体外培养破骨细胞功能的定量评定

目的 建立适用于体外药理学研究的破骨细胞骨吸收功能的定量评定方法。方法 机械分离法获得破骨细胞,接种于象牙薄片底物上,分别于培养１ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ取出象牙薄片各４张,采用光镜和扫描电镜观察骨陷窝数量的变化;对随机拍摄的陷窝照片进行计算机形态计量分析,测算陷窝的面积和浓度。结果 骨吸收陷窝计数光镜法和扫描电镜法具有良好的相关性,ｒ＝０．９９９８,Ｐ〈０．００１。随着培养时间的延长,陷窝数量逐渐增     

密骨胶囊延缓原发性骨质疏松症骨量丢失的Ⅲ期临床试验

目的确证密骨胶囊维持或升高原发性骨质疏松症骨矿密度的临床有效性。方法采用随机、阳性药物平行对照、双盲单模拟、多中心的试验设计方法,将480例原发性骨质疏松症（肝肾亏虚）患者随机分为试验组（360例）和对照组（120例）;试验组口服密骨胶囊,对照组口服仙灵骨葆胶囊及模拟剂。两组疗程均为6个月,分别观察L2-L4、股骨颈、大粗隆和Ward三角部位骨矿密度值的变化情况。结果试验组维持或升高骨矿密度的总有效率为95.49%,对照组为95.80%,组间差异无统计学意义（P〉0.05）。试验组治疗后股骨颈和Ward三角部位骨矿密度值显著升高,与基线水平比较差异有统计学意义（P〈0.05）;L2-L4和大粗隆部位治疗前后无明显变化;对照组治疗后Ward三角部位骨矿密度值显著升高,与基线水平比较差异有统计学意义（P〈0.05）,其他3个部位骨矿密度值变化均无统计学意义（P〉0.05）。组间治疗后比较,各部位骨矿密度值差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论密骨胶囊可通过维持腰椎骨矿密度、升高髋部骨矿密度,有效治疗原发性骨质疏松症。     

补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响

目的:研究补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响。方法:以12月龄自然衰老雄性大鼠60只为模型,随机分为两组,每组30只。自鼠龄12月龄始,分别给予生理盐水、补肾方(密骨胶囊)灌胃,在给药8、16、24w末三个时间点,各时间点每组各取10只大鼠,取股骨骨髓,Trizol法抽提总RNA,RT-PCR技术半定量检测Smad1基因表达,采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果:补肾方组大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达明显优于生理盐水组。在8、16、24w末,补肾方组与生理盐水组的基因表达灰度值分别为0.61(95% CI=0.41,0.83)VS0.76(95% CI=0.56,0.98)、0.97(95% CI=0.81,1.13)VS0.61(95% CI=0.45,0.78)、1.75(95% CI=1.59,1.92)VS0.56(95% CI=0.40,0.73)。两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾中药(密骨胶囊)可以上调骨髓微环境中Smad1基因表达水平,可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

浅谈“以气为主、以血为先”在伤科临床中的应用

上海石氏伤科肇始于清末石兰亭先生,19世纪70年代由江苏无锡迁至上海;其子晓山先生以理伤续断声誉日盛,至筱山、幼山先生昆仲则名震沪上,誉及江南。石氏伤科传人石印玉教授执诊于上海中医药大学附属曙光医院,带领学术团队,全面继承石氏伤科经验,并结合当代中医骨伤科学之特点,形成了系列石氏伤科学术理论。石氏伤科精于内治,“以气为主、以血为先”是石氏伤科重要的学术思想,学者同道也对此多有阐发。笔者有幸跟师学习,感悟良多,此结合l临床体会,对“以气为主、以血为先”的具体运用作一浅谈。     

软骨利胶囊对骨关节炎小鼠股四头肌收缩蛋RmRNA表达的影响

背景:骨关节炎的病理改变涉及多种关节构成组织,其中骨骼肌的地位日渐引起研究者关注.目的:通过观察骨关节炎C57小鼠骨骼肌收缩蛋白α-肌动蛋白与肌球蛋白重链基因表达状况,探讨柔肝中药软骨制剂利胶囊对收缩蛋白基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-09/2007-01在上海市中医药研究院骨伤科研究所完成.材料:选取7周龄清洁级C57小鼠18只,雌雄各半,体质量(20±5)g.软骨利胶囊(柔肝中药制剂),由上海中医药大学中药标准化中心提供.方法:18只C57小鼠按随机数字表随机分为正常组、模型组、软骨利组,每组6只.除正常组外,对小鼠进行运动负荷训练造模.软骨利组给予0.2 mL软骨利溶液(约含2 mg软骨利)灌胃5周,正常对照组和模型组给予0.2 mL生理盐水灌胃5周.主要观察指标:应用反转录-聚合酶链反应检测股四头肌肌α-actin、肌球蛋白重链4种亚型(Ⅰ,Ⅱa,Ⅱd/x,ITb)mRNh表达水平.结果:与空白组比较,模型组α-actin mRNA显著低表达(P<0.05),肌球蛋白重链Ⅱa,肌球蛋白重链Ⅱd/x mRNA低表达(P<0.05).与模型组比较,软骨利干预组α-actin与多种肌球蛋白重链亚型mRNA表达水平上调(P<0.05).结论:柔肝中药制剂软骨利能够促进骨骼肌收缩蛋白基因表达,提示其可改善骨关节炎动物骨骼肌肌力.     

