BHA通过ERK信号转导途径促进小鼠胎肝细胞神经组织细胞特异基因表达的研究

目的：了解丁羟回香醚（BHA）对小鼠胎肝（FL）细胞神经组织特异基因表达的影响及其信号途径。 方法： 采用MACS试剂盒分离小鼠胚胎肝Sca-1+细胞，以DMEM+10%胎牛血清培养液培养；第4 d后，加入或者不加入细胞外信号调节蛋白激酶特异抑制剂PD98059 (25 μmol/L)处理24 h，再加入BHA处理24 h（0.2 mmol/L）。然后在无血清培养基中培养5 d。用Western blotting和半定量RT-PCR方法分析BHA处理前后基因表达。 结果： 经BHA诱导处理后，细胞表达神经组织细胞特异蛋白显著增加如神经丝轻链（NF-L）、神经丝重链（NF-H）、脑因子1（BF-1）和酪氨酸羟化酶（TH）。NF-L、NF-H、BF-1和TH分别增加6.32倍、2.73倍、3.37倍、2.68倍。而PD98059能明显抑制BHA诱导的神经组织细胞特异蛋白NF-L、NF-H、BF-1和TH的表达。 结论： BHA通过细胞外信号调节蛋白激酶途径促进小鼠FL Sca-1+细胞表达神经组织细胞特异抗原、结构和功能基因。     

成人冠状动脉左前降支粥样硬化斑块中检测出肺炎衣原体

为了探索肺炎衣原体感染和冠状动脉粥样硬化之间的关系、利用肺炎衣原体主要外膜蛋白基因上的保守序列设计的3条引物，通过多聚酶链反应检测32例冠状动脉左前降支粥样硬化斑块以及7例正常冠状动脉左前降支中肺炎衣原体。结果发现，32例有粥样硬化斑块的冠状动脉左前降支中有14例多聚酶链反应阳性．阳性率为43．75％，7例正常冠状动脉中无一例阳性，阳性率为0％。结果提示肺炎衣原体在有粥样硬化冠状动脉和正常冠状动豚中存在显著差异。     

成体干细胞的可塑性

继1999年和2000年连续两年被列为年度"人类十大科技进展"后,有关干细胞研究于2007年被再次列为年度十大科学突破之一.干细胞由于具有自我复制、高度增殖和多向分化潜能等特点,已经成为组织细胞发育分化研究、临床医疗应用等领域的重要材料与产品.     

小鼠胎盘间充质干细胞移植对造血系统自然衰老的影响

背景：造血系统作为人体重要组成部分,随着年龄的增长会出现功能不断衰退。目的：观察小鼠胎盘间充质干细胞对小鼠造血系统自然衰老的延缓作用。方法：取孕13.5dBalb/c小鼠胎盘,制备胎盘间充质干细胞。6月龄Balb/c小鼠48只随机分均为细胞移植组和对照组。细胞移植组尾静脉输注胎盘间充质干细胞,每月1次,共6次;对照组输注生理盐水。第3个月进行外周血象、骨髓有核细胞计数、成纤维细胞集落培养、造血祖细胞集落培养和外源性脾集落形成单位计数检测;第6个月时增加骨髓切片观察、骨髓细胞重建造血能力测定。结果与结论：细胞移植组小鼠一般情况优于对照组;干预第3个月,细胞移植组的骨髓有核细胞计数、巨噬系祖细胞、巨核系祖细胞多于对照组,其他指标无明显差别;干预第6个月,除外周血象仍无差别外,其他的上述指标均明显高于对照组;观察期内两组的上述指标均随时间延长呈下降趋势,但细胞移植组下降速度明显慢于对照组,差异有显著性意义（P〈0.05）。组织学观察发现,细胞移植组骨髓造血组织较对照组丰富,而对照组骨髓脂肪化显著增加;实验还发现细胞移植组骨髓细胞的造血重建能力明显优于对照组。结果提示,小鼠胎盘间充质干细胞能够延缓小鼠造血系统的衰退。     

低氧诱导胎肝间质细胞表达碱性成纤维生长因子

目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的表达情况,为其用于脑缺血治疗提供依据.方法:取孕14.5 d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代,生长至次融合状态的第5代细胞在95% N2和5% CO2混合气体条件下培养,在2、4、8、16、32 h时应用半定量RT-PCR和Western印迹法检测其bFGF基因表达.结果:在常氧条件下培养的胎肝间质细胞中,bFGF mRNA及其蛋白水平均较低;而低氧培养则可显著提高胎肝间质细胞bFGF基因的mRNA及其蛋白水平.bFGF mRNA在低氧培养2 h时即显著增高,16 h时达到高峰水平.PCR产物bFGF与β-actin信号比从常氧培养的(5.94±2.65)% 增加到(32.86±9.57)% (P＜0.01),升高5.52倍;bFGF蛋白在低氧培养4 h时显著增高,16 h时达到高峰水平,Western印迹法检测bFGF与β-actin信号从常氧培养的(4.73±2.23)%增加到(23.96±7.83)% (P＜0.01),升高5.07倍.结论:低氧可诱导bFGF在小鼠胎肝间质细胞中的表达,提示小鼠胎肝间质细胞在脑缺血中的治疗作用.     

