环丙沙星与氧氟沙星联用抗结核药物肝毒性比较

目的　研究环丙沙星或氧氟沙星联用抗结核药的肝毒性并探讨其机制。方法　分别测定异烟肼和利福平联合用药 (IR)组及其分别联用氧氟沙星 (IRO)或环丙沙星 (IRC)组小鼠的血清谷氨酸氨基转移酶 (ALT)、肝指数、肝匀浆丙二醛 (MDA)含量、肝微粒体细胞色素P45 0和线粒体Ca2 ATP酶活性 ,及肝病理检查 ,结果与对照组以及实验组之间进行比较。结果　与正常对照组比较 ,IR组及IRO组的血清ALT、肝细胞匀浆MDA明显增高 (P <0 .0 5 ) ,而IRC组变化不大 (P >0 .0 5 ) ;同时发现IR组和IRO组的肝微粒体细胞色素P45 0含量较高和线粒体Ca2 ATP酶活性较低 ,而IRC组则相反 ;病理检查IRO和IRC组肝细胞坏死程度稍轻但与IR组比较无明显差异。结论　氧氟沙星、环丙沙星不增加异烟肼和利福平联用肝毒性 ,且环丙沙星有一定的拮抗作用。     

用DNA microarray快速检测淋球菌耐喹诺酮类药物基因突变

研究DNA microarray的制备及其检测淋球菌耐喹诺酮类药物基因突变的准确性。方法根据淋球菌药敏及测序结果分别对淋球菌gyrA和parC基因的序列设计特异引物和探针并制作DNA microarray。对淋球菌临床拭子进行PcR扩增并荧光标记包含gyrA和parC基因的目的DNA片段，与芯片杂交，同时以测序法进行双盲淋球菌耐喹诺酮类药物基因突变的检测。结果87份泌尿生殖道试子全部可用DNA microarray检测出来，芯片检测结果与药敏结果符合率为100％，与测序结果符合率为97．7％。结论用DNA microarray来检测淋球菌gyrA和parC基因突变快速、特异性高和灵敏度高，可以应用于临床耐药性检测。     

植物多糖对家兔动脉粥样硬化脂质过氧化及炎症反应的干预

目的:探讨枸杞多糖、黄芪多糖对家兔动脉粥样硬化(As)脂质过氧化及炎症反应的干预机制。方法:将48只雄性新西兰大白兔随机分为4组:正常组(12只),As模型组(12只),枸杞多糖(LBP)治疗组和黄芪多糖(APS)治疗组。10周后,测定各组空腹甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCh)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP)、内皮素-1(ET-1)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并计算HDL-C/TCh,同时计算主动脉内膜粥样斑块面积。结果:模型组与正常组比较,TG、TCh、ET-1、NO、CRP、MDA明显升高(P<0.01),HDL-C/TCh、SOD活性明显下降(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积较大;而LBP和APS治疗组与模型组比较,TG、ET-1、NO、CRP明显下降(P<0.01),HDL-C/TCh和SOD活性明显升高(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积明显减少(P<0.01)。结论:枸杞多糖和黄芪多糖对动脉粥样硬化有明显的预防和治疗作用,机制可能与降低血脂、抗氧化、调节免疫等功能有关。     

集成毛细管电泳芯片分离尿蛋白条件的初步优化

目的:探讨集成毛细管电泳芯片快速分离尿蛋白条件的初步优化。方法:考察了分离电压(1200～2000V)、进样时间(10～30s)及乙胺浓度(0.5～2%(v/v))对尿蛋白分离的影响。结果:以75mmol/L pH10.3硼酸盐缓冲液含9.73μmol/L乳酸钙、1%(v/v)乙胺为电泳缓冲液,在以500V的进样电压进样15s、分离电压1500V条件下,电泳分离尿蛋白能分出更多蛋白峰。结论:通过优化可以有效地提高电泳芯片分离尿蛋白的效果。     

基于纳米金探针和蛋白芯片高灵敏检测肺癌CEA和CYFRA21-1标志物

目的 构建基于纳米金探针和蛋白芯片的快速、多肿瘤标志物高灵敏检测体系.方法 将待检测的肿瘤标志物捕获抗体(捕获待测抗原)结合在醛基化修饰的玻片上;用检测抗体制备纳米金探针;经过免疫反应形成三明治夹心结构(蛋白芯片-目标蛋白-纳米金探针).利用纳米金沉积的方法进行染色,通过肉眼或显微镜观察显色结果.结果 该蛋白检测体系在1h内可检测两种肿瘤标志物,其中CEA可检测到最低浓度为45 pg/mL,CYFRA21-1可检测到90 pg/mL,与传统的酶联免疫吸附法(ELISA)相比,检测灵敏度大大提高.并利用此体系,检测肺癌患者及正常人血清,结果与临床所用电化学分析方法一致.结论 该检测体系操作简单、方便、快速,同时具有高灵敏度、多指标联合检测等优点,在临床蛋白检测中具有重要的价值和应用前景.     

