5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记示踪脂肪成体干细胞体内成骨分化的研究

目的 观察经成骨诱导后的脂肪成体干细胞(ADASCs)在体内的成骨分化行为.方法 分离培养兔ADASCs,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,并通过免疫组织化学方法检查标记结果.将标记的ADASCs体外成骨诱导培养2周后与脱钙骨基质(DBM)复合,共培养7d后植入自体肌袋内.术后8周取材,固定、脱钙、包埋后切片染色,镜下观察.结果 大量ADASCs被标记,标记率达(82.3±8.6)%;体外标记后的ADASCs可以向成骨方向分化;切片苏木素-伊红(HE)染色示体内有新生骨形成,切片BrdU免疫组织化学染色示新生骨处有阳性细胞.结论 ADASCs经体外成骨诱导后植入体内能够继续维持成骨分化,并进一步形成新生骨.     

异体脱钙骨基质复合bBMP修复兔桡骨骨缺损

目的：探讨异体脱钙骨基质复合BMP修复节段性骨缺损的能力。方法：64只新西兰大白兔采用桡骨15mm节段性骨缺损模型，随机分为4组，A组植入异体脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix,DBM)与牛骨形态发生蛋白(Bovine Bone Morphogentic Protein,bBMP)复合材料，B组植入异体DBIM，C组植入异体骨粒，D组为空白对照组。术后4、8、12、16w，进行放射学检查、病理组织学检查和计算机图像分析新生骨面积。结果：异体DBM与bBMP复合材料组骨生成、新骨面积和骨连接情况明显优于异体DBM组、异体骨粒组和空白对照组。结论：异体DBM复合BMP材料通过骨诱导和骨传导两种方式修复骨缺损，是一种较为理想、具有高效成骨活性的植骨材料。     

磷酸钙骨水泥的研究和应用进展

磷酸钙骨水泥（calciumphosphatecement，CPC）是２０世纪９０年代初研制成功的一种具有生物学活性的新型非陶瓷型羟基磷灰石类人工骨材料犤１犦。与传统的陶瓷型羟基磷灰石（hydroxyapatite，HA）相比，具有制备简便（不需要烧结）、任意塑形和缓慢降解等优点。与普通骨水泥相     

羟基磷灰石/胶原-聚乳酸三维多孔框架材料的制备成形及分析

目的：合成新型的复合生物材料框架作为骨组织工程研究的细胞外基质材料。方法：本研究采用材料学自组装技术的原理，以Ⅰ型胶原蛋白为分子模板，引导钙磷盐在液相中的矿化，制备具有天然骨基质层状结构的羟基磷灰石／胶原复合材料，并以热致分相法制备了羟基磷灰石／胶原-聚乳酸复合三维多孔框架。结果：羟基磷灰石／胶原复合材料具有与天然骨基质相似的成分与结构，加入聚乳酸制备成三维多孔框架，孔隙直径界于50um-300um。结论：羟基磷灰石／胶原-聚乳酸复合三维多孔框架可能作为骨组织工程良好的细胞外基质材料。     

复合rhBMP2的异种骨的研制及成骨活性

目的：研制新型具有诱导成骨活性的异种骨植骨材料。方法：在重组合异种骨（RBX）基础上,以基因重组人BMP2（rhBMP2）取代从牛皮质骨中提取的牛BMP,与去抗原牛松质骨载体（BCB）复合,制成复合rhBMP2的异种骨（rhBMP2/BCB）,并采用小鼠股部肌袋模型,通过组织学、骨计量学方法检测rhBMP2/BCB的诱导成骨活性。结果：实验组（rhBMP2/BCB组）术后7d在小鼠肌袋可诱导软骨生成,14d形成纺织骨,21d改建成板状骨并形成大量骨髓;对照组（BCB组）于术后各时间点均未见有软骨成骨形成。实验组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组,有非常显性差异（P＜0．01）。结论：rhBMP2/BCB具有较好的骨诱导能力,是一种较理想的植骨材料。     

脂质体介导下重组pcDNA3-hBMP3转染兔关节软骨细胞的条件

目的　探讨基因转移效率与 pc DNA3- h BMP3质粒及阳离子脂质体的浓度、转染时机以及细胞的种殖密度等因素的关系 ,以寻求最佳的基因转染条件 .方法　细胞密度按 2× 10 4· cm- 2 接种后 ,对细胞接种后即时、孵化 2 ,5和 7d进行转染效率研究 ;G418浓度每 m L DMEM分别含有 2 0 0 ,30 0 ,40 0 ,5 0 0和 6 0 0μg,探讨 G418对软骨细胞的杀伤作用 ;选择不同细胞接种密度、不同脂质体浓度和 pc DNA3- BMP3浓度 ,在细胞对数生长期且细胞融合至 70 %～ 80 %时开始做转染 ,各组软骨细胞爬片的原位杂交结果通过计算机图像分析 ,以其灰度值判定基因转染的效率 .结果　最佳期的转染时机为软骨细胞接种后在孵箱内放置 2 d转染 ,即在软骨细胞对数生长期内做转染 .G418对软骨细胞的最佳筛选浓度为 40 0 mg· L- 1 .最佳的细胞种植密度、pc DNA3- BMP3浓度和脂质体的量应分别为 2× 10 4· cm- 2 ,5 μL 和 10 μL.结论　通过本研究探索出脂质体介导下 pc DNA 3- BMP3转染兔关节软骨细胞的最佳条件 .     

