100例重庆市汉族儿童哮喘α1-抗糜蛋白酶基因突变初探

目的：了解儿童哮喘α１－抗糜蛋白酶（α１－ａｎｔｒｉｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ,α１－ＡＣＴ）基因点突变情况。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性酶切图谱分析技术,对１００全重庆市汉族儿童哮喘α１－ＡＣＴ基因外显子（ｅｘｏｎ）Ⅱ和Ⅲ进行检测。结果：所有研究对象均未发现Ｂｏｎｎ－１及Ｂｏｃｈｕｍ－１变异体。结论：Ｂｏｎｎ－１和Ｂｏｃｈｕｍ－１变异体与１００全重庆市汉族儿童哮喘发病无平行关系。     

携带泛素-HBcAg融合基因的慢病毒表达载体构建及其体外诱导小鼠髓源性树突状细胞成熟

目的构建携带泛素-HBcAg融合基因的慢病毒表达载体,包装成重组慢病毒并观察其体外诱导小鼠髓源性树突状细胞（DC）成熟。方法 PCR扩增Ub-HBcAg融合基因,插入到慢病毒骨架质粒pWPXLd中,构建重组质粒pW-Ub-HBcAg。将构建的重组慢病毒质粒pW-Ub-HBcAg和包装质粒psPAX2、包膜质粒PMD2.G用脂质体共同转染293T细胞,获得携带Ub-HBcAg基因的重组慢病毒LV-Ub-HBcAg,并检测其在293T细胞中的表达。体外分离培养小鼠髓源性DC,加入重组慢病毒,流式细胞仪测定DC表面分子表达,ELISA测定DC培养上清中IL-12分泌水平。结果强制泛素化HBcAg融合基因的慢病毒表达载体经测序证实目的基因序列及插入方向均正确,W estern b lot能检测到目的蛋白在293T细胞中的表达。LV-Ub-HBcAg能上调DC表面分子的表达（CD86、CD80、MHC-Ⅱ类分子）,并且能促进DC分泌IL-12（139.2±10.75）pg/mL,明显高于LV-HBcAg组分泌的量（P〈0.01）。结论成功构建了携带强制泛素化HBcAg融合基因的慢病毒,转染293T细胞后能够稳定表达目的基因,并且能诱导DC分化、成熟,上调表面共刺激分子的表达,促进IL-12因子的分泌。     

中枢神经系统感染160例临床分析

目的探讨各类中枢神经系统感染的临床特点及治疗方法。方法对我院收治的中枢神经系统感染160例的临床资料进行回顾性分析。结果本组诊断为病毒性脑炎(病脑)80例,化脓性脑膜炎(化脑)37例,结核性脑膜炎(结脑)35例,隐球菌性脑膜炎(隐脑)8例。全部予甘露醇、甘油果糖脱水降颅压及对症治疗,其中148例治疗有效,复查脑脊液示化脑、病脑患者脑脊液均恢复正常;结脑患者脑脊液明显好转,糖基本恢复正常;隐脑患者脑脊液3次墨汁涂片检查(-),糖、氯化物基本正常,脑脊液真菌培养(-),乳胶凝集试验效价明显下降(1∶8~1∶320)。148例病情好转出院,其中10例遗留颅神经损害和脑积水;12例死亡,病死率7.5%。结论中枢神经系统感染需结合临床表现、脑脊液检查和治疗效果综合进行诊断,对疑似中枢神经系统感染但不能确诊者,可予诊断性治疗,以免延误最佳治疗时机。     

婴幼儿采集血液标本部位及方法的探讨

婴幼儿四肢短，体型偏胖，采集血液标本都在颈部和腹股沟，究竟那一部位为好，本文作者通过临床体验和比较及多方的调查，认为，腹股沟处采集血液标本优于颈部，操作方法有直角和斜角进针之分，通过比较，作者认为斜角进行易固定，不易穿透血管后壁，可避免血肿形成，消毒效果好，故斜角进针较直角进针为理想。     

