检测猪戊型肝炎病毒的荧光定量PCR方法的建立

根据GenBank中猪戊型肝炎病毒的ORF2核苷酸序列的保守区域设计合成一对特异性引物,建立了一套SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR检测猪源戊型肝炎病毒(swHEV)的方法,并评价了该方法的灵敏度、稳定性和特异性,同时与常规的RT-nPCR进行对比分析.结果表明,建立标准曲线的相关系数为0.998,斜率为-3.039,Ct值变异系数(CV)在0.17％～1.41％之间,有良好的稳定性.同时在检测猪群常见病中显示出很好的特异性,并且比RT-nPCR更灵敏,适合于swHEV的检测.     

广州和深圳猪口蹄疫情况

<正> 2010年2月22日,广州白云区石井街黄金围发生生猪疫情,3月1日经国家口蹄疫参考实验室检测,确诊该起疫情为生猪O型口蹄疫疫情,向OIE汇报,发病生猪共1474头,同群猪共计8382头已全部扑杀并作无害化处理。     

浅谈仔猪腹泻病的防治

近年来,仔猪腹泻病是一直困扰养猪业的一大难题,尽管在仔猪腹泻病的病原学研究方面有一定进展,但仔猪腹泻仍然是养猪生产中的常见病、多发病。其病因复杂,给预防、治疗工作带来很大的难度。虽然该病一年四季均可发生,但在寒冷、气温多变、阴雨连绵季节,该病暴发尤为严重。所以,在该病暴发之前或暴发同时做好该病的防控工作尤为重要。     

GS-441524体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制效果

利用CCK8方法测定GS-441524作用Marc-145细胞的安全浓度,并通过检测该化合物在病毒吸附、内化、核酸复制环节对病毒的感染能力、mRNA与蛋白合成能力的影响,评价了GS-441524体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的活性,确定其在体外抑制PRRSV的作用阶段。结果显示,在Marc-145细胞中,GS-441524具有良好的抗PRRSV活性,其EC₅₀为2.65μmol/L;该化合物在体外显示出良好的安全性,其CC₅₀为2 706.41μmol/L;对PRRSV复制周期的影响是GS-441524主要抑制PRRSV的复制早期阶段,而对病毒吸附、内化环节无阻断作用。结果表明,GS-441524具有抗PRRSV复制的潜在能力,该结果为抗PRRSV药物的选择和开发提供了新思路。     

应用RT-PCR检测鸭肝炎病毒Ⅰ型感染

鸭肝炎病毒Ⅰ型(duck hepatitis virus Ⅰ,DHV Ⅰ)感染是雏鸭的一种急性高度致死性传染病,主要侵害4周龄以内的雏鸭,特别是1周龄以下的雏鸭最易感染,死亡率较高,是危害养鸭业最为严重的传染病之一[1].1945年在美国首次发现,我国于1963年在上海首次报道了该病的临床病例,至今,全国各养鸭地区均有不同程度的发生和流行.目前,已有多种检测DHV Ⅰ抗原的方法,如免疫电镜、Dot-ELISA和病毒中和试验等,这些方法在DHV Ⅰ的诊断中各有优势.PCR作为一种新的分子生物学检测技术,具有灵敏度高、快速、特异、操作简单等优点[2～4].本实验通过目前已发表的DHV Ⅰ基因组序列相对保守的区域设计引物,成功建立了RT-PCR方法检测鸭肝炎病毒1型.     

2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响

Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测细胞凋亡的方法.结果表明实验组Caspase3的表达在各时间段里与对照组相比均呈上升趋势,提示了PCV2感染可以上调Caspase3水平,从而增加被病毒感染组织的细胞凋亡,而小鼠心、脑、脾等组织Bak基因表达明显上调,Bcl-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高.这些结果揭示了PCV2感染BALB/c小鼠后,相关细胞凋亡基因在体内的作用与机制,同时为今后细胞凋亡的检测提供了新的方法.     

Taqman探针荧光定量PCR快速检测猪圆环病毒2型

猪圆环病毒(PCV)为圆环病毒科圆环病毒属成员,单股环状DNA病毒,为已知的最小动物病毒之一[1]。PCV存在两种血清型,即PCV1和PCV2,两者的细胞培养物均不产生细胞病变。PCV2首先由Allan等[2]从患断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中分离到,被证明为PMWS的重要病原之一。此病主要     

垄作滴灌栽培条件下马铃薯品比试验研究

在垄作滴灌栽培技术条件下,对5个马铃薯品种进行了品比试验,结果表明:青薯9号、冀张薯8号和陇薯6号结薯集中,薯形较好,均适合商品生产,且各品种产量比露地旱作条件下增产15 t/hm2以上,增幅明显,效益显著。     

鸡血管瘤型白血病诊断初报

我国北方某地40多家养鸡专业户所养蛋鸡群自今年上半年以来出现一种以趾、翼、胸部皮肤有血疱、破损后出血不止直至死亡为特征的病例。根据临床资料及实验室检验结果,初步诊断为鸡血管瘤型白血病,现将有关资料汇报如下。1疾病的发生今年上半年以来,北方某地40多家养鸡专业户所养的罗曼蛋鸡先后出现一种以趾、翼、胸部皮肤有小血疱、血疱破损后出血不止,多以死亡而告终为特征的疾病。曾怀疑为维生素K缺乏症、卡氏白细胞虫病、葡萄球菌病、链球菌病、皮肤寄生虫病等,分别采取了调整免疫程序,更换饲料厂家,添加抗生素和磺胺类药物,添加维生素K…     

猪、犬旋毛虫DNA限制性片段长度多态性分析

以旋毛虫国际标准虫种Ｔ．ｓｐｉｄａｉｓ和Ｔ．ｎａｔｉｖａ作对照,应用ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对黑龙江省猪、大旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋虫和Ｔ．ｓｐｉｒｌａｉｓ酶切图谱相同;犬旋毛虫和Ｔ．ｎａｔｉｖａ酶谱一致,结果提示,黑龙江猪旋毛虫为Ｔｓｐｉｒａｌｉｓ,犬旋毛虫为Ｔ．ｎａｔｉｖａ。