DNA芯片快速检测急症感染细菌

细菌性感染对重症监护中心(ICU)的患者常造成较高的死亡率和致残率。早期诊断和治疗具有重要意义，本研究利用DNA芯片技术，研制出可用于常见细菌感染的DNA检测芯片，能够一次性检测出标本中的多种细菌感染，它具有检测时间短(4～6h)、灵敏度高、特异性强并可重复使用的特点。     

细菌感染患者早期病原学分子诊断技术

目的 建立细菌感染患者早期病原及耐药性分子诊断技术，以便尽早实施有效的抗感染治疗方案，改善患者预后。方法 扩增细菌23S rRNA基因序列，同时扩增多种耐药基因，设计探针，通过基因芯片杂交技术识别其差异序列，鉴别细菌，检测耐药基因，用于病原早期诊断和耐药谱测定；收集血培养标本223份，脑脊液、胸水、腹水标本339份，尿液标本514份，比较所建立方法与传统方法的一致性，验证所建立技术的可靠性。结果 基因诊断方法可正确检出常见病原菌，并检测其是否携带mecA、SHV、CTX-M-1组和CTX-M-2组耐药基因。检测血、尿及脑脊液等无菌体液标本时，所建立的快速检测方法与常规方法的符合率分别为96．4％、99．8％和99．7％，总体符合率为99．1％，耐药性检测与传统药物敏感结果的符合率为95．7％，其准确性与常规方法相当，检测时间比常规方法平均减少（2．09±1．15）d。结论 多重PCR-基因芯片杂交技术可用于耐药菌感染的病原早期诊断和耐药感染的同步检测，应用于临床可望改善患者的预后。     

齐墩果酸诱导人肝癌Bel-7402细胞G2/M期阻滞及凋亡的机制研究

该研究旨在探讨齐墩果酸在诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡过程中,细胞周期分布的变化及其相关的分子机制。采用MTT法、台盼蓝拒染试验检测齐墩果酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;PI单染检测细胞周期;Annexin V-FITC双染法观察细胞凋亡;Western blot法检测周期调控蛋白以及凋亡相关蛋白表达的变化。结果显示齐墩果酸能显著抑制Bel-7402肝癌细胞株增殖,G₂/M期的细胞比例显著升高,而G₁期细胞明显减少,明显增加细胞凋亡率;同时下调细胞周期蛋白cyclin B1,使蛋白磷酸酶Cdc25C(Ser216)磷酸化而失去活性、引起Cdk1(Tyr15)以及蛋白激酶Chk1的磷酸化水平升高。OA也可上调p21水平导致细胞周期阻滞在G₂/M期;此外Bcl-2表达减少,Bax,Cyt c表达增加,cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-3蛋白表达增加。以上结果提示齐墩果酸能明显抑制肝癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,可能是通过激活凋亡线粒体信号通路而实现的。     

利用基因芯片快速检测多种临床常见致病菌及其耐药性基因

目的快速、准确、灵敏地检测临床常见的致病菌及其耐药基因。方法采用基因芯片技术，利用细菌23S rRNA基因序列信息和某些耐药基因作为检测靶基因，设计针对不同菌属的寡核苷酸探针和耐药基因探针的基因芯片，聚合酶链反应（PCR）扩增并荧光标记目的DNA片段，通过杂交反应检测致病菌及其耐药基因。结果在理想状态下（检测试剂盒抽提的细菌基因组DNA）检测的结果与国内外文献报道的灵敏度相当（10^3～10^6细菌／ml），并在部分临床分离株、耐药标准菌株中进行验证，显示该方法有良好的特异性及可重复性。细菌种类能鉴别到种水平的有16种，能鉴别到属水平的有7类。覆盖了临床常见的多种病原菌，并且还可同期检测超广谱β内酰胺酶（ESBLs）基因耐药。结论DNA芯片检测具有快速、高特异性和高灵敏度的特点，是常规鉴定方法的一种有益补充。