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目的 构建pGST—HT1融合表达载体,并观察其在大肠杆菌中的表达情况。方法 基因扩增,融合表达载体的构建,SDS—PAGE电泳和Western blot分析。结果 对重组质粒进行酶切鉴定证实HT11片段已克隆到pGSTag的EcoRI和Sall位点之间。表达产物经SDS—PAGE电泳后显示在相对分子质量82000处出一条新生蛋白带,与HT1/GST(56/26)融合蛋白大小一致,提示成功表达HT1融合蛋白。Western印迹杂交结果也显示在相对分子质量82000处出现阳性着色条带。结论 本实验成功构建pGST—HTl表达载体,并诱导表达出HTl融合蛋白,为HTl蛋白功能和免疫原性的进一步研究奠定了基础。 相似文献
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目的了解珠海市艾滋病初筛实验室检测工作总体情况,探讨实验室质量考评发现的问题,促进艾滋病初筛实验室规范化管理。方法采用血清学能力考评、职能问卷调查和现场督导方式对各实验室进行考评,分析2006~2013年珠海市艾滋病初筛实验室检测能力和管理现状。结果艾滋病初筛实验室逐年增加,每年所有实验室质量考评成绩均为合格以上,实验室人员、设备和质量控制方面逐步完善,能满足艾滋病检测工作要求。结论随着质量考评的开展,珠海市艾滋病初筛实验室在设备配备、检测能力、质量控制和生物安全等方面有了很大提高。 相似文献
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目的 对珠海市4例不同时期新型冠状肺炎确证病例的呼吸道标本进行三代测序,获得新型冠状病毒全基因组序列,分析基因组突变及分子溯源情况。方法 采用nanopore 三代高通量测序技术对呼吸道标本中的新型冠状病毒基因组测序,基于artic流程组装病毒基因组序列,运用生物信息学软件分析病毒全基因组序列与参考序列的一致性与进化情况。结果 4份样本均可获得28 298~29 819 bp长度的基因组序列数,基因组覆盖度94.6%~99.7%,共检出46个碱基位点突变、涉及27处氨基酸变异,非同义突变占比58.7%(27/46),非同义突变中以ORF1ab 基因占比最高44.44%(12/27)。系统发育树显示,4份样本分属于B(Zhuhai/ZQ202001/2020)、B.1.36(Zhuhai/YZQ202011/2020)、B.1.1.63(Zhuhai/ZHG9671/2020和Zhuhai/P0717001/2020)进化分支,Zhuhai/ZQ202001/2020与武汉早期输入密切相关,Zhuhai/YZQ202011/2020、Zhuhai/P0717001/2020、Zhuhai/ZHG9671/2020与同时期香港新冠肺炎病例基因组序列相似性最高,与其流行病学调查结果一致。结论 4例珠海市新型冠状肺炎确证病例均为输入病例,不存在本地感染,核苷酸位点变异存在多态性。三代测序技术可有效用于原始样本中新型冠状病毒基因组序列的溯源分析,在地市级疾控应用前景较好。 相似文献
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目的:测定珠海市2012~2013年登革病毒的E基因序列,探讨其来源和基因型。方法:采集2012~2013年珠海登革热疑似病例的所急性期血清184份,采用荧光RT-PCR检测登革病毒核酸,取19份登革病毒核酸阳性标本扩增E基因并测序分型。结果:16例标本属于DVⅠ型,3例标本属于DVⅡ型。DVⅠ型同源性与2008年新加坡、越南等地DVⅠ型流行株接近,DVⅡ型同源性与2013年新加坡、马来西亚等地DVⅡ型流行株接近。结论:2012~2013年珠海市DV流行主要以Ⅰ型为主,近几年珠海市DV流行方式属于东南亚国家输入性病例引起的本地流行。 相似文献
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脑囊虫病及阿米巴肝脓肿病人合并弓形虫感染的研究广东医学院寄生虫学教研室(湛江市524023)魏泉德朱家勇赖秀球蠕虫或原虫感染可降低人对异种抗原的免疫反应,导致继发性免疫缺陷〔1〕。而弓形虫是一种机会致病性球虫,其感染率的高低及感染后是否发病与人体的免... 相似文献
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目的了解珠海市海产品中致病性弧菌的污染现状,为疾病的预防与控制提供科学的依据.方法于2012年1~12月共采集市售海产品240份,对副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌进行检测、分析.结果副溶血性弧菌检出率为19.2%,创伤弧菌检出率为15.8%,霍乱弧菌检出率为0%,5~9月份检出率最高,霍乱弧菌未检出.不同种类的海产品中,贝壳类的检出率最高,其副溶血性弧菌和创伤弧菌的检出率分别高达40%和43.3%,农贸市场和酒店的污染情况无明显差别.结论疾病控制及卫生监督部门应加强市售海产品的卫生监督,合理引导市民的饮食习惯,不生吃或进食未经煮熟的海产品,预防食物中毒的发生. 相似文献
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为探讨特异性IgG及其亚类对日本血吸虫病的疗效考核价值,用直接ELISA及间接ELISA 方法检测了264 份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病病人以及50 份正常人血清中虫卵抗原(SEA)和成虫抗原(AWA)特异性IgG、IgG1 和IgG4。结果IgGSEA 及IgG4SEA在治疗后3 个月出现有显著意义的下降且于治疗后12 个月降至正常;AWA特异性抗体均于治疗后6 个月才下降,其中仅IgG4AWA 于治疗后12 个月降至正常;IgG4SEA/AWA 在治疗后12 个月时的阴转率最高(97.7 %) ,IgGSEA 次之(75% )。表明治疗后SEA 特异性IgG 及IgG4 下降较AWA特异性抗体快;IgG4 为一短期抗体,尤其IgG4SEA,可作为判断日本血吸虫病是否治愈的指标。 相似文献
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环介导等温扩增(LAMP)技术检测奇异变形杆菌方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]建立一种检测奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)快速且特异的环介导等温扩增(LAMP)检测方法. [方法]针对奇异变形杆菌脲酶调节子编码基因(ureR)特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物,65℃孵育约60min,完成对奇异变形杆菌的扩增,扩增产物经电泳和酶切鉴定.利用LAMP和普通PCR方法同时检测1株奇异变形杆菌和13株非奇异变形杆菌来验证LAMP方法的特异性;将奇异变形杆菌菌液做一系列10倍稀释后用LAMP和PCR方法同时进行检测来比较两者敏感性. [结果]1株奇异变形杆菌扩增出LAMP特征性梯状条带,13株非奇异变形杆菌没有出现LAMP扩增,酶切也证实了LAMP产物的特异性;LAMP检测奇异变形杆菌的特异性与普通PCR相同,但其敏感性比普通PCR高10倍:LAMP检测奇异变形杆菌的检测下限为5 cfu/ml,PCR检测下限为50 cfu/ml.LAMP检测速度相比PCR更快速,在60 min内即可完成扩增反应.[结论]建立了一种特异、敏感、快速且不需要特殊设备的奇异变形杆菌LAMP检测方法,有望用于奇异变形杆菌的快速检测. 相似文献