薄层色谱法纯化卟啉锰修饰的TFO

目的 筛选分离纯化卟啉锰-TFO-吖啶化合物的简单有效的方法。方法 以固相亚磷酰胺法合成吖啶，6碳氨基连接臂修饰的TFO，并以温和法切割和脱保护；四苯基卟啉四羧酸经金属化，酯化后，与上述TFO偶联；分别以变性聚丙酰胺凝胶电泳，寡核苷酸纯化柱，薄层色谱法分离纯化偶联反应产物。结果 以凝胶电泳分离偶联反应产物时，偶联反应产物带，卟啉锰活性酯带位于同一水平，未分离出独立的卟啉锰-TFO-吖啶化合物带，以寡核苷酸纯化柱分离偶联反应产物时，紫外分光光度仪检测结果显示，回收物仍为卟啉锰-TFO-吖啶化合物与游离的卟啉锰活性酯的混合物。以薄层层析分离偶联反应产物时，在卟啉锰活性单酯带后，出现一条绿色月牙型带，紫外光光谱分析显示，此带回收物同时具有寡核苷酸和卟啉锰的特征吸收峰（UVλmax=260,468nm)。质谱分析结果证实，回收物分子量实测值与卟啉锰-TFO-吖啶化合物理论一致。结论 薄层色谱法可简单有效分离纯化卟啉锰-TFO-吖啶化合物。     

香港残疾儿童的康复

2002年7月,笔者应香港复康会的邀请,有幸参观了香港残疾儿童的康复治疗及护理,虽然时间只有7天,但在香港复康会的精心安排下,学到了很多东西,现将参观香港残疾儿童的康复见闻汇报如下.     

缺氧缺血对新生鼠脑Caspase-3效应蛋白酶及细胞凋亡的影响

目的：观察缺氧缺血对新生鼠脑Caspase-3活性及Caspase-3与脑细胞凋亡之间的关系。方法：实验于2002-03／12在解放军第三军医大学新桥医院呼吸研究所完成。7d龄Wistar大鼠分为假手术组、缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage，HIBD)1，12，24，48h组。HIBD模型建立后。分别在上述各时间点用四肽荧光底物法测定脑组织Caspase-3活性；用免疫组化法检测活化Caspase-3蛋白以及用TUNEL法检测细胞凋亡。结果：HIBD后1h患侧脑组织Caspase-3活性已升高，到24h达高峰，48h明显下降；患侧脑细胞凋亡自HIBD后1h已升高，到24h达高峰，48h仍维持较高水平，两者之间呈正相关。结论：HIBD新生鼠患侧脑组织中Caspase-3激活，且与细胞凋亡明显相关。提示Caspase-3活化参与了HIBD的脑细胞凋亡。     

缺氧缺血对新生鼠脑Caspase-3效应蛋白酶及细胞凋亡的影响

目的:观察缺氧缺血对新生鼠脑Caspase-3活性及Caspase-3与脑细胞凋亡之间的关系。方法:实验于2002-03/12在解放军第三军医大学新桥医院呼吸研究所完成。7d龄Wistar大鼠分为假手术组、缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemiabraindamage,HIBD)1,12,24,48h组。HIBD模型建立后,分别在上述各时间点用四肽荧光底物法测定脑组织Caspase-3活性;用免疫组化法检测活化Caspase-3蛋白以及用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:HIBD后1h患侧脑组织Caspase-3活性已升高,到24h达高峰,48h明显下降;患侧脑细胞凋亡自HIBD后1h已升高,到24h达高峰,48h仍维持较高水平,两者之间呈正相关。结论:HIBD新生鼠患侧脑组织中Caspase-3激活,且与细胞凋亡明显相关。提示Caspase-3活化参与了HIBD的脑细胞凋亡。     

单纯腰痛性中央型椎间盘突出症诊治39例分析

对1999-02～2005-10我院收治的单纯腰痛性中央型腰椎间盘突出症39例分析如下.     

先心病患儿心脏手术前后血清神经元特异性烯醇化酶、脑干听觉诱发电位检测的意义

目的 评价脑干听觉诱发电位（BAEP）和血清神经元特异性烯醇化酶（s-NSE)在小儿先心病（CHD）心脏手术前后检测的意义。方法 1．测定体外循环开放式不停跳手术的CHD患儿20例手术前后BAEP的变化；2．测定心脏不停跳、停跳手术患儿各20例术前24h、术后2h、7d的s-NSE水平。结果 1．CHD患儿与对照组比较和手术前或后紫绀型先心病（CCHD）和非紫绀型先心病（NCCHD）比较，CCHD组Ⅲ-Ⅳ、Ⅰ－Ⅴ波和I－V波峰间潜伏期（IPL）显著延长（P＜0．05）。2．手术组术后2h血s-NSE水平显著增高，不停跳组和停跳组平均值与术前比较差异非常显著（P＜0．001）；术后7d s-NSE水平上述两组与术前比较差异显著（P＜0．05）。3．术后2h s-NSE水平停跳组明显高于不停跳组（P＜0．001），且术后7d s-NSE水平两组比较差异显著（P＜0．05）。结论 1．CCHD可伴随脑功能损害；2．s-NSE的变化可提示体外循环手术过程中的脑功能受损；3．就脑保护而言，心不停跳术式优于停跳术式。