海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌的菌种鉴定分析

目的 通过对海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌（NTM）进行菌种鉴定,探讨海南省NTM肺部感染菌种的类型及人群分布情况。方法 收集2016年7月至2021年6月期间就诊于海南医学院第二附属医院疑似肺结核患者的呼吸道标本进行分枝杆菌培养,对培养阳性标本进行对硝基苯甲酸（PNB）/噻吩-2-羧酸肼（TCH）培养菌型初步鉴定,采用DNA微阵列芯片技术进行分枝杆菌菌种鉴定,无法确定菌种的菌株进一步采用基因测序法鉴定。结果 共收集8 507例疑似肺结核患者的呼吸道标本,剔除重复病例后,有318例经PNB/TCH培养初步鉴定为NTM,315例经DNA微阵列芯片技术和热休克蛋白65(hsp65)基因测序鉴定为NTM。其中308例患者为单一感染模式,6例MTB+NTM和1例2种不同NTM的混合感染模式。快速生长分枝杆菌128株占40.5%,以龟/脓肿分枝杆菌为主（占32.9%）;缓慢生长分枝杆菌188株占59.5%,以胞内分枝杆菌为主（占39.6%）。女性患者多于男性且好发于中老年人,男女性别比为0.79∶1。男女性患者年龄分布差异有统计学意义（Z=2.200,P<0.05）,>40岁的患者...     

海口市流感嗜血杆菌感染流行病学与病原学特征分析

目的分析海口市流感嗜血杆菌(Hi)感染流行病学与病原学特征。方法对海口各医院送检的咽拭子、痰、脑脊液标本进行Hi培养和鉴定,并对分离的菌株进行血清和生物学分型、β-内酰胺酶和耐药性检测。结果 238例标本中Hi的阳性率为26.1%(62/238),其中咽拭子、痰、脑脊液的阳性率分别为35.7%(45/126)、18.6%(13/70)、9.5%(4/42),差异有统计学意义(P<0.05)。男、女患者阳性率分别为24.3%(25/103)、27.4%(37/135),差异无统计学意义(P>0.05)。≤14岁、14～30岁、31～50岁、≥50岁年龄组Hi阳性率分别为48.4%(45/93)、17.1%(6/35)、14.7%(5/34)、7.9%(6/76),差异有统计学意义(P<0.05)。分离出的62株Hi中有45株(72.6%)为不可分型菌株,其余17株(27.4%)为可分型菌株。在可分型的17株菌株中,以d、e两种血清型为主,分别为23.5%(4/17)和47.1%(8/17)。共检出8个生物型,以Ⅱ、Ⅲ两种生物型为主,分别占35.5%(22/62)和30.6%(19/62)。62株Hi对氨苄西林的耐药率最高,其耐药率为25.8%(16/62),而对头孢唑林和氧氟沙星敏感,敏感率均为100.0%(62/62)。62株Hi的β-内酰胺酶阳性率为16.1%(10/62)。结论海口市Hi感染在儿童中常见,分离的菌株以不可分型、d、e血清型和Ⅱ、Ⅲ生物型为主,对头孢唑林和氧氟沙星敏感。     

