A23187诱导K562细胞分化为树突细胞的实验研究

目的 体外探讨A23187快速将人慢性白血病K562细胞定向诱导分化为树突细胞(DC)的实验方法.方法 K562细胞在含有A23187或细胞因子的条件下诱导分化为DC,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术检测DC表面标志的改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各表面标志mRNA水平的变化,四甲基偶氮唑蓝(...     

基于EP-17A2的胶体金法检测 粪便隐血的空白限、检出限及定量限的建立及评价

目的 参考美国临床实验室标准化委员会(CLSI)发布的《临床实验室检验程序检测能力评价指南(第二版)》(EP-17A2)文件,探讨粪便隐血(FOB)胶体金法检测能力,建立该实验室的空白限(LOB)、检出限(LOD)及定量限(LOQ),减少弱阳性标本漏检率,并为胶体金法的检测限提供定量评价方法。方法 使用人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒检测新鲜全血制备的系列低浓度的血红蛋白溶液,制定校准曲线,将粪便隐血的空白样本及一系列的血红蛋白低浓度样本使用胶体金试纸条进行检测,利用Nato Checker710对显色带进行定量检测,并对定量结果进行统计分析,建立胶体金法检测粪便隐血的空白限、检出限及定量限。结果 空白限为99.01ng/ml,检出限为340.48 ng/ml,定量限为354.9 ng/ml。结论 参考CLSI EP17-A2文件建立的检测限比常规方法建立的检测限科学合理,优于肉眼判断结果,更能满足临床实验室的质量要求和临床早期诊疗的需求; 为提高实验室质量管理水平,每批次粪便隐血应根据此方法建立检测限,以及应用于其它项目胶体金法检出限的建立。     

黄芩苷诱导HL-60细胞凋亡的分子机制研究

本研究旨在探讨黄芩苷对急性髓系白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。CCK-8法检测黄芩苷对HL-60细胞增殖抑制情况;普通光学显微镜和Hoechst 33342染色后荧光显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax mRNA表达;Westernblot检测Bcl-2、Bax、caspase-8及caspase-3剪切片段的蛋白表达。结果表明,黄芩苷对HL-60细胞具有明显的增殖抑制作用,呈浓度和时间依赖性;在光学显微镜和荧光显微镜下细胞均呈凋亡的形态学改变;AnnexinⅤ/PI法检测到细胞早期凋亡;caspase-3、caspase-9、Bax基因mRNA表达水平呈上升趋势,Bcl-2 mRNA表达水平呈下降趋势,Bax、caspase-8及capsase-3剪切片段蛋白表达上调,同时Bcl-2蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比值降低。结论:黄芩苷显著抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与降低Bcl-2/Bax比值,激活线粒体凋亡途径及死亡受体途径有关。