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1.
基质金属蛋白酶抑制因子-1 小干扰RNA载体构建及对肝星状细胞沉默效应的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建TIMP-1小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并观察其对肝星状细胞株TIMP-1 mRNA表达的作用。方法根据siRNA设计原则,在TIMP-1 mRNA序列中选择2个特异性靶序列(447~465 nt、552~540 nt)及1条无关对照序列,体外合成对应发卡样DNA片段,将其克隆入pGEM-T连接载体,BamH I和Xho I分别双酶切pGEM-T及表达载体pRNAT-U6.2,胶回收粘末端将特异序列定向亚克隆构建TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA载体,用脂质体包裹转染入T6细胞,采用RT-PCR检测TIMP-1 mRNA表达水平的变化。结果所构建的TIMP-1 pRNAT- U6.2/siRNA载体,经酶切鉴定与测序,结果显示特定位点靶序列与设计序列完全一致;转染T6细胞后,TIMP-1 mRNA表达明显降低。结论成功构建TIMP-1 siRNA载体TIMP-1 pRNAT U6.2/siRNA,转染T6细胞可以有效抑制TIMP-1 mRNA的表达。 相似文献
2.
目的:探讨组织蛋白酶B(cathepsin B,CB)表达与食管鳞癌发生、发展及浸润转移的关系。方法:应用免疫组化SP法和原位杂交方法检测49例食管癌组织及其相应的癌旁非典型增生组织和正常组织中CB蛋白及mRNA的表达。结果:正常食管粘膜CB蛋白及mRNA均阴性表达,转移组癌组织及非典型增生组织CB蛋白及mRNA阳性表达率明显高于无转移组。两组间相比差异有显著性(P〈0.05)。浸润至外膜组癌组织、非典型增生组织中CB蛋白和CBmRNA的阳性表达率均高于浅肌层组、深肌层组,差异有显著性(P〈0.05);深肌层与浅肌层相比,差异无显著性(P〉0.05)。转移组及无转移组癌组织CB蛋白及mRNA阳性表达率均高于相应的癌旁非典型增生组织,差异有显著性(P〈0.01)。结论:人食管鳞癌组织CB蛋白及mRNA均呈高表达,CB表达与食管癌的发生、发展及浸润转移有关。 相似文献
3.
目的 探讨乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白的表达及其相关性,并分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化En Vision 法检测90 例乳腺癌和相应癌旁组织中Pokemon 和p53 蛋白的表达情况。结果 乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白表达阳性率均明显高于癌旁组织(均P<0.01);Pokemon 和p53蛋白的表达与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移均有关(均P<0.01),而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型及分级均无关(均P >0.05)。Spearman相关分析显示在乳腺癌组织中,Pokemon 和p53 蛋白表达呈正相关(P<0.01)。结论 Pokemon 和p53蛋白异常表达可能与乳腺癌的发生、发展有关,联合检测两者对评估乳腺癌生物学行为及预后具有较重要的临床意义。 相似文献
4.
目的 观察PI3K p85α在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌发生的关系及其临床意义.方法 采用免疫组化EnVision法检测PI3K p85α蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达.结果 胃癌组织中PI3K p85α蛋白阳性表达率为80%(48/60),正常胃黏膜组织为10%(2/20),差异有统计学意义(P<0.05).PI3K p85α蛋白表达与胃癌临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(均P<0.05),而与患者性别、年龄及组织学分级无关(均P>0.05).结论 PI3K p85α蛋白的异常表达有望成为胃癌早期诊断和判断其生物学特性标志物之一. 相似文献
5.
目的 探讨乳腺癌转移性胸腔积液的临床与预后改变、细胞学特点及分子分型.方法 回顾性分析14例乳腺癌转移性胸腔积液的临床病理学资料,并进行液基细胞学制片、常规细胞蜡块HE染色,从癌细胞的形态学、免疫细胞化学染色及免疫荧光染色等方面进行观察.结果 乳腺癌转移性胸腔积液以浸润性导管癌为主,也可以为浸润性小叶癌,分子分型以Lu... 相似文献
6.
