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目的:观察晚期糖基化终产物对单核细胞产生白细胞介素6、白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的刺激作用.方法:实验于2007-02/06在长治医学院中心实验室完成.[1]血脂正常的健康成人外周血(由长治医学院附属和平医院血库提供);正常人AB血清(中国科学院上海细胞研究所,批号TBD0081HAB);内毒素和正常人血清白蛋(Sigma公司).[2]采用Lymphoprep密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,置于含体积分数0.1的人AB血清、2mmol/L的L-谷氨酰胺、25mmol/L Hepes的RPMI-1640中培养,选择性贴壁法纯化细胞.鼠抗人CD68 IgG1和羊抗鼠IgG1-Texas Red免疫荧光染色,阳性者为单核细胞.调整细胞浓度为1×109L-1备用.[3]将3.55g/L人血清白蛋白与200mmol/L葡萄糖在400mmol/L磷酸盐缓冲液中37℃孵育56d.pH7.4磷酸盐缓冲液透析,以除去未结合的葡萄糖.以Detoxi-Gel column去除晚期糖基化终产物修饰蛋白中可能污染的内毒素,即为晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白.[4]将1×109L-1单核细胞接种于24孔板,1.0mL/孔.RPMI-1640中分别加入12.5,25,50,100,200mg/L晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白,与单核细胞共同孵育12,24,48和72h.以同等剂量未加修饰的人血清白蛋白和单纯RPMI-1640作为阴性对照.酶联免疫吸附法检测单核细胞上清中白细胞介素6、白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达水平.结果:[1]与RPMI-1640阴性对照组、单纯人血清白蛋白100mg/L阴性对照组比较,孵育48h时100mg/L晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白诱导单核细胞产生白细胞介素6达到最大剂量和时间效应(F=2.68~2.93, P均=0.00).[2]与RPMI-1640阴性对照组、单纯人血清白蛋白100mg/L阴性对照组比较,孵育24h时50mg/L晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白诱导单核细胞产生白细胞介素1α达到最大剂量和时间效应(F=1.22~1.30, P均=0.00).[3]晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白诱导单核细胞产生肿瘤坏死因子α情况与产生白细胞介素1β相似.结论:晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白以剂量和时间依赖的方式刺激单核细胞合成白细胞介素6、白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α. 相似文献
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目的:探讨再次剖宫产产妇术中子宫瘢痕修剪预防子宫瘢痕憩室的效果。方法:将2019年1月~2020年1月收治的73例再次剖宫产产妇按照随机数字表法分为对照组和研究组。对照组36例剖宫产术后直接双层连续缝合切口,研究组37例剖宫产术后先切除原切口的瘢痕组织,然后双层连续缝合切口,两组均随访1年。比较两组术中术后情况、子宫瘢痕憩室发生情况及并发症发生情况。结果:研究组手术时间、住院时间长于对照组,术中出血量大于对照组(P<0.05)。两组首次排气时间、术后3 d最高体温、术后血红蛋白下降情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组子宫瘢痕憩室发生率均低于对照组(P<0.05),瘢痕憩室容积小于对照组,残余的子宫肌层厚度大于对照组(P<0.05)。两组产后出血及月经异常情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:再次剖宫产产妇采用术中子宫瘢痕修剪,虽然延长了手术时间及住院时间,增加了术后出血量,但可预防和减少子宫瘢痕憩室发生。 相似文献
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目的 探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响.方法 应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siRNA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响.结果 除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用.结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用. 相似文献
