携带溶菌酶基因的高回交转育后代抗瘟性研究

进一步明确溶菌酶基因回交转育利用对于强优恢复系“明恢63”稻瘟病抗性改良的效果, 运用苗期人工接种和大田穗颈瘟鉴定相结合的方法, 研究了携带溶菌酶基因的高回交转育纯系对于稻瘟病的抗谱特性和穗颈瘟抗性。结果表明: 回交纯系对所应试的76个菌株中的6~8个感病, 稻瘟抗性频率为90%左右, 属高抗水平; 而轮回亲本“明恢63”对21个菌株感病, 抗性频率为72.37%, 属中抗水平。穗颈瘟调查分析表明, 回交转育纯系比轮回亲本发病率平均降低10%左右, 发病指数平均降低15%左右, 经T值检验二者在穗颈瘟抗性水平上差异达极显著水平, 回交转育纯系抗性评价为抗性(R)级, 轮回亲本为中感(MS)级。因此溶菌酶基 因的转育利用确能有效拓宽抗谱, 提高稻瘟病抗性水平, 这些回交转育品系在抗病育种上具有较高的应用 潜力。     

应用G418催芽胁迫体系鉴定携带npt-Ⅱ基因的转育水稻纯系的研究

研究了G418胁迫条件下转育后代的发芽特性和长根类比率,筛选获得了高抗C418的抗性株系,并进行其npt-Ⅱ基因及目的基因的检测与遗传分析.结果表明,转育株系如BM-3、BM-10、BM-13具有高发芽率(>90%)、高生根率(>95%)、低死亡率(<10%)和高长根比率(约为90%),经PCR结果发现这些株系内各单株都含有npt-Ⅱ基因及溶菌酶基因,确为转基因纯合体.进一步证实了G418胁迫催芽技术是可行和实用的,对于npt-Ⅱ基因转育纯系的筛选有重要意义.     

灰毡毛忍冬转录组SSR位点分析及EST-SSR标记开发

灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides)为中药山银花的一种基原植物,在中国南方广泛分布,具有很高的药用价值和经济价值.本研究利用MISA工具对灰毡毛忍冬转录组74 057条Unigenes中的SSR位点进行了分析,其中15 587条Unigene共计含有SSR位点20 161个,SSR发生频率为21....     

紫薇花器官发育调控基因LiFUL1的分离与表达分析

紫薇湘韵具有只开花不结实的特性,表现为花药不开裂、花粉败育、胚珠发育异常。紫薇红叶为普通紫薇,可正常开花结实。以紫薇湘韵为试验材料,采用RT-PCR方法,从花芽中分离得到1个FRUITFULL(FUL)同源基因,命名为LiFUL1(GenBank登录号为MN894547)。序列分析结果表明,其cDNA开放阅读框长度为753 bp,编码251个氨基酸,分子质量为28.453 13 ku。序列比对和保守结构域分析结果表明,LiFUL1基因编码蛋白具有典型的MADS-MEF2和K-box结构域,C末端含有一个保守性高的基序euFUL MOTIF,因此,LiFUL1属于MADS家族的FUL/AP1亚家族。进化分析表明,紫薇的LiFUL1基因编码的蛋白氨基酸序列与木本植物蓝桉的FUL/AP1氨基酸序列亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果表明,LiFUL1基因在紫薇湘韵花器官分化阶段的花萼分化时期、花瓣与雄蕊分化时期、雄蕊与雌蕊分化时期的表达量显著高于紫薇红叶。另外,利用原核表达系统在大肠埃希菌中成功表达了LiFUL1蛋白,为进一步研究LiFUL1基因的功能奠定了基础。     

金心扶芳藤组培快繁技术研究

为加快金心扶芳藤在园林绿化中的应用,以其带腋芽的茎段为材料,筛选其初代、增殖及生根培养基,建立组培快繁技术体系。结果表明:金心扶芳藤较适宜的初代诱导培养基为MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.05mg/L,芽的诱导率达96.0%;较适宜的增殖培养基为MS+BA 5.0 mg/L+IBA 0.08 mg/L+NAA 0.06 mg/L,芽的增殖系数达3.9;较适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L,苗木生根率达100%,平均根数7.8条,根长4.5 cm。     

