CXCR4在多发性骨髓瘤中对卡菲佐米疗效及预后的影响

目的:探讨CXCR4对卡菲佐米(CFZ)治疗多发性骨髓瘤(MM)患者的效果及预后的影响。方法:下载在线数据库Gene Expression Omnibus(GEO)中含两种耐CFZ的MM细胞株(KMS11/CFZ及KMS34/CFZ)以及相对应的亲本株KMS11和KMS34基因表达谱数据的数据集GSE69078。分析差异表达基因(DEGs)并构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,获得CFZ耐药关键基因。最终,以MMRF-CoMMpass研究数据作为验证数据集探讨CFZ耐药关键基因的临床意义。结果:共鉴定出44个上调DEGs和46个下调DEGs,通过PPI网络分析筛选出前10位关键基因(CCND1、CXCR4、HGF、PECAM1、ID1、HEY1、TCF4、HIST1H4J、HIST1H2BD及HIST1H2BH)。MMRF-CoMMpass数据显示,C-X-C基序趋化因子受体4(CXCR4)高表达与较高的复发/进展率相关,且CXCR4高表达患者的总生存(OS)率显著降低(P=0.013)。结论:CXCR4高表达可能与MM患者CFZ获得性耐药相关,有助于在治疗前筛选潜在的CFZ敏感患者,并...     

急性淋巴细胞白血病耐药细胞株的建立及耐药机制的研究

目的:构建耐阿霉素的急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株,并探讨其耐药机制。方法:采用阿霉素(ADR)小剂量浓度递增间歇诱导SUP-B15(Ph~+)和RS4;11(Ph~-)细胞,建立SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR耐药细胞株;应用CCK-8法检测细胞的活力与增殖;Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;RT-PCR检测MDR1基因的表达。结果:成功构建ALL耐药细胞株SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR,耐药指数分别为14.088±0.763和10.473±1.024。冻存的SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR细胞复苏后,细胞存活率分别为88.4±1.2%和89.3±1.6%,耐药指数分别为13.976±0.967和10.342±0.846,与冻存前相比差异无统计学意义(P﹥0.05)。撤药培养1个月,2株细胞的耐药指数明显降低,分别为12.893±1.255和9.327±0.321(P﹤0.05)。SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR细胞对阿糖胞苷的耐药指数分别为3.459±0.451和3.992±0.795,对依托泊苷的耐药指数分别为3.564±0.365和3.654±0.251。MDR1和P-gp在耐药细胞中的表达较亲本细胞增高。结论:小剂量浓度递增间歇诱导法可成功诱导出ALL耐阿霉素细胞株,其耐药机制是上调MDR1与P-gp的表达。     

Btk及NFκB在急性髓系白血病细胞中的表达及其意义

摘要本研究检测Btk及NFκB在急性髓系白血病（AML）患者白血病细胞中的表达,评价其在AML发生、发展中的作用。选取14例AML初诊及治疗达完全缓解患者的骨髓单个核细胞标本,检测Btk、NFκB在mRNA及蛋白质水平的表达。结果表明：在mRNA及蛋白质水平,AML患者细胞中均有Btk、NFκB的表达。Btk、NFκB蛋白在初发AML患者白血病细胞中表达高,达完全缓解后,其表达下降或检测不到（P〈0．05）。结论：Btk、NFκB在AML的发生、发展中可能起重要作用,它们有可能作为AML的潜在治疗靶点及用于预后预测。     

