肿瘤坏死因子及中性粒细胞在脊髓继发性损伤中的作用

目的 探讨炎性反应对脊髓损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 健康Wistar大鼠48只。随机分为2组，实验组与对照组。采用Allen法挫伤大鼠T10节段脊髓，于术后1、8h和1、2、3、7d取材。检测肿瘤坏死因子（TNF）与髓过氧化物酶水平的变化。结果 实验组肿瘤坏死因子与髓过氧化物酶水平均明显升高（P〈0．01）。结论 中性粒细胞及TNF-α参与了脊髓继发性损伤，并可能是触发迟发性神经元凋亡的重要因素之一。     

热带病研究新进展

一种新型抗疟原虫药物已经被报道 ,代号Ｇ2 5的这种药物可以阻止红内期的疟原虫构建它的细胞壁。在体外和猴 (Ｏｗｌｍｏｎｋｅｙｓ)体内的实验显示它和奎宁相比有显著的活性和相对低的毒性[1] 。第一个对自然感染的恶性疟原虫有明显保护作用的红细胞前期疫苗是ＲＴＳ ,Ｓ。据报道在冈比亚 ,该疫苗与新型佐剂ＡＳＯ2合用 ,对那些免疫不完全的恶性疟原虫感染者部分有效。保护作用是部分而且短时的 ,但是这种疫苗在低度流行区域或低传播季节可能具有潜在的应用价值[2 ] 。ＷＨＯ已将Ｃｏａｒｔｅｍ ,一种青蒿素和非青蒿素混合物 (蒿甲醚 / )的…     

高强度可吸收内固定物治疗实验性骨折的形态计量学研究

目的：应用聚酰胺可吸收髓内针治疗实验犬胫骨骨折愈合过程的骨形态计量学分析。方法：３６条杂种犬随机分为实验组与对照组。于左胫骨粗隆下３ｃｍ处横行截断胫骨，分别行可吸收髓内针和金属髓内针固定。术后１、２、４、８、１２周时分别采取骨痂标本，观察其组织学变化，计算骨形态计量学参数。结果：编织骨、矿化软骨等随固定术后时间的延长，含量逐渐下降，而板层骨含量逐渐增加，１２周时达高值，组织学上表现为以排列规则的板层骨为主；骨小梁体密度和平均骨小梁宽度两组一致；类骨质体密度、平均类骨质宽度、平均骨壁厚度和成骨细胞指数等，两组的测量值均接近或达到骨计量学参数的正常值。结论：可吸收髓内针固定长管状骨骨折与金属内固定比较，其骨折愈合方式和时间一致     

全长cDNA文库的构建和新基因全长cDNA克隆的策略

基因全长cDNA克隆是研究基因功能的前提之一。新基因全长cDNA克隆的方法很多，目前比较可行且应用较多的主要是cDNA库筛选。本主要介绍了近年来比较常用的全长cDNA库的构建及全长cDNA的克隆(包括“电子”基因克隆)的策略和方法及其进展。     

日本血吸虫亲免素基因的扩增及序列分析

[目的]研究日本血吸虫亲免素基因编码序列的结构及进行初步的功能预测.[方法]用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中扩增,以获取日本血吸虫中国大陆株亲免素基因完整的开放阅读框(open readingframe,ORF);用生物信息学技术确认其是否为亲免素编码基因并进行结构功能的初步分析和预测.[结果]用5'端和3'端锚定PCR从尾蚴文库中获得了亲免素基因5'端和3'端所缺序列,得到的亲免素基因cDNA的总序列长为1 438 bp,其ORF长1 296 bp,编码431个氨基酸.利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫亲免素基因的完整cDNA序列.并用RT-PCR从日本血吸虫尾蚴mRNA扩增出亲免素基因的ORF.[结论]成功获得了日本血吸虫亲免素编码基因的全长cDNA,为进一步的功能研究打下了基础.     

成骨细胞与血管内皮细胞联合培养的生物学特性

目的探讨成骨细胞与血管内皮细胞联合培养的生物学特性. 方法取2周龄乳兔颅盖骨及肾脏皮质传代培养制备成骨细胞(A组)、血管内皮细胞(B组)及成骨细胞与血管内皮细胞联合培养(C组),用Ⅰ型胶原和血管Ⅷ因子免疫细胞化学染色鉴定成骨细胞和血管内皮细胞,倒置相差显微镜和组织学染色观察细胞的生长特性和细胞相容性,检测碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP)活性,观察血管内皮细胞对成骨细胞产生的ALP活性有无影响,MTT法检测细胞活力,分析细胞生长和增殖情况. 结果免疫细胞化学染色证实,培养的细胞为成骨细胞和血管内皮细胞.倒置相差显微镜、HE和Masson染色均显示两种细胞混合生长良好.ALP检测结果:C组ALP活性明显高于A组和B组(P＜0.01),A组高于B组(P＜0.05).MTT检测结果表明:C组细胞早期增殖较慢,而后期增殖较快. 结论成骨细胞与血管内皮细胞具有良好的相容性,血管内皮细胞能够增强成骨细胞的ALP活性,提高成骨细胞的增殖能力.联合培养细胞具有很强的增殖潜能.     

恶性疟原虫pGST—HTl融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

目的 构建pGST—HT1融合表达载体,并观察其在大肠杆菌中的表达情况。方法 基因扩增,融合表达载体的构建,SDS—PAGE电泳和Western blot分析。结果 对重组质粒进行酶切鉴定证实HT11片段已克隆到pGSTag的EcoRI和Sall位点之间。表达产物经SDS—PAGE电泳后显示在相对分子质量82000处出一条新生蛋白带,与HT1／GST(56／26)融合蛋白大小一致,提示成功表达HT1融合蛋白。Western印迹杂交结果也显示在相对分子质量82000处出现阳性着色条带。结论 本实验成功构建pGST—HTl表达载体,并诱导表达出HTl融合蛋白,为HTl蛋白功能和免疫原性的进一步研究奠定了基础。     

抗葡萄球菌肠毒素A的单克隆抗体

用小鼠骨髓瘤(SP/2)细胞和由葡萄球菌肠毒素A(SEA)免疫的BALB/c纯系小鼠脾细胞进行体细胞杂交,获得了十种单克隆抗体,出同位素标记的SEA做免疫沉淀,以竞争和非竞争放射免疫法测定,其中五种克隆与SEA呈特异性反应,对其他葡萄球菌肠毒素没有交叉反应。另外五种克隆显示对血清蛋白有中等的交叉反应,杂交瘤抗体是从注射瘤细胞的     

抗促甲状腺激素的单克隆抗体的制备与特性鉴定

将Nso小鼠骨髓瘤细胞与促甲状腺激素(TSH)免疫的小鼠进行融合,迄今为止,已经获得17种稳定产生抗TSH抗体的杂交瘤。基于与有关糖蛋白激素(人绒毛膜促性腺素HCG,黄体生成素LH及卵泡刺激素FSH)的交叉反应,用放射免疫测定,作者将17种杂交瘤暂时分为五组(见表1)。这就意味着每组杂交瘤产生的单克隆抗体,可以在TSH分子水平鉴别出