铜绿假单胞菌氨基糖苷类药物修饰酶基因研究

目的 调查铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特性及氨基糖苷类药物修饰酶基因表达。方法 用Phoenix^TM-100系统鉴定细菌和药敏试验。用琼脂扩散法检测20株多重耐药铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星4种药物的敏感性。采用聚合酶链反应（PCR）扩增4种氨基糖苷类药物修饰酶基因,并使用DNA测序加以证实。结果 190株铜绿假单胞菌对氯霉素、四环素、复方磺胺耐药率最高,均为98．9％;对亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为15．3％和6．8％。从20株菌中检出aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和ant（2″）-Ⅰ3种修饰酶基因,阳性率分别为10％、60％和65％,未发现ant（3″）-Ⅰ基因。20株菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为35．0％、90．0％、70．0％、60．0％。结论 本地区铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药与修饰酶基因的传播表达有关。     

耐多黏菌素和碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的危险因素分析

目的探究耐多黏菌素和碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(polymyxin resistant and carbapenemase-resistantKlebsiella pneumoniae, PR-CRKP)的危险因素。方法收集2020年7月至2023年10月在苏州大学附属第三医院住院期间检出CRKP的患者资料, 根据对多黏菌素B的药敏试验结果分为CRKP组和PR-CRKP组, 回顾性分析患者的一般情况、入院前6个月抗菌药物暴露情况、入院时临床检测指标、检出目标菌时抗菌药物使用情况、住院时间和侵入性操作时间等, 采用多因素Logistic回归分析PR-CRKP的危险因素。采用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。结果共纳入CRKP感染患者170例, CRKP组123例, PR-CRKP组47例。单因素分析显示, 与CRKP组相比, PR-CRKP组的年龄更高(Z= -2.186, P= 0.029), 入院前6个月半合成青霉素类、碳青霉烯类、多黏菌素类和喹诺酮类药物的暴露史比例更高(χ2= 3.930、5.414、11.939、8.478, P值均 < 0.05), 入院时诊断为感染...     

多重实时荧光定量PCR对9种常见呼吸道病原体检测

目的探讨多重实时荧光定量PCR(MRT-PCR)检测9种常见呼吸道病原体的临床应用价值。方法采用Primer Express3.0(ABI)和Primer3 Input 4.0设计引物和探针建立MRT-PCR法,通过构建质粒标准品分析该方法的最低检出限和特异性。并对204例临床标本中副流感病毒1、2、3型、肺炎支原体、肺炎衣原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒进行回顾性检测。结果 MRT-PCR法检测病原体的最低检出限达103copies/m L,特异性达100%,无交叉反应。204例咽拭子标本中,MRT-PCR检出呼吸道合胞病毒23例,副流感病毒1、2、3型13例,腺病毒15例,肺炎支原体15例,肺炎衣原体3例,甲型流感病毒13例与乙型流感病毒6例。该结果与其他试剂报告结果完全一致。结论多重实时荧光定量PCR具有快速、准确、特异性强等特点,在呼吸道病原体检测方面有重要价值。     

IQ 200全自动尿沉渣分析仪与人工镜检的比较和评价

目的对IQ200全自动尿沉渣分析仪与人工镜检这两种方法进行比较和评价。方法随机收集102份尿液标本,用IQ200全自动尿沉渣分析仪与人工镜检对其中的红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶等进行计数,然后再对数据进行比较分析。结果IQ200尿液分析结果与镜检结果符合率：红细胞为84.31%,白细胞为86.27%,上皮细胞为91.18%,结晶为87.25%。灵敏度：红细胞为95.24%,白细胞为92.86%,上皮细胞为94.44%,结晶为92.11%。特异度：红细胞为78.33%,白细胞为78.26%,上皮细胞为90.48%,结晶为84.38%,IQ200携带污染率为0。尿液中某些草酸钙结晶和真菌孢子会干扰IQ200对红细胞的检测。结论IQ200全自动尿沉渣分析仪依然无法代替人工镜检,需与显微镜检查联合应用以提高检验质量,保证结果的准确度。     

（1，3）-β-D葡聚糖和曲霉菌半乳甘露聚糖抗原联合检测对侵袭性真菌感染的诊断价值

目的：评价（1,3）-β-D 葡聚糖[（1,3）-β-D-glucan assay,G test]和曲霉菌半乳甘露聚糖（Aspergillus galacto-mannan,GMtest）抗原联合检测对侵袭性真菌感染（invasive fungal infection,IFI）的临床诊断价值。方法：根据欧洲癌症研究治疗组织和真菌病研究组（EORTC ／MSG）的诊断标准结合我国血液病和恶性肿瘤患者 IFI 的诊断标准与治疗原则,将临床72例高度怀疑 IFI 的患者分为临床诊断组32例,非感染组40例,采集外周血进行 G 试验和 GM试验检测。结果：G 试验和 GM试验的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden 指数分别为68．75％、80．0％、73．33％、76．19％、0．4875和62．50％、82．5％、74．07％、73．33％、0．45;G／GM试验敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden 指数分别为90．63％、72．5％、72．5％、90．63％、0．6313。经统计学分析,单独检测时两试验敏感性、特异性均无显著性差异,而联合检测可提高敏感性。结论：G 试验和 GM试验对 IFI 有一定诊断价值,而联合检测大大提高了敏感性,对 IFI 的诊断更有价值。     

免疫印迹法对中老年住院患者梅毒试验诊断的评价

梅毒是危害人类健康较为严重的性传播疾病之一.近年来,梅毒在我国的发病率呈逐年上升趋势,使用敏感、特异方法对梅毒的早诊断、早治疗是控制其蔓延的重要手段.目前血清学试验已成为国内诊断梅毒的常用方法,如甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)[1].     