紫薇新品种‘彩霞’

‘彩霞’是由紫薇自然杂交种子实生选育得到的新品种。小乔木,新叶紫红色,成熟叶灰绿色,小枝的翅波状,花芽圆锥形,花芽顶端突起明显,花为绛紫红色。     

紫薇优良品种‘晓明1号’组培快繁体系的建立

建立紫薇优良品种‘晓明1 号’组培快繁体系,为大规模繁殖提供技术。以带腋芽茎段为外植体,对组培快繁体系中的基本培养基、生长调节剂浓度、组培苗移栽进行了研究,建立组培快繁体系。结果表明：带腋芽茎段接种在DKW+ BA 1.0 mg/L+ NAA 0.05 mg/L+ PVP 300 mg/L的初代培养基上,腋芽萌发率95.56%,植株生长健壮;‘晓明1 号’紫薇增殖培养及生根培养最佳配方为DKW+ BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L和1/2DKW+ NAA 0.1 mg/L+ AC 300 mg/L,增殖系数达到5.08,生根率达到100%,平均根条数6.2 条,平均根长4.12 cm;用泥炭土:珍珠岩为2?1 或3?1 作为基质,以营养钵作为容器,组培苗移栽成活率达到95.33%以上,组培苗叶色鲜艳,长势良好。该研究获得了适合‘晓明1 号’紫薇的组培方法,为品种的大规模繁殖和大面积推广提供了参考。     

美国红叶紫薇扦插技术研究

以红叶紫薇当年生枝条为试验材料,开展了扦插基质、插穗木质化程度、植物生长调节剂种类及其浓度对红叶紫薇扦插生根的影响试验。结果表明:红叶紫薇扦插较适宜的基质为泥炭土∶珍珠岩=1∶1,其扦插成活率为97%;插穗以半木质化程度较好,扦插成活率达99%;插穗基部采用NAA、IBA、IAA、ABT6、KIBA处理,均是速沾比浸泡效果好;采用KIBA速沾处理较适宜的浓度范围是1 000～2 000 mg/L,其扦插成活率可达95%以上。     

金银花ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以金银花叶片基因组DNA为模板,通过单因素试验,研究了退火温度、Taq DNA 聚合酶的用量及模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度等6种因素对ISSR－PCR扩增的影响,建立了适合于金银花ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即在20 μL反应体系中,内含1×PCR反应缓冲液（Mg2＋free）、1.5 U Taq DNA 聚合酶、0.15 mmol·L-1 dNTPs、0.4 μmol·L-1引物、1.5 mmol·L-1 MgCl2、60 ng模板DNA。确定了适宜的退火温度为49.9 ℃。扩增程序为94 ℃预变性5 min ;35个循环为94 ℃变性30 s,49.9 ℃退火30 s,72 ℃延伸1.5 min;最后72 ℃延伸7 min,4 ℃保存。利用优化反应体系,从100条ISSR引物中筛选出10条稳定性和重复性高的引物;以这10条引物对22个金银花品种基因组DNA扩增,共扩增出108条带,其中多态性条带96条,多态性条带比率为88.9%。金银花ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行金银花品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础。     

灰毡毛忍冬新品种组培苗以苗繁苗技术研究

以灰毡毛忍冬新品种‘金翠蕾’组培苗为试验材料,开展了不同的扦插基质、扦插时期、植物生长调节剂、ABT6浓度及浸泡时间对灰毡毛忍冬新品种组培苗以苗繁苗的影响试验,研究结果表明,扦插基质以泥炭土 珍珠岩(体积比1∶3)为宜,成活率、生根数和根长分别为94.85%、8.25条和4.46cm;适宜的扦插时期是5月和9月,扦插成活率达95%以上。用植物生长调节剂浸泡插穗基部,以ABT6和KIBA为宜,但ABT6的成活率最高,达92.5%。ABT6不同的浸泡浓度和浸泡时间试验结果表明,以300 mg.L-1的浓度浸泡插穗120min的处理效果最佳,成活率95%以上。