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禽流感病毒非结构蛋白1单克隆抗体的制备及其特异性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为研制禽流感病毒(H5N1)非结构蛋白1(NS1)的特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性,本研究在分别表达了具有良好抗原性的A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白基础上,用A/Viet-nam/1194/04(H5N1)-NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光和免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制实验对单抗识别的抗原位点进行分析。结果共获得19株能识别4个H5N1-NS1蛋白不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,5株为IgG2a、1株为IgG2b,另外13株为IgG1。这些mAb均与A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白特异性结合,免疫荧光检测均与A型流感病毒(H1N1和H3N2)有交叉反应,而与B型流感病毒无交叉现象。表明成功获得特异性针对H5N1-NS1蛋白的mAb,为进一步研究禽流感病毒NS1蛋白的结构与功能奠定基础。 相似文献
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靶向Ras—tp—MAPK信号传递途径的抗肿瘤抗生素研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
增殖调节的失控是肿瘤细胞的典型特征。细胞外的信号转导和细胞内的信号传递是现代生物化学、分子生物学与分子药理学的研究热点,它们的快速发展为癌症治疗提供了新的潜在靶点。近年来癌细胞中Ras-to-MAPK信号传递途径受到基础研究与药物开发工作者的广泛关注,针对该途径中某些关键激酶的抑制剂的筛选非常活跃。对微生物来源的作用于Ras-to-MAPK信号传递途径的法尼基转移酶抑制剂、MEK1抑制剂及热休克蛋白90抑制剂进行了综述。 相似文献
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目的 检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒(229E、OCA3和SARS-CoV)特异性抗体.分析3种冠状病毒血清学相关性。方法 采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OCA3和SARS-CoV3种冠状病毒核衣壳(N)蛋白抗体。结果 用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98%、100%和1%,34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100%;免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别9r7%、99%和2%,34例SARS患者恢复期血清中229E、OCA3和SARS-CoVN蛋白IgG阳性率分别97%、100%和100%;11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中,免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高,10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高,ELISA检测2例出现229EN蛋白IgG滴度4倍以上升高,没有一例出现OCA3N蛋白抗体滴度升高。结论 正常人群中普遍存在229E和OCA3两种人冠状病毒抗体,SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OCA3血清学交叉反应,提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原,结果对研究SARS溯源有重要意义。 相似文献
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目的:探讨瑞舒伐他汀联合曲美他嗪治疗对PCI相关心肌损伤的影响。方法收集需行PCI术的120例稳定型心绞痛患者,随机分为瑞舒伐他汀联合曲美他嗪治疗组(试验组)和单用瑞舒伐他汀治疗组(对照组),每组各60例。对照组按稳定型心绞痛治疗指南行常规治疗,并在PCI术前5 d予瑞舒伐他汀10 mg/d,试验组在对照组基础上加予曲美他嗪20 mg,每日3次,术前至少使用5 d,术后长期使用。分别在PCI术前、术后12 h、术后3 d检测两组患者的血清人可溶性CD40配体(sCD40L)及超敏肌钙蛋白T (hsTnT)水平。随访半年,比较两组患者主要心血管事件发生率的差异。结果两组术前冠状动脉病变情况及PCI术中植入支架枚数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术前两组稳定型心绞痛患者sCD40L、hsTnT水平比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。术后12 h两组患者sCD40L、hsTnT水平均比术前明显升高(P均<0.01),其中对照组sCD40L、hsTnT水平均明显高于试验组(P均<0.01)。术后3 d 两组患者 sCD40L、hsTnT水平均明显下降(P均<0.01),其中试验组sCD40L、hsTnT水平均明显低于对照组(P均<0.01)。术后随访半年,试验组再发心绞痛病例明显少于对照组(P<0.05)。结论 PCI术前联合使用曲美他嗪及瑞舒伐他汀治疗对降低PCI术后血清sCD40L、hsTnT水平疗效优于单用瑞舒伐他汀,有利于减少PCI相关心肌损伤,长期使用可降低心肌缺血事件的发生率。 相似文献