转铁蛋白受体介导的Bcl-2shRNA转移对HL-60细胞生长的抑制作用

目的 探讨Bcl一2短发夹状RNA（shRNA）表达载体对白血病细胞HL-60生长的抑制作用。方法 采用转铁蛋白-多聚乙烯亚胺介导的转染方法将携带绿色荧光蛋白基因的重组Bcl-2 shRNA1、shRNA2表达载体转入HL-60细胞。通过荧光显微镜和流式细胞仪观察绿色荧光蛋白的表达;采用台盼蓝拒染法计数活细胞;用免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白表达水平。结果 Bcl-2 shRNA1、shRNA2载体分别转入HL-60细胞后,细胞中Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P〈0．05）,转染后48、72、96h细胞生长明显受到抑制。结论 转铁蛋白受体介导的Bcl-2 shRNA可显著抑制HL-60细胞生长。     

幽门螺杆菌感染、p16基因甲基化与胃癌的相关性研究

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp)感染、抑癌基因p16 5′-CpG岛甲基化与胃癌的相关性。方法：对57例胃癌患者及30例慢性浅表性胃炎患者（对照组）分别采用快速尿素酶法及Giemsa染色法进行Hp检测,并采用甲基化敏感性限制性内切酶（HpaⅡ、MspⅠ、SacⅡ）酶切后PCR扩增法进行p16基因外显子Ⅰ多位点甲基化状态的检测。结果：57例胃癌患者中,Hp阳性27例（47．4％）,p16基因甲基化18例（31．6％）;Hp阳性胃癌组p16基因甲基化13例（48．2％）Hp阴性胃癌组p16基因甲基化5例（16．75）。对照组30例中,无p16基因甲基化,Hp阳性16例（53．3％）;结果显示胃癌组与对照组Hp感染无显著性差异（P＞0．05）。2组p16基因甲基化比较有显著性差异（P＜0．05）,Hp阳性胃癌组与Hp阴性胃癌组比较,p16基因甲基化有显著性差异（P＜0．05）。幽门螺杆菌感染可诱发抑癌基因p16 5 ′-CpG岛出现甲基化,可能是幽门螺杆菌与参致癌的机制之一。     

光敏化姜黄素对人胃腺癌MGC-803细胞的影响及其在细胞内的分布

目的:探讨光敏化姜黄素对人胃腺癌MGC-803细胞的影响及其细胞内的分布情况.方法:用MTT法检测细胞株的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,荧光显微镜观察细胞核形态;激光共聚焦显微镜观察姜黄素在细胞内的分布.结果:光敏化姜黄素作用于MGC-803细胞12、24、48h后,MTT法检测细胞的抑制率分别为35.53%±3.52%、40.17%±2.01%、44.93%±3.61%;凋亡率分别为20.32%±3.07%、22.46%±1.51%、26.58%±2.67%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).光敏化姜黄素作用48h后能见明显的凋亡小体.激光共聚焦显微镜下观察光敏化姜黄素发出的黄色荧光主要在细胞质膜、核膜呈聚集性分布,散在分布于其他亚细胞结构,细胞核分布较少.结论:光敏化姜黄素能抑制胃癌细胞的生长及凋亡,具有显著的光动力学效应,随作用时间的延长而逐渐增加.光敏剂主要分布于细胞质膜和核膜,散在分布于其他亚细胞结构,细胞核分布较少.     

反义myb和反义myc寡核苷酸抑制动脉平滑肌细胞增殖的机理研究

反义ｍｙｂ和反义ｍｙｃ寡核苷酸抑制动脉平滑肌细胞增殖的机理研究杨和平，刘革修，万腊香，涂玉林，杨永宗（衡阳医学院心血管病研究所）董薇，李岱宗，周爱儒，汤健（北京医科大学心血管研究所）本文合成了反义和正义ｃ－ｍｙｂ、ｃ－ｍｙｃ１８－ｍｅｒ，分别或同时导...