目的 研究长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(lncRNA MIAT)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)蛋白在甲状腺癌组织中的表达及二者与预后的关系.方法 选取2014年6月—2016年12月103例甲状腺癌患者作为研究对象,检测患者甲状腺癌组织和癌旁组织中lncRNA MIAT和LASP1表达情况,分析lncRNA... 相似文献
7.
目的研究叉头框蛋白Q1(FOXQ1)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在胃癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化EnVision法检测80例胃癌组织和25例癌旁组织中FOXQ1和CyclinD1的表达情况,分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织中FOXQ1和CyclinD1阳性表达率均高于癌旁组织(均P<0.05);在不同肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移及不同临床分期者之间的差异均有统计学意义(均P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小及分化程度者之间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。胃癌组织中FOXQ1阳性表达率与CyclinD1阳性表达率呈正相关(P<0.05)。结论FOXQ1和CyclinD1高表达在胃癌的发生、发展中起作用,联合检测FOXQ1和CyclinD1可用于判断胃癌的浸润、转移潜能及患者的预后。 相似文献
8.
目的通过对甲状腺乳头状癌患者细胞学液基细胞切片和同例切片剩余标本分别提取核酸进行鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E突变检测(简称BRAFV600E检测)比对,探讨使用剩余标本进行检测的可行性。方法收集甲状腺乳头状癌细针穿刺标本101例,分2组,均收取其细胞学液基细胞切片及液基细胞学制片剩余标本、对应术后常规肿瘤组织样本:第一组82例,细胞学镜下均找到乳头状癌细胞(常规手术后病理诊断均为甲状腺乳头状癌);第二组19例,细胞学结果为可疑滤泡性肿瘤;方法一:直接在细胞学液基细胞切片上刮取足够肿瘤细胞提取核酸进行BRAFV600E检测;方法二:先通过细胞学液基细胞切片进行肿瘤细胞质控评估,再用制作同例细胞学制片的剩余标本提取核酸进行BRAFV600E检测;两种方法检测结果均与对应术后常规肿瘤组织标本检测结果作对比。结果方法一和方法二检测甲状腺乳头状癌中BRAFV600E突变率分别为75.6%和73.2%,两种方法突变率比较差异无统计学意义(P>0.05)。方法一和方法二检测细胞学结果为可疑滤泡性肿瘤中BRAFV600E突变率分别为5.26%和5.26%,两种方法比较差异无统计学意义(P=1.000)。方法一与对应术后常规肿瘤组织标本检测BRAFV600E结果的符合率为100.00%,方法二与对应术后常规肿瘤组织标本检测BRAFV600E结果的符合率为98.02%,两种方法符合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论虽然方法一与方法二检测结果无统计学差异,但方法二既能满足做分子检测前质控,又能避免破坏液基细胞切片,指导临床后续治疗,具有一定的临床价值。 相似文献
9.
目的探讨结直肠癌组织中NGX6和p21WAF1的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测94例结直肠癌组织和30例正常结直肠黏膜组织中NGX6、p21WAF1蛋白的表达情况。结果 NGX6及p21WAF1蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率均明显低于正常肠黏膜组织(均<0.05);NGX6和p21WAF1蛋白表达均与结直肠癌的临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(<0.05),而与组织学分级无关(>0.05);免疫组织化学显示在结直肠癌组织中两者之间阳性表达呈正相关(=0.340,<0.05)。结论 NGX6、p21WAF1蛋白表达异常可能共同参与了结直肠癌的发生发展、侵袭和转移;联合检测两种蛋白对于评价结直肠癌的恶性程度、判断其转移潜能和预后可能具有重要的临床意义。 相似文献
10.
目的探讨影响嗅神经母细胞瘤(ONB)颈部淋巴结转移的相关因素。方法回顾性分析21例ONB的临床资料,包括年龄、病程、Hyams分级、是否淋巴结转移,并分析年龄和组织病理学分级与颈部淋巴结转移的关系。结果21例年龄4~68岁;组织病理学分级1级1例,2级6例,3级9例,4级5例。8例病人有颈部淋巴结转移。组织病理学分级1~2级与3~4级患者比较,颈部淋巴结转移率差异有显著性(〈0.05)。转移与无转移患者年龄比较,差异有统计学意义(〈0.05)。结论年龄、恶性程度ONB因素可能影响颈部淋巴结转移。 相似文献