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目的 探讨丙型肝炎病毒核心蛋白是否通过对Wnt信号抑制因子SFRPs的甲基化修饰,从而活化Wnt信号通路.方法 将编码HCV核心蛋白的腺病毒(AdCore)或GFP对照腺病毒(AdGFP)感染SMMC-7721细胞,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测SFRPs基因mRNA的表达;用5-氮杂-2′-脱氧胞苷(DAC)对AdCore或AdGFP腺病毒感染的SMMC-7721细胞进行去甲基化处理,进一步采用甲基化特异性PCR (MSP)和DNA甲基化测序,检测SFRPs基因启动子区CpG岛的甲基化程度,Western blot检测甲基化转移酶Dnmts的表达.结果 在HCV核心蛋白过表达的SMMC-7721细胞系中,SFRP2和SFRP5基因mRNA的表达量与对照组相比明显降低(P<0.05);甲基化分析结果表明:SFRP5基因启动子区CpG岛呈现高甲基化修饰;甲基化转移酶Dnmt1、Dnmt3a表达量增加(P<0.05).结论 HCV核心蛋白可以促进SFRP5基因启动子区CpG岛的甲基化修饰,参与HCV相关疾病的发生. 相似文献
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2000-2006年我科门诊收治的面肌痉挛患者55例,均符合现代针灸师手册^[1]中面肌痉挛诊断标准,男9例,女46例;年龄20-65岁,病程1周-6个月。55例患者分为针药组30例和对照组25例,2组发病严重患者同侧面肌及颈阔肌均可发生痉挛,部分患者并发伴同侧头痛、耳鸣等,排除其他原因所致面肌痉挛。2组一般资料比较差异无显著性意义。 相似文献
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目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)启动子活性的分子机制。方法:扩增不同长度的SFRP5启动子区片段,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic上,并将构建好的重组质粒转染入正常肝细胞系LO2细胞,再分别感染编码HBx的腺病毒(Ad-HBx)或编码绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),荧光显微镜下观察病毒感染效率,检测萤光素酶活性以观察HBx对SFRP5启动子活性的影响。结果:(1) 含不同长度的SFRP5启动子区截短突变报告质粒构建成功。(2) 截短突变报告质粒的萤光素酶活性与pGL3-Basic对照组相比,分别为(6.32±0.04)倍(-478 bp~+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp~+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp~+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp~+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp~+47 bp) (均P<0.05)。过表达HBx可以明显抑制SFRP5启动子活性,抑制率分别为44%(-478 bp~+47 bp) (P<0.05)、 46%(-811 bp~+47 bp) (P<0.05)、 28%(-1 235 bp~+47 bp)、 24%(-1 677 bp~+47 bp)和40%(-2 072 bp~+47 bp)。结论: HBx可以明显抑制SFRP5启动子区活性,可能导致SFRP5基因表达下调。 相似文献
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针刺足临泣、太阳穴为主治疗偏头痛40例 总被引:2,自引:0,他引:2
偏头痛是血管性头痛的常见类型.现代医学认为,偏头痛是一种颅内外血管和神经调节障碍引起的、反复发作的、一侧阵发性和剧烈性头痛.笔者自2000年以来,采用巨刺法,即针刺健侧足临泣及患侧太阳穴为主,治疗40例偏头痛,取得了良好疗效,现报告如下. 相似文献
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重组白介素-2治疗恶性胸腔积液13例护理体会 总被引:1,自引:0,他引:1
2002年5月~9月,我们采用重白介素-2组(IL-2)治疗恶性胸腔积液13例,现将治疗效果及护理体会报告如下。1资料与方法1.1临床资料本组13例均经病理、细胞学证实为恶性肿瘤引起的恶性胸腔积液,男8例,女5例,44~73岁,平均53.5岁。肺癌11例,乳腺癌胸腔转移2例;大量胸水7例、中等量胸水6例。均表现为不同程度的咳嗽、胸痛、气短、精神萎靡、食欲减退等临床症状。胸腔内均未用过生物反应调节剂、抗肿瘤药物及硬化剂。给药前后均行B超和或/胸片检查,肝肾功能及血、尿等常规检查。1.2方法患者用药前经B超定位,胸腔穿刺抽积液,穿刺末将rIL-2 50~100万U… 相似文献
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目的 研究HCV F蛋白的生物学功能.方法 扩增目的基因片段,通过酶切连接方法将编码HCV F蛋白的基因片段克隆至载体pSEB-3Flag中,用构建好的重组质粒pSEB-3Flag-F转染Huh7、SMMC7721细胞,经Blasticidine抗性筛选,拟建立HCV F蛋白稳定表达的细胞株,用RT-PCR方法检测HCV-F基因的表达.通过MTS、细胞计数、结晶紫以及流式细胞检测实验观察F蛋白对转染细胞增殖和细胞周期的影响.计量资料分析采用t检验.结果 成功建立了HCV F基因稳定表达的细胞株Huh7-F和SMMC7721-F,MTS、细胞计数实验均证实Huh7-F和SMMC7721-F细胞较对照细胞增殖速度减慢,Huh7-F稳定细胞株结晶紫定量A值为1.072±0.070,对照组为1.387±0.005(t=-6.347,P<0.05);SMMC7721-F稳定细胞株A值为1.594±0.007,对照组为1.921±0.090(t=-4.81,P<0.05).流式细胞仪检测Huh7-F稳定细胞株48hS期细胞百分比分别为47.12%±0.04%,对照组S期细胞数为55.32%000±1.45%(t=-7.99,P<0.05);SMMC7721-F稳定细胞株S期细胞百分比分别为30.75%±0.09%,对照组S期细胞数为33.23%±0.28%(t=-5.91,P<0.05).结论 稳定转染HCV F基因可以明显抑制Huh7细胞、SMMC7721细胞的增殖. 相似文献
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