移”的成功范例,种植面积占山东省茶园面积50%以上。它具有“滋味美、香气浓、耐冲泡”的独特品质,已逐步享誉国内外。近几年,随着农业结构调整,作为设施农业工程的重要项目,大棚茶也形成一定规模,成为茶区农业发展的支柱产业和农民增收的重要途径。现将设施栽培类大棚冬茶生产加工技术介绍如下:     

棉花抗病核不育两用系的培育及应用研究

１９７８ 年开始选用含棉花核雄性不育基因ｍ ｓ１４的两用系４７３Ａ、抗枯萎病品种陕棉９ 号及抗枯黄萎病品种中棉所１２, 通过杂交转育、病圃与非病圃、可育株与不育株的双重交叉选择, 成功地培育出抗枯萎耐黄萎和抗枯萎抗黄萎的核不育两用系抗Ａ１ 和抗Ａ２。并对其抗性遗传、抗性与产量的配合力及其利用情况进行了研究, 以抗Ａ１ 和抗Ａ２ 作母本已选配成３ 个杂交种应用于生产。     

瓦氏黄颡鱼头肾组织学观察与先天性免疫屏障研究

为探明瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)头肾组织结构和先天性免疫屏障,该研究用苏木素-伊红(HE)染色法和改良James染色法对瓦氏黄颡鱼头肾的显微结构进行了观察,并使用台盼蓝活体染色法对头肾免疫屏障部位进行了定位.结果显示,瓦氏黄颡鱼头肾由被膜、淋巴细胞聚集区、粒细胞聚集区、前肾间组织、网状纤维...     

中国A2纯合型奶牛选育现状、问题和建议

<正>近年来,中国牛奶产量、乳制品的销售额、乳制品消费量呈现出增长态势。2020年中国牛奶产量3440万吨,同比增长7.5%。2022年牛奶产量3932万吨,比2020年牛奶产量增加14.3%。中国奶牛养殖业在畜牧业中占据重要地位,奶牛养殖业的发展水平是现代农业发展水平的重要标志。同时,奶业产业链长,可以带动种植业、饲料加工、良种繁育、奶牛饲养、运输、乳品加工、营销、     

机耕船的发展适应性与经济性

机耕船(船式拖拉机)是我国首创的新形态拖拉机,近年来发展很快,得到用户的欢迎,受到国内外农机界的关注。本文从我国水田机械化的地位、现状和问题山发,在工作机理、环境因素、牵引特性、操纵性能、生产效率、劳动条件、技术经济效果等方面,对船式拖拉机的适应性与经济性进行了理论分析和对比分析,从而可以看到它较传统拖拉机更为符合水稻区域机械化的自然和经济状况,具有广阔的发展前景。     

鱼类鳃病的诊断与防治

近年来,我国渔业飞速发展,养殖规模不断扩大,随着密养、精养模式的不断推广,由生物性因素和非生物性因素引起的鱼类病害问题日益突出,其中由细菌、真菌、寄生虫、甲壳动物、营养和水环境等因素引起的鱼类鳃病在生产上最为常见,造成的危害也十分严重。     

鮰爱德华菌外膜微孔蛋白ompN1、ompN2和ompN3基因生物信息学分析及截段基因的原核表达与其抗原性检测

根据GenBank中鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)外膜微孔蛋白N(outer membrane porin protein,OMP)基因序列(NC_012779.2)设计引物,以鮰爱德华菌Ms12基因组DNA为模板,经PCR扩增后克隆至pMD19-T载体,将阳性克隆菌送公司测序。测序结果通过生物信息学软件对ompN1、ompN2和ompN3序列的氨基酸序列相对分子质量、分子式、信号肽、跨膜区、亲/疏水性、B细胞表位进行预测,并构建系统发育树;根据去信号肽的B细胞表位相对集中区域设计特异性引物,经PCR扩增后,将截段序列克隆至pMD19-T载体,鉴定成功后克隆至原核表达载体pET32a(+)并转化至BL21(DE3)/Rosseta(DE3)进行IPTG诱导表达,最后用兔抗鮰爱德华菌血清对重组蛋白OmpN1、OmpN2和OmpN3进行免疫原性检测。结果显示扩增得到ompN1(1 143bp)、ompN2(1 056bp)和ompN3(1 053bp)的序列,获得的基因登录号分别为KJ831564、KJ831565和KJ831566。经生物信息学分析显示,OmpN1、OmpN2和OmpN3蛋白分子式分别为C1940H2993N543O622S7、C1817H2723N497O579S5和C1896H2843N519O563S7,相对分子质量大小分别为44 100、40 900和41 800,均为含有1个信号肽和跨膜区的疏水性蛋白,具有1个革兰阴性细菌OM_channels超家族结构域,是1种嵌入型的膜外蛋白;SDS-PAGE电泳检测发现,诱导表达的融合重组蛋白均以包涵体的形式出现在沉淀中,大小分别约为61 800、58 700和59 100;Western-blot分析表明,重组蛋白OmpN1、OmpN2和OmpN3均能与兔抗鮰爱德华菌全菌血清结合,表明鮰爱德华菌外膜微孔蛋白N具有亚单位疫苗开发的潜力。