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目的分析不同浓度葡萄糖培养下的牛视网膜毛细血管周细胞增生、细胞周期改变及凋亡与葡萄糖浓度及高糖波动幅度的相关性,并对比同一水平下恒定高糖与高糖波动对周细胞作用的强度。方法以体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象。分另q在不同浓度高糖(15mmol·L^-1、25mmol·L^-1、35mmol·L^-1)、不同幅度的高糖波动(5.5/15mmol·L^-1、5.5/25mmol·L^-1、5.5/35mmol·L^-1)及对照组(5、5mmol·L^-1)下孵育7d,采用MTT比色法观察周细胞增生情况;流式细胞术观察周细胞细胞周期变化情况;TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡率。结果(1)高糖及高糖波动抑制周细胞增生,与葡萄糖浓度及高糖波动幅度呈正相关(P〈0.01),同一水平下持续高糖组作用强于高糖波动组(P〈0.05);(2)高糖及高糖波动阻滞用细胞周期,使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,G2/M细胞比例无明显改变;(3)高糖及高糖波动诱导周细胞凋亡,高糖各组凋亡率分别为23.78%、37.22%.48.73%,而高糖波动组分别为15.53%、28.73%、39.14%,与对照组的4.25%相比差异有显著性意义(P〈0.01)且周细胞凋亡率与高糖的浓度呈正相差(P〈0.01);与高糖波动幅度呈正相关(P〈0.01);同一水平下持续高糖组作用强于高糖波动组(P〈0.05)。结论同一水平下恒定高糖较高糖波动可能具有更强的周细胞增生抑制,周期阻滞及诱导凋亡作用,这些作用可能与葡萄糖浓度及波动的幅度正相关。【眼科新进展2007;27(2):87-90] 相似文献
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不同质量浓度的黄芪总黄酮对高糖培养下牛视网膜血管周细胞氧化应激的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨黄芪总黄酮对高糖培养下的牛视网膜微血管周细胞氧化应激的影响。方法体外培养3代近融合的牛视网膜微血管周细胞为对象,分为正常对照组、模型组(葡萄糖培养液25mmol/L)、不同质量浓度黄芪总黄酮组(0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL),孵育6d;硫代巴比妥酸检测培养液丙二醛(MDA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测培养液超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与模型组相比,黄芪总黄酮组周细胞MDA/SOD比值降低;黄芪总黄酮质量浓度与周细胞氧化应激有关。结论一定质量浓度黄芪总黄酮对高糖培养下的牛视网膜微血管周细胞氧化应激有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。 相似文献
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体外培养3代融合的牛视网膜血管周细胞,别在对照组(5.5 mmol/L)、恒定性高糖组(25mmol/L)及不同波动频率的高糖组(5.5mmol/L与25mmol/L交替,频率分别为6 h和24 h)中孵育6 d,透射电镜观察周细胞超微结构改变,单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况。结果与对照组相比,波动性高糖组与恒定性高糖组周细胞彗尾长度及拖尾率均增高(P0.05)。恒定性高糖组的作用高于波动性高糖组(P0.05);波动性高糖组内波动频率越高作用越明显(P0.05)。结论恒定性高糖较波动性高糖可能具有更强的DNA损伤作用,波动组间波动频率高者比频率低者作用更明显。 相似文献
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目的探讨恒定性高糖及不同频率的波动性高糖对原代培养的牛视网膜周细胞增生、细胞周期及凋亡的影响。方法以体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象,分别在对照组(5.5mmol/L)、恒定性高糖组(25mmol/L)及不同波动频率的高糖组(5.5mmol/L与25mmol/L交替,频率分别为6h和24h)中孵育6d,采用MTT比色法观察周细胞增生情况;流式细胞术观察周细胞周期情况;TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡率。结果周细胞增生受抑制,周期阻滞,出现典型的细胞凋亡特征。恒定性高糖组的作用高于波动性高糖组(P〈0.05);波动性高糖组内波动频率越高作用越明显(P〈0.05)。结论恒定性高糖较波动性高糖可能具有更强的抑制周细胞增生、周期阻滞及诱导凋亡作用,波动组间波动频率高者比频率低者作用更明显。 相似文献