PCI-32765和Bortezomib对B细胞肿瘤细胞系细胞增殖、凋亡的影响及其机制的研究

本研究旨在探讨Btk抑制剂PCI-32765和蛋白酶体抑制剂bortezomib对Raji、Ramos细胞的增殖、凋亡的影响及其作用机制.PCI-32765和bortezomib单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞后,分别运用CCK-8法及流式细胞术检测细胞的增殖与凋亡,Western blot法检测Btk、NFκB、c-IAP1、Bcl-xL、caspase-3等蛋白的表达.结果表明：①PCI-32765（0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μmol/L）和bortezomib（10、20、30、40、50、60、80 nmol/L）处理Raji和Ramos细胞48 h,均可抑制细胞增殖,抑制率呈剂量依赖性,且两药具有协同作用;②PCI-32765（2.0μmol/L）、bortezomib（20 nmol/L）单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞不同时间（8、12、24、36、48、72 h）,均可抑制细胞存活率,抑制率呈时间依赖性,且两药具有协同作用;③PCI-32765（2μmol/L）和bortezomib（20 nmol/L）单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞48 h,可明显促进Raji及Ramos细胞的凋亡.Raji细胞实验结果,空白对照组、PCI-32765和bonezomib单药组、联合用药组的细胞凋亡率分别为10.34±0.53％、24.26±0.91％、43.66±1.08％与74.06±0.72％,各组间有统计学差异（P＜0.05）;Ramos细胞实验结果,空白对照组、PCI-32765和bortezomib单药组、联合用药组的细胞凋亡率分别为15.16±1.49％、71.36±0.82％、75.32±2.36％与84.30±0.91％,各组间有统计学差异（P＜0.05）;④PCI-32765和bonezomib单药处理Raji、Ramos细胞后,细胞内Btk、NFκB、Bcl-xl及c-.IAP1的表达水平较对照组降低,Caspase-3的表达水平升高,两药联用后,作用增强.结论：PCI-32765和bonezomib可以协同抑制Raji与Ramos细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与抑制Btk、NFκB的活性,下调Bcl-xl及c-IAP1等抗凋亡蛋白,同时上调Caspase-3等凋亡蛋白的表达而发挥作用.     

地西他滨联合非血缘脐血移植治疗缓解后老年急性髓系白血病的疗效和安全性

目的:对比老年急性髓系白血病(EAML)经诱导治疗达到完全缓解后,用地西他滨联合非血缘脐血移植和传统方案巩固治疗的安全性和疗效。方法:回顾性分析2019年1月至2022年1月至盐城市第一人民医院和淮安市第一人民医院血液科就诊的经1-2周期诱导治疗获得完全缓解(CR)的老年AML患者52例,根据巩固治疗方案的不同分为观察组(24例)和对照组(28例),其中观察组接受地西他滨联合非血缘脐血移植巩固治疗,对照组接受传统巩固治疗,包括阿扎胞苷+维奈克拉、去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷(IA)、阿柔比星+阿糖胞苷+粒细胞集落刺激因子(CAG)等。对比两组患者的临床疗效、造血恢复时间、不良反应、无复发生存期(RFS)、总生存期(OS)。结果:观察组中性粒细胞中位恢复时间12.54 d,对照组18.64 d,两组比较差异有统计学意义(P＜0．001);观察组血小板中位恢复时间12.67 d,对照组19.71 d,两组比较差异有统计学意义(P＜0.001)。观察组III-IV级骨髓抑制的发生率为95.83%,对照组为78.57%,差异无统计学意义(P＞0.05);两组非血液学毒性发生率分别为41.67%和42.86%,差异无统计学意义(P＞0.05)。观察组和对照组中位RFS分别为33和11个月,中位OS分别为36和24个月,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论:相较于传统巩固治疗方案,地西他滨联合非血缘脐血移植巩固治疗是老年AML患者诱导缓解后的有效治疗方案,可延长无复发生存时间(RFS),提高总生存率(OS)。     

