钴对表达在爪蟾卵母细胞上P2X4受体介导的ATP-激活电流的调制

目的 研究钴对P2X4受体介导的ATP-激活电流（ⅠATP）的调制作用.方法 应用双微电极电压钳技术,记录细胞外液加CoCl2对表达在爪蟾卵母细胞上的大鼠颈上神经节P2X4受体介导的ⅠATP的调制作用.结果 0.1 ～30 μmol/L浓度范围的钴离子对P2X4受体介导的ⅠATP呈明显的增强效应,钴浓度越高,ⅠATP幅值越大,0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L、10 μmol/L、30 μmol/L的钴离子使ⅠATP增加的百分比分别为：12.1±4.6,30.4±5.1,49.3±6.8,70.9±7.2,104.2±16.7,145.8 ±20.1（P ＜0.01）;ⅠATP的量-效曲线在钴离子的作用下向左上移位;应用1 μmol/L钴离子加ATP的混合液同时灌流细胞,可导致ATP的EC50从（15.6±1.9）μmol/L降低到（8.1 ±0.6）μmol/L（P ＜0.01）;即使是高浓度的钴,仍然对ⅠATP表现出明显的增强作用;当ATP浓度不变,钳制电位变化（-140 ～ 60 mV）时,钴离子对P2X4受体介导的ⅠATP的增强作用无明显变化.结论 钴对P2X4受体介导的ⅠATP的增强效应呈浓度依赖性而非电压依赖性.钴与通道蛋白胞外环的作用位点可能与锌和镉不同.     

不同酶切体系对胶回收纯化DNA浓度的影响

目的 通过建立不同的酶切体系,找寻酶切效果好、胶回收试剂盒纯化DNA得率高的实验设计.方法 使用XhoⅠ单酶切重组质粒pcDNA3-P2X4,酶切体系的体积分别为:150μl、160μl、170μl、180μl;酶切体系组成为:dddH2O(补足体积)、Buffer R(应用浓度是酶切体积的10%)、质粒DNA(无论所得质粒浓度如何,琼脂糖凝胶电泳胶回收的DNA上样量统一为23μg),XhoⅠ10μl(6μl、4μl两次加入);反应温度为:37℃ ;酶切的时间为2～3h.结果 酶切体系越大,所需要的酶切时间越短、酶切效果越好、酶切条带越接近Marker标准条带(通过电泳拍照观察所得),但是胶回收纯化后DNA的浓度却越低:150μl体系 DNA的浓度=308.96±8.71μg/ml,160μl体系 DNA的浓度=286.62±8.37μg/ml,170μl 体系DNA的浓度=245.80±15 64μg/ml,180μl体系 DNA的浓度=198.00±16.54μg/ml(方差分析,P<0.05,n=5).结论 将酶切的体系放大,杂质将相对稀释,不需增加酶的用量就能取得较好的酶切效果;提取质粒的浓度和纯度也决定着酶切效果.     

P2X受体在痛觉形成中的作用

三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)不仅是细胞内最莺要的能量分子,也是各种组织细胞最普遍应用的细胞间信息传递的信号分子.嘌呤受体可分为P1(腺苷)和P2(ATP/ADP)受体,其中P2受体广泛分布于全身多种组织和系统中,根据其分子结构和信号转导机制的不同分为P2X和P2Y受体.     

三维适形放疗对老年中晚期肺癌病人的疗效及肿瘤标记物的影响

中晚期肺癌病人常常采用三维适形放疗（3-DCRT）以提高治疗效果、生活质量,延长生存期,减轻对照射邻近组织的损伤及临床症状。本研究对70例老年中晚期肺癌病人采用3-DCRT治疗,旨在探讨其近期治疗效果及放疗前、后血清癌胚抗原（CEA）、癌抗原125（CA125）、血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化,现报道如下。     

组织细胞吞噬性脂膜炎1例

组织细胞吞噬性脂膜炎（histocytic cytophatic panniculitis，CHP）是一种由吞噬性组织细胞浸润引起的脂膜炎，除皮下脂膜外，可侵犯肝、脾、浆液膜、造血系统，导致多器官功能衰竭，晚期可出现凝血机制障碍，伴发DIC。我科收治1例，现报告如下。     

miR-206通过调控PDCD10抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨miR-206通过调控程序性细胞死亡因子10(programmed cell death 10,PDCD10)对前列腺细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:选取国药汉江医院手术切除的前列腺癌标本61例,另选40例良性前列腺增生组织作为对照,采用原位杂交检测miR-206和PDCD10表达水平,分别分析miR-206和PDCD10的表达与前列腺癌患者临床病理参数间的关系;双荧光素酶实验检测miR-206和PDCD10在前列腺癌细胞中的相互作用;选取前列腺癌PC3细胞,分别转染miR-206 mimics+PDCD10pcDNA过表达载体、miR-206 mimics、PDCD10 pcDNA过表达载体、mimics NC组和mimics NC+PDCD10 pcDNA组。采用实时荧光定量PCR法检测PDCD10 mRNA的表达量,Western blot检测PDCD10蛋白的表达量;通过MTT、Transwell迁移和侵袭检测前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:原位杂交实验染色显示,miR-206在前列腺癌组织中的阳性表达率(24.59%,15/61)明显低于良性前列腺增生组...     

维生素C对非洲爪蟾卵母细胞ATP-激活电流的增强作用

目的研究维生素C对非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP受体激活电流（IATP）的调制作用。方法采用双电极电压钳技术,记录细胞外液中加入不同浓度维生素C时,对外加ATP所引起的卵母细胞膜IATP的影响。结果10-4 ～3&#215;10-2mol/L浓度的维生素C 对10-4 mol/L IATP呈增强效应,其中以3&#215;10-3 mol/L维生素C对IATP（尤其是D1部分）的增幅最大,可使IATP（D1）幅值增加（72.1&#177;6.5）％, 显著高于对照值（P〈0.01）;并使IATP量-效曲线左上移,但并不改变反应的最大幅值。结论本实验表明维生素C对ATP-激活电流的调制作用呈明显的增强效应,这种效应可能是通过对P2X受体-通道复合体活性调节的结果。而维生素C对不同的ATP受体亚型分别产生何种影响,还有待于进一步的研究。     

非小细胞肺癌靶向治疗的研究进展

随着不同病理类型肺癌驱动基因的不断发现以及肿瘤生物学、基因组学和分子生物学的深入研究,针对相应基因的靶向药物的治疗也逐渐进入临床,肺癌 的有效靶点和高效低毒的靶向药物得到了突飞猛进的发展,主要包括:表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、抗肿瘤血管内皮抑制药物、间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制 剂等.     

P2嘌呤受体亚型与冠心病的关系

嘌呤受体包括P1受体和P2受体。本文综述了P2嘌呤受体的多个亚型与冠心病之间的关系,P2Y1、P2Y2、P2Y11和P2X7受体参与动脉粥样硬化斑块中的炎性反应,P2X3受体参与了心绞痛的伤害性反应,P2X4受体参与血管重塑和增强非梗死区心肌的收缩力,P2Y2和P2Y6受体与冠脉介入术后再狭窄的形成有关,P2Y11受体的多态性可增加心肌梗死的风险,P2Y1、P2Y12和P2X1受体则参与了血栓的形成。研制P2嘌呤受体各亚型特异性的激动剂和拮抗剂对开发治疗冠心病的新药具有重要意义。