一株罕见发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌鉴定与探讨

目的:对一株从冻贻贝中分离的沙门菌进行鉴定与探讨。方法:结合传统生化反应、荧光定量PCR检测、16S rDNA检测以及血清学分型鉴定方法。结果:该菌生化反应及PCR反应符合沙门菌属,经16S rD-NA鉴定为肠道沙门菌,血清学抗原式为9,46:e,h:1,2。结论:该菌是一株罕见的发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌(S.Bergedorf)。该菌为国内首次报道检出。     

副溶血弧菌和霍乱弧菌合检增菌液pH值和盐度的研究

目的:研究共同增菌液pH值和盐度对副溶血弧菌和霍乱弧菌生长的影响,找出副溶血弧菌和霍乱弧菌共增菌液的最佳pH值和盐度。方法:利用副溶血性弧菌、霍乱弧菌以及杂菌对共同增菌液的pH值和盐度进行实验,通过弧菌显色平板计数验证增菌效果,从而确定两种弧菌的共同增菌液pH和盐度。结果:副溶血性弧菌和霍乱弧菌合检增菌液的最佳条件为pH8.4,盐度2.1%。结论:增菌液pH值和盐度的改变对副溶血性弧菌和霍乱弧菌生长具有一定影响。     

舟山地区冰鲜海产品中常见食源性致病菌污染状况调查

目的了解浙江省舟山地区冰鲜海产品中食源性致病菌污染状况。方法针对舟山地区码头、农贸市场、工厂的163份17类冰鲜海产品,利用荧光PCR方法进行副溶血性弧菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌检测。结果 163份样品中,有29份样品检出致病菌,总阳性率为17.8%。其中贻贝肉的阳性率最高,为50.0%,在所检秋刀鱼样品中未发现致病菌。副溶血性弧菌阳性率最高,为13.5%,其次是沙门菌(4.9%)、单核细胞增生李斯特菌(3.1%)。结论副溶血性弧菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌是冰鲜海产品中重要的食源性致病菌,对舟山地区冰鲜海产品致病菌的控制和监测不能放松。     

β-胡萝卜素氧化降解产物及其抑制癌细胞活性的研究

研究了β-胡萝卜素氧化降解产物的生理活性。对利用OsO4为催化剂,将β-胡萝卜素在OsO4-H2O2-Ether体系中进行控制型氧化降解,对氧化降解产物进行薄层分离后,采用体外细胞培养技术观察β-胡萝卜素氧化降解产物对Hela细胞以及bel-7402细胞增殖的影响。结果发现,β-胡萝卜素氧化降解产物在高浓度时对Hela以及bel-7402的抑制作用强于β-胡萝卜素的,且对bel-7402的作用强于对Hela的,显示β-胡萝卜素氧化降解产物对癌细胞的增殖有抑制作用。     

pH值及盐度对副溶血弧菌与霍乱弧菌生长影响的研究

目的研究增菌液pH值及盐度对副溶血弧菌和霍乱弧菌生长的影响,找出副溶血弧菌与霍乱弧菌的最佳生长pH和盐度。方法应用阳性菌株副溶血弧菌和霍乱弧菌,参照国际和国内增菌液的要求,控制增菌液pH值和盐度条件,采用弧菌显色培养基检测副溶血弧菌和霍乱弧菌生长数。结果增菌液pH值7.2、盐度3.2%时最适副溶血弧菌生长,增菌液pH值7.1、盐度1.2%时最适霍乱弧菌生长。结论增菌液pH值和盐度对副溶血弧菌和霍乱弧菌生长有一定影响。     

弧菌显色培养基对副溶血弧菌检测效果的初步评估

目的评估弧菌显色培养基对副溶血弧菌检测效果。方法通过弧菌显色培养基(chromID Vibrio)同硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂培养基进行比对,采用阳性菌株污染、人工污染样品和实际样品检测的方法,对chromID Vibrio的灵敏性、特异性和检测效果进行了初步评价。结果得到粉红色副溶血弧菌典型菌落;阳性菌株污染中,在稀释度为10-7CFU/ml时,chromID Vibrio能检测出目标菌,而TCBS平板未能检测;对人工污染样品,稀释度10-8CFU/ml chromID Vibrio有检出、TCBS平板未检出;对采集的150份实际样品进行检测,用ChromID Vibrio方法检出副溶血弧菌12株,比TCBS方法检出的检测效率高。结论chromID Vibrio灵敏性和TCBS相当,并具有较好的特异性,大大提高副溶血性弧菌的检测效率。     

基于TaqMan探针的双重荧光定量PCR方法检测海产品中的副溶血弧菌

目的建立海产品中副溶血弧菌检测的双重荧光定量PCR体系。方法针对副溶血弧菌种特异性基因tlh和tdh设计引物和TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究;利用该体系检测海产品中的副溶血弧菌。结果副溶血弧菌可得到特异性扩增,而其它与副溶血弧菌共存于海产品中的细菌均未见扩增曲线。副溶血弧菌与其它细菌的混合DNA检测表明,其它细菌基因组的存在时并不干扰副溶血弧菌检测。副溶血弧菌典型菌株FJ14和BJ97的敏感性试验显示,该体系的最低检测DNA浓度分别为49.8pg与77.8pg,最低检测细菌浓度为56CFU/mL和371CFU/mL。对舟山菜市场采集的50份样本检测表明,32份为tlh基因阳性,3份为tdh基因阳性,与传统方法的检测结果相同。结论与传统检测方法相比,副溶血弧菌的双重荧光定量PCR检测方法快速准确,结果直观。