基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157∶H7和霍乱弧菌O139

目的:建立一种同时快速检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片,并验证该芯片的特异性和敏感性。方法:选择EHEC O157∶H7的产志贺样毒素基因stx1、stx2和β-葡糖醛酸糖苷酶基因(u idA);霍乱弧菌O139的肠毒素A亚单位(ctxA)、毒力协调菌毛A亚单位(tcpA)、糖基转移酶(glycosotransferaseLPSgt)基因序列分别设计引物和探针,反向引物用荧光素Cy3标记,探针在3′端氨基修饰。在优化的PCR和杂交反应条件下,分别进行三重PCR扩增,产物混合后与芯片进行杂交,产生特异性荧光信号,进一步筛选探针。随后将筛选出的探针制备芯片用于检测临床样本。结果:PCR产物在相应探针处均产生特异性杂交信号,临床样本检测结果表明,此芯片比常规细菌学检测方法灵敏。结论:所研制的同时定性检测EHEC O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片是特异、灵敏而且快速的,为这两种肠道致病菌感染的快速诊断提供了新的方法。     

乳腺癌术后化疗期间静脉系统的保护

我科2001年1月～2006年6月共有216例乳腺癌术后患者进行了6个疗程的化疗,静脉炎的发生率是6%;有一例发生周围组织坏死,经处理后表皮留有一硬结,现将护理体会总结如下.     

经皮氧饱和度在动脉危象监测中的应用与研究

目的探讨经皮氧饱和度监测仪应用于四肢动脉手术后监测动脉危象的可行性。方法在确认正常健康人左右肢体氧饱和度无显著性差异的前提下,对76例四肢动脉手术患者,于术后作健、患肢氧饱和度监测。以SPO2值、脉搏波形为效应指标,研究动脉危象患者健、患侧肢体的SPO2、脉搏波形及其临床意义。结果76例中20例发生动脉危象,发生率26.31%。危象组健、患侧氧饱和度比较,t=8.8411,P<0.05;非危象组比较,t=1.1122,P>0.05。结论经皮氧饱和度监测能发现血管危象早期迹象,具有操作简便、数据客观、无创伤等优点。     

社区静脉输液安全隐患分析及管理对策

分析社区卫生服务站静脉输液的安全隐患,提出管理对策。社区静脉输液存在药物配置环境不符合要求、违反无菌操作原则、未严格执行查对和巡视制度、制度不健全及监管欠到位、护理人员的输液相关知识不足等安全隐患。主要管理对策为加强治疗室及输液室的管理,健全制度和质量监控体系建设,重视对护理人员的素质培养,严格输液过程管理,加强药物安全管理,以提高输液质量,保障患者安全。     

三腔单囊管在门静脉高压上消化道大出血病人中的应用

[目的]观察三腔单囊管在门静脉高压致上消化道大出血病人中的应用效果.[方法]将38例采用三腔单囊管止血的病人设为实验组,将38例采用三腔二囊管止血的病人设为对照组,比较两组止血效果、肺部感染、痛苦程度、拔管后早期再出血的发生情况.[结果]两组止血效果相近,实验组肺部感染、痛苦程度、拔管后早期再出血发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).[结论]三腔单囊管应用于肝硬化门静脉高压致上消化道大出血病人,能有效压迫止血,降低肺部感染、拔管后早期再出血的发生率,病人痛苦减轻.     

一种快速定量检测炭疽杆菌方法的建立

目的：建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法：根据复合探针荧光定量分析原理，以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列，设计合成引物和探针，对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应（PCR）检测，并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响。结果：本法最适条件：荧光探针浓度300mmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1／2，镁离子浓度为3mmol/L，淬灭探针长15个核苷酸，该法检测炭疽杆菌的灵敏度达10^3拷贝，能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。结论：复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析，可为临床诊断提供帮助。     

脊髓损伤神经源性膀胱患者间歇导尿的研究进展

神经源性膀胱是脊髓损伤常见的并发症,间歇导尿是国际尿控协会推荐协助神经源性膀胱患者排空膀胱最安全的首选措施。笔者从导尿方式,导尿频次方法、尿管选择、预防处理尿路感染、管理依从性等方面进行综述,以期促进间歇导尿在脊髓损伤神经源性膀胱患者中普及化,提高患者生活质量,帮助患者更好地回归家庭和社会。     

脑卒中患者家庭康复教育的探讨

绝大多数脑卒中患者离开医疗机构后，都遗留有不同程度的肢体运动功能障碍，使基本的生活自理能力明显下降，给患者、家庭以及社会造成了很大的负担。有鉴于此，我们举办了为期3个月的社区家庭康复教育活动，旨在提高患者的日常生活自理能力，收效良好。     

实时荧光PCR法检测DPYD*9等位基因的单核苷酸突变

目的:建立一种简便、特异的对二氢嘧啶脱氢酶基因DPYD*9进行等位基因分型的方法。方法:以DPYD基因为靶合成含突变位点的野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R,用DNA荧光嵌入染料SYBRG reenⅠ进行荧光PCR扩增,对产物进行溶解曲线分析以确定基因型;同时优化了引物浓度,分析其灵敏度并与普通PCR进行了比较,对20份PCR产物进行了验证。结果与结论:以野生型基因组为模板时,WF和R组合有荧光响应,而TF和R组合无荧光响应;当以突变型基因组为模板时,TF和R组合有荧光响应,而WF和R组合无荧光响应。两者Ct值均为24,Tm值均为83oC。优化引物浓度为0.25μmol/L,荧光PCR可分出10个模板拷贝数的基因型,而普通PCR只能区分模板为8.0×102拷贝数的基因型。PCR产物测序证实荧光PCR法与直接测序结果一致。该方法能准确快速地区分DPYD*9的基因型,敏感性和特异性强。     

SARS冠状病毒CT基因型发现及相关特征

目的 研究SAPS冠状病毒基因型及相关特征。方法 对杭州市首例SAPS病人分离的SAPS冠状病毒ZJ01株进行全基因组测序，并在GenBank数据库登录。记录号：AY297028，版本号：gi：30910859。整个全基因组由29715bp组成。使用GeaBank数据库中最新登陆的SARS病毒的基因组进行序列比对、突变点分析和多态性分析、特殊片段的系统进化分析。结果 发现在ZJ0l株的9391、17555、21712、22213和27819位点，分别是T、T、G、T和T核苷酸碱基，和CenBank数据库中的其他SARS冠状病毒株比较，除第l、2、4和5突变位点(C：G：C：C／T1 T1 T2 T)之外，发现在21712位点(第3个)A／G突变也参于这一遗传标识。因此我们提出5个突位点将17株病毒分为两种基因型的新概念，即C：G：A：C：C与T：T：G：T：T两型，简称C型和T型。ZJ01病毒株属于T基因型．在中国大陆内地是首次发现和发表。突起蛋白基因片断的进化树分析，广州的GZ01 C基因型株进化距离和其他病毒株相差甚远；比较而言，和C基因型BJ0l、CUHK-Wl病毒株较为接近，其次是T基因型的Fl和F2组。5个突变位点(C：G：A：C：C／T：T：G：T：T)的两个发生在编码突起蛋白(S)的基因中，分别是A／G和C／T突变，由此引起的突起蛋白(S)氨基酸变化是Asp／Gly(天门冬氨酸／甘氨酸)和Thr／Ile(苏氨酸／异亮氨酸)。结论 这些基因型特征和变异是否会引起生物学及临床症状的差异是非常值得重视的。