海南地区疑似肺结核患者非结核分枝杆菌感染特征

目的了解海南地区疑似肺结核患者非结核分枝杆菌(NTM)的菌种分布、耐药性及临床感染特征。方法收集2015年1月—2018年8月海南省某院疑似肺结核患者痰、肺泡灌洗液等呼吸道标本进行培养、菌种鉴定,对NTM感染情况、药敏结果,以及NTM肺部感染患者临床资料进行分析。结果共有833份疑似肺结核患者阳性呼吸道标本,其中126份初步鉴定为NTM,经菌种鉴定,检出结核分枝杆菌3株,检出非分枝杆菌属细菌3株,检出的4株NTM无法鉴定至种,最终116份标本中检出NTM118株。109例为单一NTM感染,7例为混合感染。有8种NTM菌种类型,主要以龟/脓肿分枝杆菌(41.5%)和胞内分枝杆菌(37.3%)为主。8种NTM菌种对8种一、二线抗结核药物呈不同程度的耐药,总耐药率最高的为异烟肼(96.6%),对8种抗结核药物全部耐药的比率高达32.2%。NTM肺部感染患者中男性少于女性,主要好发于中老年人,患者主要以海南沿海地区为主。NTM肺部感染患者主要临床表现为咳嗽咳痰、胸闷气促、血痰或咯血、食欲减退及体重下降,基础疾病既往有结核病史、支气管扩张、肺部感染及咯血,影像学表现为继发型肺结核、肺部空洞、胸膜肥厚、支气管扩张伴有肺气肿及肺部感染。结论海南地区NTM肺部感染主要是以龟/脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主,NTM对常用的抗结核药物均具有较高的耐药性,NTM肺部感染与肺结核应依据病原学检查进行鉴别。     

线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法 分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结果 线性探针技术检测结核分枝杆菌阳性率（58.7%）明显高于结核菌涂片（40.2%）和罗氏培养（53.8%）,线性探针法与两种传统方法比较差异有统计学意义（P<0.05）;以比例法药敏为金标准,线性探针法对结核分枝杆菌耐利福平、异烟肼和耐多药结核分枝杆菌检测的特异性为89.27%、94.95%和91.45%,敏感性为94.38%、75.00%和75.68%,阴性预测值为94.62%、80.34%和5.60%,阳性预测值为85.71%、93.32%和84.85%,符合率为90.05%、85.34%和85.34%,线性探针技术与比例法药敏检测结核分枝杆菌利福平耐药性效果比较差异无统计学意义,且具有较好一致性,检测异烟肼耐药性差异有统计学意义,且两种方法之间一致性一般,检测耐多药结核分枝杆菌两种方法差异无统计学意义,但两种方法之间一致性一般;利福平耐药基因突变类型主要是 rpoB H531L,占57.14%,异烟肼耐药基因突变类型主要是katG S315T1,占91.89%,耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变类型主要为rpoB S531L+KatG S315T1,占56.06%。结论 线性探针技术可快速准确地从海南省疑似肺结核临床标本鉴定出结核分枝杆菌及耐多药结核分枝杆菌,并可直接快速检测临床标本耐药性从而指导临床用药。     

DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐利福平基因的研究

目的用DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐药基因,为临床诊治提供实验依据。方法收集2013年6月—2015年6月1 005份痰标本,采用直接涂片检测结核分枝杆菌情况,阳性样本分别用改良罗氏培养基培养和DNA微阵列芯片法进行鉴定,分析耐药基因情况。结果 1 005份痰标本的涂阳率为40.3%(405/1 005)。DNA微阵列芯片法的阳性率为98.0%(397/405),明显高于改良罗氏培养基培养法(44.2%,179/405),P0.01。DNA微阵列芯片法结果显示,有90株(24.9%,90/361)结核分枝杆菌发生利福平耐药,其中33株(占36.7%)发生单纯rpo B基因突变,54株(占60.0%)发生rpo B和kat G基因突变,3株(占3.3%)发生rpo B和inh A基因突变;rpo B基因最常见的突变位点依次为531、526、516、511,突变频率分别为44.4%、25.6%、10.0%、5.5%;突变频率最高的三种突变类型依次为:531位点(C-T)占54.0%(29/90),531位点(C-G)占11.1%(10/90)及526位点(C-T)占11.1%(10/90);单位点突变和二位点联合突变分别有81株(占90.0%)和9株(占10.0%)。结论 rpo B基因突变是导致肺结核患者RFP耐药的分子基础,其突变位点呈多样性。     

两株形态不同脓肿分枝杆菌的鉴定与分析

分析比较临床1例重症肺炎患者痰标本培养出的平滑型脓肿分枝杆菌（Mab S）和粗糙型脓肿分枝杆菌（Mab R）,并进行药敏试验研究,为临床诊断治疗提供科学依据。对Mab S和Mab R进行菌体形态观察、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和16S r...     