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目的探讨不同浓度的持续高糖和间断高糖对牛视网膜血管周细胞(BRPs)增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法分别在低糖、持续及间断高糖下培养BRPs7天;应用MTT比色法观察各组BRPs增殖情况;应用TUNEL法检测BRPs凋亡率;应用流式细胞术观察BRPs细胞周期的情况。结果(1)持续及间断高糖均可抑制BRPs增殖,诱导其凋亡,与对照组比较,P〈0.01,其中35mmol/L持续高糖组的吸光度为0.274,凋亡率为48.73%;(2)持续及间断高糖可使BRPsG0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,G2/M细胞比例无明显改变;(3)间断高糖组中波动幅度及频度大者对BRPs的作用更明显。结论高糖毒性和高糖波动性共同参与视网膜病变的发生,且高糖绝对水平的作用超过高糖的不稳定性作用。 相似文献
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目的:研究高糖诱导牛视网膜血管周细胞凋亡中线粒体细胞色素C(Cyt-C)的变化.方法:以在体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象,分别在对照组(5.5mmol/L)与高糖各组(15,25,35mmol/L)中孵育6d,透射电镜观察周细胞超微结构改变,TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡情况,分光光度计检测周细胞胞质Cyt-C变化.结果:高糖各组周细胞出现明显凋亡改变,凋亡率明显高于对照组(t1=57.450,t2=83.754,t3=136.403,P<0.01);高糖各组胞质Cyt-C浓度明显高于对照组(t1=17.361,t2=17.866,t3=24.072,P<0.01),且Cyt-C浓度与周细胞凋亡率明显正相关(r=0.964,P<0.01).结论:高糖呈剂量依赖性诱导牛视网膜血管周细胞凋亡,线粒体Cyt-C释放可能参与周细胞凋亡过程. 相似文献
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目的 对比研究波动性与恒定性高糖对牛视网膜毛细血管周细胞氧化应激的影响.方法 体外培养3代融合的牛视网膜血管周细胞,分别在对照组(5.5 mmol/L)、不同浓度高糖(15 mmol/L、25 mmol/L)、不同幅度的高糖波动(5.5~15 mmol/L、5.5~25 mmol/L)下孵育6 d.硫代巴比妥酸检测培养液丙二醛(MDA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测培养液超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 与对照组相比,波动性高糖组与恒定性高糖组MDA含量/SOD活力比值增加(P<0.05),且与葡萄糖浓度及高糖波动幅度呈正相关(P<0.01),波动性高糖1组(5.5~15 mmol/L)较恒定性高糖1组(15 mmol/L)MDA含量/SOD活性比值增加(P<0.05),恒定性高糖2组(25 mmol/L)较波动性高糖2组(5.5~25 mmol/L)MDA含量/SOD活性比值增加(P<0.05).结论 在一定葡萄糖浓度范围内,波动性高糖较恒定性高糖对细胞的氧化损伤加重,而超过一定葡萄糖浓度,恒定性高糖使氧化损伤更为显著. 相似文献
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目的 研究恒定及波动高糖培养对牛视网膜血管周细胞凋亡的影响,并探讨其线粒体调控机制.方法 体外培养接近融合的视网膜血管周细胞在恒定及波动高糖中孵育6 d后,采用电镜观察周细胞超微结构改变;TUNEL法检测周细胞凋亡;激光共聚焦显微镜检测周细胞线粒体跨膜电位的改变;分光光度计检测周细胞胞质细胞色素c的变化;免疫组化和RT-PCR测定Bax、Bel-2基因的表达.结果 (1)恒定及波动高糖卜周细胞呈现出典型的细胞凋亡改,变,恒定高糖作用强于波动高糖组;(2)恒定及波动高糖培养使用细胞线粒体跨膜电位降低,周细胞线粒体跨膜电位与周细胞凋亡率负相关(r=-0.89,P<0.01);(3)恒定及波动高糖促使周细胞线粒体细胞色素c转移到胞质,胞质细胞色素c浓度增加,与细胞凋亡率正相关(P<0.01);(4)恒定及波动高糖能诱导凋亡基因Bax表达增加,抑制Bcl-2的表达,Bax/Bcl-2比值增加.Bax/Bcl-2比值与线粒体跨膜电位负相关,与胞质细胞色素c浓度正相关,与周细胞凋亡率正相关(均P<0.01).结论 恒定及波动高糖均可诱导培养的周细胞线粒体跨膜电位降低,细胞色素c释放,细胞发生凋亡,且恒定高糖作用强于波动高糖;线粒体凋亡途径在周细胞凋亡中起重要作用,凋亡基因Bax、Bcl-2可能参与其调控. 相似文献