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我国西双版纳傣族群体HLAⅡ类基因的寡核苷酸分型 总被引:5,自引:1,他引:4
我们对73名西双版纳傣族正常健康个体用第11届国际组织相容性专题讨论会的方法进行了HLA Ⅱ类基因的 PCR/SSO 分型。结果表明傣族的 HLA Ⅱ类等位基因频率分布在与中国南方人群相似以外尚有其独特性.共捡出 DRB1 等位基因20种,其中基因频率超过0.10的依次为1602、0901、1502、1401及1202,未发现01、08及1001等位基因。DRB3仅捡出0202及0301,DRB5仅捡出0101和0102。DQA1共捡出6种等位基因以0102、0101、03频率为最高。以0502为最高频率的 DQB1共捡出9种等位基因。绝大多数个体(91.8%)均具有 DPA1、0201等位基因、与目前所报道的东方人材料相一致,DPB1 0501频率最高,其次为0202、0201与1301。各位点均呈 Handy-WeinKeng 平衡. 相似文献
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人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-I类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础。方法:用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-GcDNA,得到全长HLA-GPCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测,观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达。结果:HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论:成功构建了mG-pLNCX表达载体,并使HLA-G突变体分子在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。 相似文献
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人KIR2DL1-Ig融合蛋白在COS-7细胞的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:获得人KIR2DL1分子(killer lg—like receptor 2DL1)胞外区与人IgG Fc段的融合蛋白。方法:从人外周血单个核细胞中提取总RNA,通过RT—PCR扩增编码KIR2DL1胞外段cDNA,经Nhe Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,定向插入真核细胞表达载体CD51negl中。构建的重组真核表达载体CD51negl—KIR2DL1。经酶切分析和测序鉴定后,通过DEAE—dextran/ehloroquine法转染COS—7细胞:瞬时表达后,取培养上清液经亲和层析、ELISA、SDS—PAGE及Western印迹,鉴定融合蛋白的表达及其免疫学活性。结果:序列测定证实,该重组表达载体含有正确的KIR2DL1胞外区基因序列。重组真核表达载体CD5lnegl—KIR2DL1转染COS—7细胞后,ELISA法检测细胞培养上清中有融合蛋白的表达。SDS—PAGE结果显示,该融合蛋白的相对分子质量(Mc)约为73000。Western印迹结果证实,该蛋白能被特异性单克隆抗体(mAb)EB6所识别。结论:KIR2DL1—Ig融合蛋白表达载体成功构建并在COS—7细胞中获得功能性表达,为KIR2DL1的功能及其配体MHC的研究奠定了基础。 相似文献
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探索HLA-E分子的表达对习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)及妊高症(pregnancy-induced hypertension,PIH)患者外周血γδT细胞细胞毒效应的影响。通过固相抗体法体外分离并扩增外周γδT血细胞作为效应细胞,以HLA-E转染的LcL721.221细胞(.221E)及滋养层细胞JAR作为靶细胞,采用4 h乳酸脱氢酶(LDH)释放试验观察NK细胞对靶细胞的细胞毒效应。结果显示,来自RSA、PIH及正常对照组的γδ细胞均不能有效杀伤HLA-E转染的.221E细胞及JAR细胞,但未经HLA-E转染的LcL721.221细胞则被溶解;抗HLA-E单抗3D12及抗CD94单抗HP-3B1的阻断可以分别部分恢复效应细胞对靶细胞LcL721.221E的杀伤,但对JAR细胞没有影响;与正常对照组相比,RSA及PIH患者外周血γδT细胞对.221、.221E及JAR细胞的细胞毒活性没有显著性差异(P>0.05)。这说明HLA-E分子的体外表达可以保护靶细胞防止γδT细胞的杀伤,该保护机制主要是通过γδT细胞受体CD94/NKG2对靶细胞表面HLA-E分子的识别来实现的;滋养层细胞对γδT细胞杀伤的抵抗可能存在MHC I类非依赖的机制。 相似文献
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HLA-DQBI等位基因与妊娠肝内胆汁淤积症的相关性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
妊娠肝内胆汁淤积症 (intrahepatic cholestasis of preg-nancy,ICP)是常见的妊娠并发症 ,该病常致早产及死胎 ,围产儿死亡率远高于正常妊娠。本病病因至今未明 ,流行病学证实本病具有明显复发性及家族性 [1 ] 。近来有资料表明妊娠后母胎免疫失调可能与本病密切相关 [2 ]。出于 ICP遗传背景考虑及人白细胞抗原 (hum an leucocyte antigen,HL A)及基因型与自身免疫性疾病的密切关联 ,本研究从免疫遗传学角度采用聚合酶链反应序列寡核苷酸 (PCR- SSO)探针杂交法对江苏籍汉族 ICP患者 HL A- DQBI等位基因多态性进行了探讨。一、资料… 相似文献
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目的检测正常妊娠妇女、习惯性流产患者外周血单个核细胞(PBMC)内T辅助细胞亚型(Th1)细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、T辅助细胞2亚型(Th2)细胞因子白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平的差异.方法用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测10例正常非孕妇女、10例正常妊娠妇女、10例习惯性流产患者PBMC内IL-2、IL-10 mRNA的表达水平.结果同正常非孕对照相比,正常妊娠妇女IL-10 mRNA明显升高,习惯性流产患者IL-10 mRNA降低,IL-2 mRNA明显升高;同正常妊娠妇女相比,习惯性流产患者IL-2 mRNA及IL-10 mRNA均明显降低.结论正常妊娠分泌IL-10升高,当孕妇分泌IL-10降低而分泌IL-2升高时,可能会导致习惯性流产的发生. 相似文献
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HLA-B27与强直性脊椎炎呈强关联,但它在强直性脊椎炎中作用仍不详,对HLA-B27分子的结构特征、抗原肽与B27亚型以及CTL细胞对抗原肽-B27复合体表位识别进行深入的研究,有助于了解其在强直性脊椎炎发病中的确切作用,本文拟就有关方面的研究进展作一综述. 相似文献
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为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G4 1 8筛选 ,分别获得阳性表达细胞株 ;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果显示 :与转染了空质粒的对照组相比 ,外周血NK细胞对K5 6 2 B39的杀伤率无明显影响 ,而对K5 6 2 B2 7,K5 6 2 B5 1的杀伤率降低。当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后 ,此抑制效应大部分消失。提示靶细胞表达HLA Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应 ,而表达HLA Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响 相似文献
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非经典HLA Ⅰ类分子(HLA-Ⅰb)HLA-G参与抗原递呈,通过相应受体调节NK细胞及T淋巴细胞功能,是一个 重要的免疫调节分子。HLA-G分子的免疫调节作用已从母胎免疫耐受扩展到肿瘤免疫、抗感染免疫和器官移植免疫等领域, 近年来在移植免疫方面取得了重要进展。 相似文献