低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体对大鼠低温心脏缺血再灌注时心室肌电传导的影响

目的评价低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体对大鼠低温心脏缺血再灌注时心室肌电传导的影响。方法 SPF级SD乳鼠, 1～2日龄, 雌雄不拘, 差速贴壁法提取原代心肌成纤维细胞。传代至2～4代, 待细胞密度达60%～70%, 将其转移至4 ℃、95%N2+5%CO2条件下培养1 h, 继续于37 ℃、95%空气+5%CO2条件下培养24～48 h, 随后提取外泌体。SPF级雄性SD大鼠24只, 2～3月龄, 体质量280～360 g, 根据随机数字表法分为3组(n=8):对照组(C组)、低温缺血再灌注组(IR组)和外泌体+低温缺血再灌注组(Exo-IR组)。于平衡灌注前48 h时, Exo-IR组尾静脉无菌注射低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体1.5 ml (200 μg), C组和IR组尾静脉注射PBS各1.5 ml。C组平衡灌注110 min;IR组和Exo-IR组平衡灌注20 min, 停灌60 min后再灌注30 min。分别于平衡灌注20 min、再灌注15和30 min时应用微电极阵列标测技术获取左心室心肌传导速度(CV)、传导绝对不均一性(P5-95)和不...     

低温缺氧/复氧后大鼠心肌成纤维细胞对心肌H9c2细胞间通讯的影响

目的 观察低温缺氧/复氧（hypothermia hypoxia/reoxygen,H/R）后大鼠心肌成纤维细胞（rat cardiac fibroblasts,RCFs）对心肌H9c2细胞间通讯的影响并探讨其可能机制。方法 将RCFs细胞与H9c2细胞以2:1数量比Transwell共培养后随机分为6组。其中T+AngⅡ组及H/R-T+AngⅡ组加入1.5 nmol/L AngⅡ,T+ARB组及H/R-T+ARB组加入1 nmol/L缬沙坦。T组、T+AngⅡ组及T+ARB组进行正常培养,H/R-T组、H/R-T+AngⅡ及H/R-T+ARB组进行H/R处理。检测各组培养液中AngⅡ含量;H9c2细胞Cx43、ERK1/2表达量及磷酸化及细胞间通讯情况。结果 与T组相比,H/R-T组及T+AngⅡ组H9c2细胞ERK1/2、Cx43表达及磷酸化水平降低（P <0.05）,细胞间通讯减弱（P <0.05）;T+ARB组H9c2细胞ERK1/2、Cx43表达及磷酸化水平增高（P <0.05）,细胞间通讯增强（P <0.05）。与H/R-T组相比,H/R-T+Ang...