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在本地药市,见到一种当地群众及药农称为苦参的药材,经鉴定为萝蘑科的马莲鞍Streptocaulon griglthii Hook.f.的干燥根,本品种在广西南部及西南部使用较为广泛,也称为“藤苦参”、“南苦参”,在当地常混为苦参。为了更好地区分两种药材,现将二种药材介绍如下: 相似文献
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目的了解急性升主动脉夹层的临床特征以及急诊外科手术和内科药物治疗对此类患者预后的影响。方法对112例急性升主动脉夹层患者的临床资料进行分析,将纳入研究的病例分为药物治疗组和急诊外科手术治疗组,分析两组患者的发病特征、住院并发症的发生率以及病死率等指标。结果98例患者首发症状为颈、胸、背部“撕裂”样难以忍受的剧烈疼痛,78例患者既往有高血压病史,18例为马凡综合征患者,112例患者中有33例(29%)于住院期间死亡;58例急性A型夹层患者行药物治疗,另外54例患者经确诊后行急诊外科手术治疗,药物治疗组有23例(40%)患者死亡,而手术治疗组10例(19%)患者死亡,两组差异有统计学意义(P〈0.001)。结论急性升主动脉夹层有很高的住院病死率和严重并发症的发生率,行急诊外科手术可明显降低患者的病死率,改善患者的预后。 相似文献
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目的 探讨左室射血分数正常的心力衰竭(HFNEF)的临床优化治疗方案,评价缬沙坦、卡维地洛单用及合用对HFNEF的近期(3个月)及远期(12个月)的疗效.方法 依照2007年ESC心力衰竭和超声协会共同修订的HFNEF的诊断及排除标准,选取门诊及住院患者中确诊为HFNEF者90例进行治疗;将患者以随机双盲法分为3组各30例:缬沙坦组(A组),80 mg/d起逐渐滴定加量至靶剂量160 mg/d;卡维地洛组(B组),3.125 mg/次,2次/d起逐渐滴定加量至靶剂量25 mg/次,2次/d;二药合用组(C组),按上述方法滴定加量至靶剂量,或能耐受的最大剂量.未能达靶剂量者服用能够耐受的最大剂量.观察治疗前及治疗后3、12个月各组患者临床症状[生活质量评分(LVD-36)、6 min步行试验(6MWT)];心脏舒张功能超声多普勒指标:E/E'比值,左室侧壁E峰减速时间(DT)、E/A比值、左室重量指数(LVMI)、左房容积指数(LAVI);血生化指标:血 NT-proBNP定量的变化.结果 治疗3个月后,3组6MWT、LVMI、血NT-proBNP水平较治疗前已见改善,但组间尚未见差异;治疗12个月后3组6MWT、E/E'比值、DT、LVMI、LAVI、血NT-proBNP水平进一步改善,且C组在6MWT、E/A比值方面较A、B组改善更明显,差异有统计学意义.结论 缬沙坦、卡维地洛及二药合用在改善HFNEF患者近、远期临床症状、心脏超声左室舒张功能指标及降低血NT-proBNP水平方面均有明显疗效,而二药合用远期疗效更佳,值得提倡. 相似文献
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目的 制备和鉴定B型流感病毒核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(mAb),建立双抗体夹心捕获抗原ELISA,用于B型流感病毒感染的早期诊断。方法 用重组B型流感病毒N蛋白和B型流感病毒抗原免疫BALB/c小鼠制备mAb,采用ELISA间接法、免疫荧光(IFA)和免疫印迹(WB)进行筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗体识别表位,并采用抗体配对试验建立双抗体夹心捕获抗原ELISA法检测B型流感病毒 N抗原。结果 获得12株特异性针对B型流感病毒 N蛋白的mAb,识别8个不同的抗原位点,根据mAb识别抗原表位,对mAb进行多种组合的配对试验,筛选出2株单抗BN4和BN8混合作为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的单抗BN1 和BN5混合作为测定抗体,建立了双抗体夹心ELISA法,测定新鲜的漱口液标本的灵敏度达100%,而对冻融的漱口液标本检测灵敏度为83.9%,与其他呼吸道病毒如A型流感病毒、副流感病毒等无交叉反应,特异度达100%。结论 获得特异性好的mAb,经过抗体的配对和优化,建立了一种灵敏度高、特异性强的B型流感病毒抗原的ELISA捕捉法,可用于B型流感病毒感染的早期实验室诊断及流行病学研究。 相似文献
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目的 回顾性分析单中心心脏起搏器导线相关三尖瓣返流(TR)的状况。方法 连续入选2018年1月至2022年5月在中国医学科学院阜外医院深圳医院心内科行心脏起搏器植入的患者。统计患者一般临床资料及相关数据。通过心脏超声心动图对比分析术后TR程度定义加重2级及以上为TR进展。通过logistic回归分析影响TR进展的相关因素。结果 1 007例患者通过纳排标准后共入选553例患者。其中,男性279例,女性274例,年龄(64.7±15.1)岁。随访中位数316天,346例(62.6%)TR无变化,45例(8.1%)TR得到改善,140例(25.3%)TR加重一级,22例(4%)TR加重二级。与TR无进展组(n=531)相比,TR进展组(n=22)心房颤动占比、心力衰竭占比更高,左房前后径、左室舒张末径更大,左室射血分数更低(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,术前患有心房颤动,术后TR进展占比更高[OR 4.28 (1.6~11.42),P=0.004]。结论 心脏起搏器术后TR进展发生率较低,术前患有心房颤动是TR进展的独立危险因素。 相似文献