血清基质金属蛋白酶-9 在肺结核鉴别诊断中的价值分析

目的:分析血清基质金属蛋白酶-9(MMP 9)在肺结核鉴别诊断中的价值。方法:选取肺结核、肺炎、肺癌患者及健康志愿者各60 例分别作为肺结核组、肺炎组、肺癌组和对照组,对受试者血清MMP-9 水平检测分析。结果:对照组、肺结核组、肺炎组、肺癌组研究对象的血清MMP-9 水平分别为(1 976.36±907.44)ng/ ml、(4 350.45±2 574.75)ng/ ml、(2 135.68±1 263.56)ng/ ml 和(2 590.38±1 532.84)ng/ ml,差异有统计学意义(F =25.000,P<0.001),其中,肺结核组患者的血清MMP-9水平显著高于其他三组(P<0.001),肺癌组患者的血清MMP-9 水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清MMP-9 在肺结核与健康人+肺炎+肺癌、健康人、肺炎、肺癌、肺炎+肺癌鉴别诊断中的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.739、0.769、0.751、0.699、0.725(P 均<0.05)。结论:肺结核患者表现为血清MMP-9 水平显著升高,且幅度高于肺癌或肺炎患者,血清MMP-9 有助于肺结核鉴别诊断和筛查,但应注意适当提高诊断的灵敏度。     

DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐异烟肼基因的研究

目的采用DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌INH耐药基因,为临床诊治提供实验依据。方法应用DNA微阵列芯片法和改良罗氏培养加比例法药敏试验对疑似结核病患者的150份痰液标本进行检测,并对检测的结果进行比较分析。结果 150份痰液标本的涂阳率为60.0%(90/150),DNA微阵列芯片法检测到结核分枝杆菌阳性率为62.7%(94/150),改良罗氏培养法阳性率为60.0%(90/150),比例法药敏试验异烟肼的耐药率为43.9%(36/82),异烟肼的kat G/inh A基因总突变率为35.1%(33/94);以改良罗氏培养加比例法药敏试验为标准,DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌阳性、异烟肼耐药性和敏感性的符合率分别为97.7%、86.1%和100.0%。结论 DNA微阵列法可快速准确地检测大部分疑似结核病临床标本的kat G和inh A基因突变,可用于临床耐药性的检测从而指导临床用药,也可用于临床诊断中的推广。     

流感嗜血杆菌耐药菌株基因分型的初步研究

目的建立随机扩增DNA多态性(RAPD)反应体系,对海口市流感嗜血杆菌(Hi)耐药菌株进行基因分型。方法对临床分离的62株Hi进行药物敏感试验。同时采用RAPD技术对耐药菌株进行基因分型,并对分型结果进行聚类分析。结果 62株Hi中有23株耐药,其中7株(第10～16菌株)对氨苄西林、氯霉素、四环素、复方新诺明耐药,2株(第17～18菌株)对四环素、复方新诺明耐药,1株(第19菌株)对复方新诺明、阿奇霉素耐药,9株(第1～9菌株)对氨苄西林耐药,4株(第20～23株)只对阿奇霉素耐药。采用引物(5′-ACGTATCTGC-3′)构建的RAPD-PCR反应体系检测Hi基因,扩增出15条带,大小在300～2 000bp之间。所构建的亲缘关系聚类图中,第1～9菌株聚成一簇,第10～16菌株聚成一簇,第17～18菌株聚成一簇,第19菌株为一簇,第20～23菌株聚成一簇。结论采用RAPD-PCR反应体系可对Hi耐药菌株进行基因分型。     

69株痢疾杆菌耐药性分析

目的分析痢疾杆菌的耐药性,为临床医师合理用药提供更可靠的依据。方法收集海口地区2001年1月～2011年12月分离出的69株痢疾杆菌,对其耐药性进行检测分析。结果痢疾杆菌对复方新诺明、氯霉素、氨苄青霉素、氧哌嗪青霉素、氟哌酸、环丙沙星耐药性高。结论细菌性痢疾的治疗应选择敏感抗生素,并且要保证足够的疗程,以减少耐药现象。