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陈枢青 《浙江医科大学学报》2009,38(3):225-228
环境污染物的内暴露剂量检测可以用于职业健康评价、环境监控、国家普查等多个领域。近年来,为了考察日益严重的环境污染对人体的危害影响,环境污染物的内暴露剂量测量方法在国内外迅速发展。随着"多污染多效应模型"的提出和环境污染物内暴露剂量测量方法的不断完善,反映了这一技术在健康生活环境建设中的重要应用价值。 相似文献
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目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料。方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的GlutathioneSepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化。结果表达产物达菌体总蛋白的40%,可溶性目的产物得量为240mg·L-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5%,GSTPDH融合蛋白的PDH的比活为38U·mg-1。结论本法成功构建高效表达PDH菌株,表达量高,纯化度高,GST-PDH酶活性正常,为进一步研究奠定基础。 相似文献
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美国化学仿制药立项调研及评估 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 为拟在美国注册申报化学仿制药的中国企业提供立项指导和帮助,从目标产品的初步获得、产品具体信息的调研分析评估,到最终策略的制定,进行系统的介绍。方法 主要采用例证法。结果 获得美国仿制药立项信息收集及评估的途径和方法,形成并明确开发注册策略制定的思路和要素。结论 美国的药品信息比较透明公开,从公共途径基本可以获得产品开发所需要的相关信息。立项评估并不能做到百分百正确无误,企业可以设立自己的立项标准,只要在企业可接受范围内即可进行。 相似文献
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金葡菌肠毒素SEC2的抗体制备及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
生产厂家以金葡菌肠毒素C2(SEC2)的标示量作为金葡素注射液的质量控制标准,但其真正的含量由于滤液成分复杂而很难检测,本实验试图建立一种方便的鉴定金葡素注射液中的SEC2的方法。首先将重组的SEC2分别免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,制备并纯化了单克隆及多克隆抗体。采用自制的抗体建立了检测SEC2的生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附实验,检测目标蛋白的质量浓度范围为2~20 ng·mL-1,在检测范围内检测值的平均变异系数为5.08%,采用本法检测质量浓度分别为100 ng·mL-1的重组肠毒素(SEA/SEO/SEM/SEN/SEG/SEI),均呈现阴性反应,说明此检测方法的专一性较好。采用此方法对金葡素注射液中的SEC2含量进行了检测,发现SEC2标识量与实际含量存在一定的差距。 相似文献
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目的建立人UGT1A3催化黄酮类化合物定量构效关系,考察不同结构参数对葡醛酸结合反应的影响。方法采用半经验量子化学计算法MOPAC-AM1及逐步回归方法对11个黄酮类化合物的结构参数和UGT1A3催化葡醛酸反应的Km值进行定量构效关系研究。结果所建立的QSMR模型(pKm=-2.207 07+0.002 56HOF+3.212 90 QC5)具有较好的拟合性。结论分子生成热(HOF)和5位C上的静电荷这两个结构参数是影响其葡醛酸结合活性的主要结构因素。 相似文献
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人UGT1A3重组酶催化芹菜素葡醛酸结合反应 总被引:1,自引:1,他引:1
目的旨在了解人UGT1A3重组酶与芹菜素的有关代谢及其酶动力学参数,并阐述不同有机溶剂对酶动力学参数测定的影响。方法采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶与芹菜素37℃共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,利用Lineweaver Burk法计算酶动力学参数,并进一步进行代谢物的确认。同时考察了用不同有机溶剂溶解底物对酶动力学参数测定的影响。结果采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶,测得其催化芹菜素的Km为(28.88±2.47)μmol.L-1,Vmax为(224.19±21.11)nmol.m in-1.g-1,Vmax/Km为(7.75±0.29)mL.m in-1.g-1。不同有机溶剂对酶动力学参数测定无显著影响。结论芹菜素可被人UGT1A3重组酶催化,进行葡醛酸结合反应。 相似文献
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目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构。方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93~373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的Mr分别为42×103,11×103和32×103,HPLC测得天然条件下CM和PDH的Mr分别为25×103和63×103,再用化学交联法分析聚合状态。结果T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体。结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的。 相似文献
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目的:研究临床药理实验室数据库中的受试者是否有遗传偏差。方法:对数据库中的受试者和随机组织的受试者进行了CYP2D6基因分型对照研究。结果:CYP2D6慢代谢者在136位随机受试者中有9人(6.6%),而在138位临床药理实验室数据库的受试者中只有1人(0.7%),两组经统计有显著性差异。推测慢代谢者因易于体会到药物毒副作用,而易于从数据库中退出,造成数据库中受试者的遗传偏差。结论:新药试验时的受试者应随机组织或对其进行基因分型分析,以确保无遗传偏差。 相似文献
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目的:研究中国汉族人群S-美芬妥英4'-羟化代谢遗传多态性.方法:以美芬妥英为探针药物采用手性毛细管气相色谱法测定尿中S-/R-MP浓度比值, 对90名志愿者进行了表型分型测定,应用PCR技术对其中的26名志愿者进行了S-美芬妥英4'-羟化酶(CYP2C19)基因分析.结果:表型分析结果,11人属慢代谢者(PM),S/R比值0.95;基因分析结果,6人为野生型纯合子(wt/wt);10人为杂合子(wt/m1和wt/m2),9人为CYP2C19m1突变型纯合子(m1/m1),1人为两突变型杂合子(m1/m2).结论:表型分析与基因分析结果显示了很好的相关性,本实验测得慢代谢者的频发率为12.2%,与文献报道相符. 相似文献