纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜细胞相容性的研究

目的探讨利用脉冲激光沉积（PLD）方法在人工心脏机械瓣膜上沉积的纳米相羟基磷灰石（HA）薄膜的组织相容性,为人工心脏瓣膜的构建提供理想的支架薄膜材料。方法将传代的人血管内皮细胞制成细胞悬液接种在HA材料上,置含5％（V／V）CO2、37℃的恒温培养箱内静态培养3周。分别在培养3、7、14和21d后取出部分材料,用2．5％戊二醛固定,乙醇梯度脱水,临界点干燥、喷金,于扫描电子显微镜（SEM）下观察细胞在材料上的附着情况。用四氮唑盐比色（MTT）法测定血管内皮细胞与材料复合培养的增殖能力。结果扫描电镜观察复合培养,见HA材料的表面有细胞附着且数目逐渐增多,到第21天时可见细胞融合成片,并将材料表面覆盖,部分区域有细胞外基质形成。MTT法评价材料对血管内皮细胞的细胞毒性,见细胞增殖未受到明显影响,生长良好。结论HA对血管内皮细胞的增殖和分化功能无明显影响,对细胞无明显毒性,具有良好的生物相容性,可以作为心脏瓣膜材料安全应用。     

羟基磷灰石膜复合材料上人血管内皮细胞分泌功能的研究

目的探讨羟基磷灰石膜复合材料上人血管内皮细胞分泌功能的变化。方法将人血管内皮细胞与纳米相羟基磷灰石（HA）薄膜复合材料体外复合培养，进行形态学和功能测定，同时分别测定HA材料组和空白对照组中血管内皮细胞分泌一氧化氮（NO）、前列环素（PGI2）水平。结果人血管内皮细胞能在纳米相羟基磷灰石薄膜复合材料上良好地黏附、增殖、生长。人脐静脉血管内皮细胞分泌NO和PGI2在HA材料组和空白对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论相羟基磷灰石膜复合材料上人血管内皮细胞分泌功能正常，说明纳米相羟基磷灰石薄膜复合材料具有良好的细胞相容性，可作为组织工程化机械瓣膜材料。     

纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜对细胞毒性评价

目的用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测羟基磷灰石（HA）对人脐带内皮细胞可能存在的细胞毒性。方法用MTT比色方法评价材料的细胞毒性。设常温漫提液组和高温浸提液组。两组均设置各自对应的阳性和阴性对照组。将加入浸提液和材料并培养72h后的各组样品分别在倒置相差显微镜下观察细胞在浸提液中及在材料边缘的形态变化及生长状况,以细胞毒性实验来评价生物材料生物相容性。参照国际标准化组织（ISO）制定的细胞毒性实验的标准,即ISO10993—5：1992（医疗器械生物学评价细胞毒性实验体外法》之评价标准和要求。结果材料浸提液与细胞共培养组24h时观察常温浸提液、高温浸提液及阴性对照组的HUVEC细胞形态、数量,各实验组与阴性对照组差异无统计学意义。结论HA材料对人脐带内皮细胞生长抑制反应级别为1级或0级,无明显毒性作用,有良好的细胞相容性。     

胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜对犬血管内皮细胞的毒性

背景：前期实验利用脉冲激光沉积方法制作了胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜。目的：进一步分析胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜的组织相容性和毒性。方法：将传代的犬血管内皮细胞悬液接种在胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料上,1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱内静态培养3周,另1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱动态旋转培养3周,扫描电子显微镜下观察细胞在材料上的附着情况。采用MTT法测定血管内皮细胞与胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料复合培养的增殖能力。结果与结论：动态旋转培养中见人工机械瓣膜材料的表面有细胞附着,并且数目比静态培养多,细胞分布均匀,在培养第21天可见均匀细胞融合成片,将材料表面均匀覆盖;在静态培养中细胞成堆,分布不均匀。人工机械瓣膜材料对犬血管内皮细胞增殖无明显影响,细胞生长良好。表明胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料对血管内皮细胞的增殖无明显影响,无明显毒性,具有良好的生物相容性。