新生小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的形态学变化

背景:目前对于大鼠、恒河猴等骨骼肌卫星细胞的研究较多,但有关小鼠骨骼肌卫星细胞的研究报道较少。目的:观察体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的光电镜结构及免疫组织化学特性。设计:单一样本研究。单位:天津中医学院组织胚胎学教研室。材料:实验在北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系唐军民导师研究室完成。新生5d昆明种小鼠5只,雌雄不限(购自北京大学医学部实验动物中心)。干预:分离新生小鼠骨骼肌卫星细胞,进行体外培养。在倒置显微镜下观察肌卫星细胞的成肌过程,并应用透射电镜及免疫细胞化学技术观察小鼠成肌细胞的超微结构及结构蛋白的分布。主要观察指标:①小鼠骨骼肌卫星细胞的分离纯化与原代培养的形态学观察。②免疫组织化学观察。结果:卫星细胞生长、分化良好,最终由单个核圆形细胞逐渐变化为多个核的长圆柱的肌管状细胞。免疫细胞化学技术显示,细胞呈α-肌动蛋白阳性。结论:采用两步消化法分离,得到的骨骼肌卫星细胞质量较好;且α-肌动蛋白对鉴定小鼠骨骼肌卫星细胞具有特异性。     

巨噬细胞条件培养液对原代培养小鼠成肌细胞生长的影响

目的 观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响.方法 小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清.取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36～48h后,将血清浓度降低至0.5%.将巨噬细胞培养上清加入低浓度血清培养的成肌细胞中,作用72h后收集细胞,通过Wright染色、LDH细胞化学和免疫细胞化学方法观察成肌细胞的生长情况.结果 巨噬细胞条件培养液能够在低浓度血清的条件下维持成肌细胞的正常形态和活性,并促进成肌细胞增殖.实验组LDH阳性细胞与对照组相比,其平均吸光度与积分吸光度均存在极显著性差异(分别为P＜0.001和P＜0.000 1).免疫细胞化学显示,实验组desmin阳性细胞数明显多于对照组.结论 巨噬细胞条件培养液中含有促进小鼠成肌细胞生长的因子.     

骨骼肌卫星细胞造血重建作用的研究

目的：探讨骨骼肌卫星细胞在造血重建中的作用。方法：采用受致死剂量照射小鼠为动物模型，尾静脉注射经胶原酶、胰蛋白酶消化分离后的骨骼肌卫星细胞，14天时观察小鼠脾脏并观察骨髓单个核细胞进行细胞化学染色。结果：被照射小鼠脾脏经Bouin液固定后出现数量不等的白色结节，组织切片观察显示为各系血细胞克隆。结论：骨骼肌卫星细胞具有诱导分化为造血干细胞的功能。     

新生小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的形态学变化

背景：目前对于大鼠、恒河猴等骨骼肌卫星细胞的研究较多，但有关小鼠骨骼肌卫星细胞的研究报道较少。目的：观察体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的光电镜结构及免疫组织化学特性。设计：单一样本研究。单位：天津中医学院组织胚胎学教研室。材料：实验在北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系唐军民导师研究室完成。新生5d昆明种小鼠5只，雌雄不限(购自北京大学医学部实验动物中心)。干预：分离新生小鼠骨骼肌卫星细胞，进行体外培养。在倒置显微镜下观察肌卫星细胞的成肌过程，并应用透射电镜及免疫细胞化学技术观察小鼠成肌细胞的超微结构及结构蛋白的分布。主要观察指标：①小鼠骨骼肌卫星细胞的分离纯化与原代培养的形态学观察。②免疫组织化学观察。结果：卫星细胞生长、分化良好，最终由单个核圆形细胞逐渐变化为多个核的长圆柱的肌管状细胞。免疫细胞化学技术显示，细胞呈a一肌动蛋白阳性。结论：采用两步消化法分离，得到的骨骼肌卫星细胞质量较好；且a一肌动蛋白对鉴定小鼠骨骼肌卫星细胞具有特异性。     

小鼠成肌细胞的体外培养及生物学特性的观察

目的：对新生小鼠成肌细胞进行体外培养，并动态观察其成肌过程的生物学特性。方法：分离乳鼠四肢骨骼肌，用DMEM／F－12培养液对成肌细胞进行体外原代培养；倒置显微镜下观察成肌细胞成肌过程的生物学特性；应用透射电镜及免疫细胞化学技术观察小鼠成肌细胞的超微结构及结构蛋白的分布。结果：本实验方法培养的成肌细胞生长分化良好，最终由单个核细胞变为多个核细胞；电镜下显示，成肌细胞胞浆细胞器呈逐步发育成熟过程，成熟的肌细胞富含束状排列的肌丝。免疫细胞化学技术显示，细胞呈α－肌动蛋白阳性，阳性产物多分布在细胞质中。结论：α＝肌动蛋白对鉴定小鼠骨骼肌成肌细胞具有特异性。