PCR检测东北地区部分蜱种中埃立克体DNA

埃立克体病是近几年发现的一种自然疫源性疾病 ,可感染人和动物。临床表现为发热、头痛、肌痛、恶心、呕吐 ,白细胞和血小板计数减少 ,严重者有中枢神经系统受损症状和肾衰 ,甚至死亡。目前研究结果表明 ,埃立克体病主要由蜱传播。我国很多地区存在类似于传播埃立克体病的潜在蜱种 ,且人蜱接触机会多。这些地区 ,经常出现发热待查病人或不明原因的热病暴发。我们应用特异性引物对东北地区部分蜱体进行了埃立克体ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增 ,以寻找埃立克体在东北地区存在的证据 ,弄清受感染的蜱种和埃立克体感染的潜在传播媒介。1　材料与方法　 ( …     

黑龙江立克次体斑点热疫源地证实及病原学研究

我们于1984年在东北地区北部边境自然疫源性疾病调查研究中,从黑龙江省绥芬河等地三种蜱体内分离到数株斑点热群立克次体(SFGR),命名为SFG黑龙江立克次体。为明确该立克次体的分类学位置、对人致病性及疫源地特征与范围,我们进行了较系统的病原学研究和流行病学调查。通过从病     

蜱中人粒细胞埃立克体DNA的PCR检测及序列分析

目的了解吉林地区蜱种感染人粒细胞埃立克体的情况。方法采用16S rRNA基因特异引物进行半套式PCR,检测吉林省部分林区蜱中人粒细胞埃立克体DNA,并对扩增产物进行克隆和测序,与已知序列进行同源性比较。结果从采集于吉林地区的全沟硬蜱中检出人粒细胞埃立克体的特异性DNA片段,阳性率为1.98%。扩增产物经克隆、测序发现吉林地区人粒细胞埃立克体扩增片段与美国人粒细胞埃立克体分离株(GenBank注册号为U02521)16SrRNA基因序列相对应片段相差2个核苷酸,同源性为99.7%。结论吉林地区的全沟硬蜱携带人粒细胞埃立克体,提示吉林地区可能存在人粒细胞埃立克体病的自然疫源地。     

我国东北地区蜱中查菲埃立克体DNA的PCR检测及序列分析

为了解东北三省部分林区蜱感染查菲埃立克体的情况，采用16S rRNA基因特异引物进行半套式PCR，检测东北三省部分林区蜱中查菲埃立克体DNA，并选择有代表性的标本扩增产物进行克隆和序列测定。结果表明，采集于东北三省8个地区的全沟硬蜱和森林革蜱均检测出查菲埃立克体特异性DNA片段，其阳性率分别为3．00％和1．68％。扩增产物经克隆、测序发现与HME美国分离株(注册号M73222)16S rRNA相对应基因片段完全一致，为查菲埃立克体。结论：东北三省部分林区的全沟硬蜱和森林革蜱携带查菲埃立克体，提示东北地区可能存在查菲埃立克体病的自然疫源地。     

艾滋病病毒外膜蛋白与干扰素融合基因表达产物的免疫学研究

为了将艾滋病病毒外膜蛋白(env)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠，观察小鼠的免疫功能状态和细胞免疫应答，将IFNα-2b基因片段插入到env基因的下游，经脂质体转染，筛选重组痘苗病毒，经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。用重组病毒vJ16env／IFNα-2b免疫小鼠，以生理盐水和野生型痘苗病毒作为对照，检测小鼠脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性；用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4^+、CD8^+T细胞计数与CTL。结果表明，与对照组比较，实验组脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性显著增高(P&;lt;0．05)；CD4^T淋巴细胞计数和CTL活性也显著增高(P&;lt;0．05)；CD8^T淋巴细胞计数呈增高趋势，但未达到显著意义的程度。结论：重组病毒vJ16env／IFNα-2b能增强小鼠的免疫功能和诱导细胞免疫。     

江浙蝮蛇蛇毒中神经生长因子的分离新方法探讨

为从江浙蝮蛇蛇毒中分离出神经生长因子,采用 CM-Sepharose FF 及 Sephacryl S-200柱层析方法进行了分离纯化,从中分离出一种组分。该组分经鸡胚背根神经体外培养证明具有促进神经节神经纤维生长的活性,证实为神经生长因子。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为一条区带,其分子量约为27000,该试验结果表明用此种方法从江浙蝮蛇中提取神经生长因子是简便可行的。     

前列腺特异性抗原、性激素及酸性磷酸酶与前列腺体积的相关关系

为探讨前列腺特异性抗原(PSA)、性激素与酸性磷酸酶在不同年龄组与前列腺体积的相关关系。通过放射免疫分析检测了≥40岁540人血清PSA、性激素(睾酮、促黄体生成激素)和酸性磷酸酶的含量。并采用直肠超声检查检测前列腺体积；分析了4个年龄组这4种指标与前列腺体积的相关关系。结果表明，血清PSA含量随增龄而增高；睾酮含量随增龄下降，≥40岁各组与对照组(20～39岁)比较均明显降低；促黄体生成激素含量以40～49岁组增高最为明显。其它各组与对照组相比也有不同程度的增高；血清酸性磷酸酶含量各年龄组均波动于同一水平上。结论：血清PSA和促黄体生成激素与前列腺体积呈正相关关系，睾酮则呈负相关关系(r=-0．45，P&;lt;0．0001)；酸性磷酸酶含量与前列腺体积无关。     

用Vero-E6细胞大量增殖恙虫病立克次体的研究

目的　为了探讨建立一种简便而可靠的恙虫病立克次体增殖方法, 以得到较大量的恙虫病立克次体。方法　采用了以 Ｖｅｒｏ － Ｅ６ 细胞增殖恙虫病立克次, 并且对 Ｖｅｒｏ － Ｅ６ 感染细胞的培养条件进行了改进。结果　成功地使恙虫病立克次体在 Ｖｅｒｏ － Ｅ６ 细胞中得到大量增殖。结论　改进后的 Ｖｅｒｏ － Ｅ６ 细胞培养法可以获得大量的恙虫病立克次体, 该方法既经济又适用。     

黑龙江立克次体蜱传斑点热的病原学研究

目的 对我国东北地区蜱传斑点热进行病原学和流行病学研究。方法 建立并应用分子立克次体学方法,包括单克隆抗体、SDS－PAGE、免疫印迹、DNA酶切图谱、PCR／RFLP、PCR／SSCP及DNA序列分析等。结果 （1）在种的水平上研究了黑龙江分离株（代表株HLJ－54、36）,从分类学上确定其属立克次体属、斑点热群的一个新种,命名黑龙江立克次体（R.heilongiangii);（2）发现其现症患,并从病人血液分离到一株与黑龙江立克次体相同性质的立克次体株,证实了其对人的致病性。结论 流行病学调查和病原学研究证实华北地区存在黑龙江立克次体蜱传斑点热疫源地。     

东北地区恙虫病东方体分离株sta 56基因片段的扩增及序列分析

为了解东北地区恙虫病东方体分离株与其参考株的同源关系,采用了PCR技术扩增东北地区恙虫病东方体分离株sta56基因片段,测定HCAa9202和HCM9501株sta56基因片段的核苷酸序列,并与已知列的参考株进行同源性比较。结果显示,东北地区恙虫病东方体分离株均可在320～332bp范围内见到特异性扩增带,但MSAa9302株和MSAa9304株在此范围内分别可见2条和3条扩增带。HCAa9202株和HCM9501株与6个已知序列的恙虫病东方体菌株相比较同源性在67.72％～83.18％间,相对与Gilliam的同源性较高。