补肾益精中药调控体外培养成骨细胞IGF-Ⅰ分泌与表达的研究

目的 观察补肾益精中药对体外培养成骨细胞类胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)分泌和表达的影响,探讨补肾益精中药调节骨重建的作用机理.方法 采用连续酶消化法培养大鼠颅盖骨成骨细胞,观察补肾益精药物血清对成骨细胞增殖率、碱性磷酸酶(ALP)、矿化结节数目以及成骨细胞不同分化时期IGF-Ⅰ分泌和mRNA表达的影响.结果 与对照组比较,补肾益精中药能明显增加成骨细胞增殖率,提高成骨细胞ALP分泌量,增加矿化结节数;中药组IGF-Ⅰ的分泌在第7d、第21d时与对照组比较无差异,但在第14d时IGF-Ⅰ的分泌量明显高于对照组,同时其成骨细胞IGF-Ⅰ mRNA表达下调.结论 补肾益精中药可能通过调控细胞因子IGF-Ⅰ的表达与分泌发挥促进骨形成的作用.     

基于双能X线吸收测量法的三种胫骨软骨下骨骨密度测量方法的信度与效度分析

目的 观察基于双能X线吸收测量法(DXA)的三种胫骨近端软骨下骨骨密度检测方法的信度与效度。方法 招募28名健康女性,利用双能X线骨密度仪扫描膝关节;由2名研究者分别应用三种不同测量方法选取ROI进行测量分析,通过计算组内相关系数值(ICC),评价各方法的复测信度与测量者间信度,利用t检验评价区分效度。结果 三种方法均具有较好的复测信度(ICC 0.833~0.998)与测量者间信度(ICC 0.905~0.997),且对低年龄者和高年龄者具有较好的区分效度(P<0.05)。结论 利用双能X线骨密度仪研究膝关节软骨下骨具有可行性;本研究分析的三种测量方法可有选择地用于临床研究。     

三维步态分析对下肢生物力学变化的重测信度研究

目的:观察健康人在步行过程中下肢运动学、动力学、地面反作用力以及表面肌电信号的重测信度。方法:采用VICON (NEXUS 1.8.5)三维步态分析系统及NORAXON无线表面肌电图测试13名健康人步行过程中下肢运动学、动力学、地面反作用力以及表面肌电信号的重测信度。采用组内相关系数(ICC)及测量标准误(SEM)比较两次测试结果的相对信度与绝对信度。结果:步行过程中步速、下肢运动学、动力学、地面反作用力以及表面肌电信号均具有良好的重测信度ICC 0.78～0.96,运动学参数测量标准误SEM%为4.18～15.6,动力学参数SEM%为3.31～21.82,地面反作用力SEM%为1.70～16.67,表面肌电信号SEM%为8.00～11.11。结论:三维步态分析系统结合表面肌电图可用于评估步行时下肢运动学、动力学、地面反作用力以及表面肌电信号,且具有良好的重测信度。     

早期激素性股骨头缺血坏死病理及超微结构

目的：探讨激素性股骨头缺血坏死的病理发展过程及超微结构的变化。方法：6月龄新西兰大白兔臀肌注射醋酸氢化泼尼松6周时模型成功,作HE染色观察骨髓、骨小梁、软骨的变化及透射电镜观察骨、软骨组织的变化。结果：激素性股骨头坏死最早变化出现在骨髓,然后为骨小梁、软骨;电镜示骨细胞、软骨细胞内有大量的脂肪滴堆积。结论：脂肪代谢的失调是激素性股骨头缺血坏死的主要原因,其变化涉及骨髓、骨小梁及软骨。     

补肾复方含药血清对骨吸收陷窝影响的时效关系研究

目的探讨补肾复方用于破骨细胞药效观察的含药血清制备条件之一(时效关系)。方法取体重270±20g的SD大鼠,雌雄各半,每组10只,同等条件下制备补肾复方含药血清和对照血清,分别观察不同采血时间、不同喂药时间的含药血清对骨吸收陷窝数量的影响。结果末次灌胃后1h采血组的骨吸收陷窝数明显少于其它各组(P＜0.05);灌胃1d和3d、7d组比较其含药血清的药效无差异,而与对照血清差异显著。结论补肾复方含药血清对破骨细胞骨吸收功能具有明显的抑制作用;补肾复方用于破骨细胞药效观察的大鼠含药血清制备条件之一为连续2次(间隔2h)灌胃、末次灌胃后1h采血。