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目的 腹腔镜腹直肌前鞘悬吊在子宫脱垂患者中的应用效果。方法 选取2018年12月~2021年12月我院收治的子宫脱垂患者60例,随机数字表法分为研究组、对照组,每组各30例。研究组采取腹腔镜腹直肌前鞘悬吊,对照组采取阴式子宫切除与阴道修补术。比较两组手术相关指标,术后1个月POP-Q分度,并发症发生率。结果 研究组手术时间、住院时间较对照组短,术中出血量较对照组低(P <0.05);术后1个月研究组POP-Q分度优于对照组(P<0.05);研究组并发症发生率较对照组低(P <0.05)。结论 腹腔镜腹直肌前鞘悬吊治疗子宫脱垂患者,具有创伤小、出血少、手术时间短等优势,利于术后恢复。 相似文献
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目的 探讨氧化苦参碱通过调节miR-155-5p表达对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭中的作用和其潜在机制。方法 使用TRIzol法提取组织标本和细胞系的总RNA,检测胃癌组织与癌旁组织中的miR-155-5p表达情况。采用qRT-PCR评估miR-155-5p在人胃癌细胞系(SGC7901、MGC803)与正常胃黏膜上皮(GES-1、AGS)细胞中的表达情况。将MGC803分为空白组、转染错义序列siRNA组、miR-155-5p模拟物组、miR-155-5p抑制剂组、氧化苦参碱(100 μmol/L)组、氧化苦参碱+miR-155-5p模拟物组。采用MTT法观察不同干预下胃癌细胞的生长抑制作用,用细胞集落形成试验检测不同干预下胃癌细胞的增殖情况。用流式细胞技术分析不同干预对胃癌细胞凋亡的影响。Transwell法检测不同干预后胃癌细胞的迁移、侵袭情况。蛋白质印迹法检测MGC803细胞中Claudin 1、c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、Caspase-3蛋白的相对表达量。结果 与癌旁组织和胃黏膜细胞(GES-1、AGS)相比,在胃癌组织和胃癌细胞系(SGC7901、MGC803)中miR-155-5p相对表达量升高(P<0.001)。而氧化苦参碱通过调节miR-155-5p表达抑制胃癌细胞生长。MTT实验表明,miR-155-5p模拟物的转染后MGC803细胞活力显著增加,而氧化苦参碱可显著抑制胃癌细胞、转染和miR-155-5p模拟物的细胞活力(P<0.001)。与空白组、错义序列siRNA组相比,miR-155-5p模拟物转染后MGC803细胞活力显著增加,细胞集落生成增加,而氧化苦参碱可显著抑制胃癌细胞的活力和转染miR-155-5p模拟物的细胞活力,及细胞集落生成数(P<0.001)。miR-155-5p-模拟物组的细胞迁移和侵袭细胞数显著增加、凋亡比例降低,而氧化苦参碱组和miR-155-5p-抑制剂组细胞迁移和侵袭细胞数量降低、凋亡比例升高(P<0.001)。miR-155-5p模拟组的Claudin 1、c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2相对表达量增加,而Caspase-3相对表达量降低(P<0.01、0.001)。而miR-155-5p抑制剂组、氧化苦参碱组和氧化苦参碱+miR-155-5p抑制剂组的Claudin 1、c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2表达较miR-155-5p模拟组显著下降,Caspase-3表达增加(P<0.001)。结论 miR-155-5p可能是胃癌的治疗靶点,氧化苦参碱可通过miR-155-5p的调节作用发挥抗肿瘤作用。 相似文献
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目的:探讨胶质母细胞瘤的MRI动态增强表现。方法:搜集67例胶质母细胞瘤患者的临床及影像资料,回顾性分析其磁共振动态增强表现特点。结果:67例胶质母细胞瘤中,单发者63例,多发者4例。MRI动态增强均呈明显不均质强化,其中28例呈花环样强化,15例呈环形强化,11例呈结节状强化,13例呈囊实性强化。时间-信号强度曲线20例(29.9%)呈缓升型,28例(42.0%)呈平台型,19例(28.4%)呈速升型。结论:胶质母细胞瘤的MRI动态增强具有一定的特征性,平台型时间-信号强度曲线有助于明确诊断。 相似文献
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慢性肾功能衰竭是慢性肾功能不全的严重阶段,为各种慢性肾脏疾病持续发展的共同转归,最终发生尿毒症。主要表现为代谢产物潴留,水、电解质、酸碱平衡失调和全身各系统症状。心包炎为其心血管系统损害之一,而且多见于晚期患者。本文仅对1993年8月~1998年8月... 相似文献