CLAE强烈化疗序贯异基因造血干细胞移植治疗复发难治急性白血病的疗效观察

目的：观察CLAE强烈化疗方案序贯异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗复发难治急性白血病(relapsed/refractory acute leukemia, R/R AL)的疗效与安全性。方法：采用CLAE方案[克拉屈滨5 mg/(m²·d),d 1-5;阿糖胞苷1.5 g/(m²·d),d 1-5;依托泊苷100 mg/(m²·d),d 3-5]序贯allo-HSCT治疗3例R/R AL患者。3例患者在复发难治状态接受CLAE化疗后行骨髓穿刺判断骨髓增生程度,间歇3-5 d后,序贯allo-HSCT预处理方案[氟达拉滨30mg/(m²·d),d-7至d-3;白消安注射液0.8 mg/kg q6h,d-6至d-3或d-5至d-2。若骨髓增生低下,原始细胞小于10%,应用3 d白消安注射液;若骨髓增生活跃,原始细胞大于10%,应用4 d白消安注射液],采用环孢素、麦考酚吗乙酯、短程甲氨蝶呤预防GVHD。3例患者移植后规律监测微小残留病与骨髓嵌合状态,并于移植后3个月应用去甲基化药物或达沙...     

流式细胞术检测急性髓细胞白血病微小残留病的临床价值

目的探讨流式细胞术检测急性髓细胞白血病微小残留病的临床价值。方法采用FCM检测66例初治AML患者诱导化疗前后各亚型髓系抗原阳性表达情况。结果初诊时66例AML患者髓系抗原阳性总表达率为(19.98±11.98)%,M2亚型和髓系抗原MPO阳性表达率最高;诱导化疗结束时46例缓解、20例未缓解。髓系抗原缓解组阳性总表达率为(10.50±10.49)%,未缓解组阳性总表达率为(16.80±17.39)%,2组MPO阳性表达率最高。缓解组与未缓解组患者髓系抗原总阳性表达率均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);缓解组患者髓系抗原总阳性表达率显著低于未缓解组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论应用9种髓系抗体检测AML患者MRD临床效果满意,能够为指导化疗方案调整和疗效评价提供可靠依据。     

miRNA-125b靶向p16促进套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭的机制探讨

目的:探讨miRNA-125b抑制靶基因p16对套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:选择人源套细胞淋巴瘤细胞系JeKo-1作为实验对象。实验共分为五组:空白对照组（不转染）、miRNA-125b阴性对照组（转染miRNA-125b inhibitor-NC）、miRNA-125b抑制剂组（转染miRNA-125b inhibitor）、p16 siRNA阴性对照组（转染p16 siRNA-NC）、p16 siRNA组（转染p16 siRNA）。于转染后48 h收集细胞。采用RT-PCR法检测各组JeKo-1细胞miRNA-125b的表达水平;采用双荧光素酶靶标实验验证miRNA-125b与p16基因的靶向关系;采用Western Blot和RT-PCR法检测各组细胞p16基因的表达水平;采用MTS法检测各组细胞增殖水平;采用流式细胞术检测各组细胞周期分布;采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力。结果:与空白对照组、miRNA-125b inhibitor-NC组相比,miRNA-125b inhibitor组 miRNA-125b表达水平显著降低,而p16表达水平显著升高,细胞增殖受到抑制、JeKo-1细胞穿膜细胞数显著减少,细胞G0/G1期比例显著增加,而S期比例逐渐减少（P＜0.05）;与p16 siRNA-NC组相比,p16 siRNA组p16表达水平明显被抑制,细胞增殖能力及细胞侵袭能力均显著升高,细胞G0/G1期比例显著降低,而S期、G2/M期比例升高,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-125b与p16基因3' UTR端存在互补结合位点,miRNA-125b和p16能够靶向结合,p16基因是miRNA-125b的靶基因。结论:miRNA-125b能够通过抑制靶基因p16促进套细胞淋巴瘤细胞的增殖和侵袭能力,可通过抑制miRNA-125b,促进p16基因的表达,使套细胞淋巴瘤细胞阻滞于G0/G1期,抑制其增殖转化。     

低氧诱导因子-1α在血液系统恶性肿瘤中的研究进展

低氧诱导因子1-α(Hypoxia inducible factor,HIF-1α)为低氧环境下诱导产生的转录因子,调控低氧相关基因转录,是细胞特别是肿瘤细胞适应低氧环境生存的重要转录因子.HIF-1α在乳腺癌、肝癌等实体肿瘤中研究较多,HIF-1α表达水平增高与肿瘤的血管生成、转移、化疗耐药相关.近年来研究发现HIF...