新工艺制备的β—TCP陶瓷小鼠肌肉内种植后的变化

目的：检测新工艺制备的β－磷酸三钙（β－TCP）的生物相容性,方法：将自制β－TCP植入小鼠股后肌袋。术后24,72h,1,2,4,8周分别取材做组织学检查,2,4周取材部分标本做扫描电镜（SEM）观察。结果：随着时间推移,β－TCP逐渐被纤维组织分割包围,但是无软骨,骨和坏死组织形成,结论：新工艺制备的β-TCP具有良好的组织相容性。     

BMP对异种骨移植局部TNF-α和IL-6基因表达的调节

观察骨形态发生蛋白在异种骨移植局部对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的调节作用。方法将含有一定抗原性的牛松质骨载体与不同剂量的牛ＢＭＰ复合,植入小鼠股部肌袋,于术后５,１０和２０ｄ取材,制备石蜡切要用核酸分子原位杂交的方法,定性定位检测植骨局部ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达情况,通过图像分析,确定ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度,分析植骨局部不同计量ＢＭＰ对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强     

Experiment study on combined free periosteum grafting and new reconstituted bone xenograft in repairing segmental defects

Segmental bone defects in long bones often pose achallenge tO their sMcal ~nt, and the vasculallzedperiosted po used either alone or in combination withother ~ materials has been Preferred as a uSeals solution to this Problems"'l. HOwever, the use Of vascularized graft has to resort to ndcrosuopcal tecboqUes, Whichmakes it difficult tO populallze this OPe~ in the graSsests level intitutions. We Pimeeded with combined useOf free Periosteum and new reconshtuted bine xenograft(NRBX) in re…     

个体化人工半膝关节假体计算机辅助设计和快速成型的基础：股骨髁三维建模

背景：目前保肢方法有异体骨关节置换、人工金属假体置换、肿瘤骨段灭活再植等，各有优缺点。四肢骨肿瘤切除深低温冷冻大段异体骨关节置换术存在异体一自体关节不匹配和后期关节软骨坏死影响关节功能的问题。 目的：评估一种由螺旋CT扫描数据获取关节软骨表面轮廓信息的方法，为基于快速成型技术的个体化人工半膝关节研究奠定基础。 设计：开放性实验。 单位：解放军兰州军区乌鲁木齐总医院创伤一科。 材料：实验于2001-09／2003-05在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所和西安交通大学先进制造研究所完成。样本来源：CT扫描对象为25岁健康男性志愿者。 方法：采用Picker 6000螺旋CT对股骨远端进行层厚lmm扫描，在Picker 6000 CT机的Voxel Q图像工作站进行三维容积重建，之后对重建数据间隔0.1mm下载二维断层图像。自行开发数据格式转换软件，对下载图像进行滤波、去噪等处理，求出断面图像的二维边缘轮廓矢量化数据，输入美国Imageware公司Surfacer 9．0软件进行矢量化三维重建。然后通过对关节软骨轮廓的识别及假体设计需要，提取出感兴趣的关节软骨表面轮廓的三维图像，用于个体化人工半膝关节的计算机辅助设计。 主要观察指标：CT图像的矢量转换和股骨髁三维重建矢量图像。 结果：利用自主开发的医学图像矢量转换软件，实现了CT图像数据的矢量转换，在Surfacer9.0三维处理软件中构建出个体化股骨髁三维实体模型，并根据设计需要进行编辑，提取出可进行人工半膝关节假体计算机辅助设计需要的关节软骨三维模型。所构关节面轮廓可进一步处理，从而完成人工半膝关节假体的计算机辅助设计；其文件格式为．stl格式，可直接被快速成形软件识别和用于工程学制造。 结论：由螺旋CT数据进行关节软骨外形轮廓的矢量化重建可获得精确的关节软骨轮廓三维实体模型，模型可编辑性强，为复合大段异体骨移植的人工半膝关节假体的计算机辅助设计和快速成型制造打下了基础；用此方法进行医学图像信息的矢量转换简单易行，在骨科、口腔颌面外科生物制造领域有良好的应用前景。