质谱快速鉴定两例AIDS合并真菌性血流感染病例分析

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的严重危害人类健康的传染病,以损伤免疫系统为主要特征,患者极易获得机会性感染,而新型隐球菌、马尔尼菲蓝状菌等深部真菌的机会性感染是AIDS患者死亡的主要原因之一。新型隐球菌最常引起的感染为隐球菌性脑膜炎,其发病隐匿、病死率高。患者主要表现为难以忍受的头痛,伴发热、恶心、呕吐,脑膜刺激征阳性等脑膜炎的症状与体征。     

鲍曼不动杆菌耐药性与毒力基因阳性模式相关性分析

目的调查鲍曼不动杆菌耐药性及毒力基因阳性情况,分析鲍曼不动杆菌耐药性与毒力基因阳性模式的关系。方法收集67株鲍曼不动杆菌,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对鲍曼不动杆菌进行鉴定,采用比浊法及氧化还原指示剂显色法进行药敏试验。聚类分析了解鲍曼不动杆菌同源性。PCR检测细菌外膜蛋白(ompA)、生物膜形成(adeH、csuA、pgaA)、铁摄取系统(basJ)、磷脂酶D(plcD)、荚膜阳性表型(ptk)和群体感应系统调节(abaI)8种毒力基因,并测序验证。分析鲍曼不动杆菌毒力基因与其耐药性关系。结果毒力基因ompA、adeH、csuA、pgaA、abaI、basJ、ptk和plcD的检出率分别为94%、100%、94%、99%、93%、96%、82%和99%。67株鲍曼不动杆菌中,同时检出3种基因的1株(1.5%)、5种基因的2株(3.0%)、6种基因的2株(3.0%)、7种基因14株(20.9%)和8种基因的48株(71.6%)。8种毒力基因阳性48株,多黏菌素耐药率仅为2.1%,四环素为58.2%,哌拉西林等其余13种的抗菌药物耐药率80%;7种毒力基因阳性14株,对除多黏菌素、四环素以外的抗菌药物耐药率78%。聚类分析结果显示,67株鲍曼不动杆菌共分为A、B 2个基因型,A型41株,B型26株。A型可分为A1(27株)、A2 2个亚型(14株),A1亚型主要来自神经外科(7株)、ICU(5株)和呼吸科(3株)等科室,A2亚型则主要来自呼吸科(3株)、心胸外科(3株)、ICU(2株)、神经外科(2株)等科室。B型可分为B1亚型(19株)、B2亚型(7株),B1亚型主要来自ICU(7株)、神经外科(4株)和呼吸科(3株)等科室,B2亚型主要来自ICU(2株)、呼吸科(3株)等科室。结论我院鲍曼不动杆菌可能存在交叉感染。鲍曼不动杆菌的耐药性与毒力基因阳性模式无相关性。     

虎杖苷与白藜芦醇体外抗肠道病毒71型的初步研究

目的检测虎杖苷与白藜芦醇体外抗肠道病毒71型(EV71)活性,分析其与NF-κB信号通路的关系。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测虎杖苷与白藜芦醇对人横纹肌肉瘤(RD)细胞的毒性以及抗EV71作用;western blot分析EV71感染RD细胞后EV71/衣壳蛋白VP1、NF-κBp50、NF-κBp65蛋白表达及磷酸化水平,Luminex流式液相芯片技术检测RD细胞分泌IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-α(IFN-α)和IFN-β的水平。结果虎杖苷与白藜芦醇的50%病毒抑制细胞毒性浓度(CC50)分别为542.76μg/mL和85.73μg/mL,50%病毒抑制浓度(IC50)分别为979.66μg/mL和21.36μg/mL,治疗指数(TI)为0.55和4.01。虎杖苷对EV71的抑制作用较弱,250μg/mL时的病毒抑制率为(23.57±3.64)%。白藜芦醇可抑制RD细胞EV71/VP1合成,作用8、12、24 h的VP1表达量差异具有统计学意义(t值分别为5.968、5.364和4.922,P均0.05)。与EV71感染组比较,EV71+白藜芦醇组NF-κBp50磷酸化水平降低,差异有统计学意义(8、12、24 h的t值分别为11.642、12.284和28.844,P均0.05);NF-κBp65磷酸化水平降低,也具有统计学意义(4、8、12、24 h的t值分别为9.017、16.883、10.287和6.922,P均0.05)。白藜芦醇可显著降低EV71感染的RD细胞分泌IL-6、TNF-α和IFN-β(t值分别为23.589、34.564和13.296,P均0.05)。结论白藜芦醇可通过抑制RD细胞的NF-κB信号通路干扰EV71复制。