排序方式: 共有56条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
酵母双杂交系统的研究进展与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
酵母双杂交系统作为发现和研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台,在近几年来得到了广泛运用.酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明,酵母双杂交系统既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的相互作用,也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的相互作用.因此,它在许多的研究领域中有着广泛的应用.本文就酵母双杂交的技术平台和应用加以介绍. 相似文献
3.
4.
目的研制能同时检测9种常见食源致病菌的96微孔板DNA诊断芯片。方法针对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7(Stx1和Stx2)、志贺氏菌、产单核细胞李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌等9种最常见的食源性致病菌,首先选择合适的保守基因,设计种特异性的PCR引物(5'端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立一管多重PCR扩增体系;然后按5×5的阵列格式将探针点制到96微孔板的微孔内,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的微孔杂交体系;采用链霉抗生物素蛋白碱性磷酸酶和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。结果20株标准菌株验证已建立的食源致病菌微孔板DNA诊断芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。在一起食物中毒事件中,该芯片在采样后12h内检出金黄色葡萄球菌,与传统的细菌分离培养和生化鉴定的结果相符。结论本研究建立的新型食源致病菌96微孔板DNA诊断芯片具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对食物中毒等突发公共卫生事件提供了非常有价值的检测技术。 相似文献
5.
目的分析孕34-38周孕妇阴道、直肠拭子无乳链球菌培养阳性及其药敏试验结果、妊娠结局,为孕妇及胎儿安全分娩作准备。方法对2017年1月1日至2018年12月31日的653例孕34—38周的孕妇进行阴道、直肠拭子无乳链球菌培养,阳性者根据药敏试验结果临产时进行治疗干预。并取其中同期孕34-38周孕妇阴道、直肠拭子无乳链球菌培养阴性的60例作对照组,回顾性分析治疗干预后阳性者与阴性对照组的产妇引起早产、胎儿宫内生长受限、产后出血、胎膜早破、产褥感染等结果。结果 653例孕34-38周孕妇阴道、直肠拭子无乳链球菌培养阳性31例,阳性率为4.75%。31例无乳链球菌对青霉素、氨苄西林、头孢类、万古霉素敏感100%。临产后经治疗干预,阳性病例组与阴性对照组的早产、胎儿宫内生长受限、产后出血、胎膜早破、产褥感染等情况进行比较分析,早产、胎儿宫内生长受限、产后出血、胎膜早破、产褥感染等无差异,P0.05。结论孕34—38周孕妇阴道、直肠拭子无乳链球菌培养阳性者对青霉素、氨苄西林、头孢类、万古霉素敏感性100%,且通过青霉素治疗有效。因此做好晚孕期孕妇阴道、直肠拭子无乳链球菌培养与药敏十分必要,可以有效控制孕妇带菌状态下分娩,以减少产妇、新生儿不良结局。 相似文献
6.
媒介动物(蚊、猪)体内黄病毒分子流行病学调查研究 总被引:1,自引:0,他引:1
〔目的〕通过对珠海注册养猪场及珠海口岸地区的蚊虫体内黄病毒的带毒率、宿主动物(猪群)及其人群进行血清黄病毒类(日本脑炎、登革热等)抗体水平的调查研究,为控制黄病毒在人群中的流行提供科学依据。〔方法〕采集养猪场猪血清、养猪场和口岸蚊标本、养猪场从业人员、入境的东南亚船员和城区部分发热病人血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测猪群和人群血清中的日本脑炎、登革热抗体;使用紫外灯诱蚊法在养猪场和口岸捕捉蚊类,经鉴定种类后,按20只蚊一组制成蚊悬液后,采用细胞培养、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及荧光定量PCR技术检测蚊体内日本脑炎病毒、登革和西尼罗病毒等黄病毒的携带情况。〔结果〕1.猪血清日本脑炎病毒IgG抗体:结果已发表于《中国国境卫生检疫杂志》2007年第3期《珠海市部分注册猪场日本脑炎调查研究》。2.蚊媒带毒情况检测:2005年1月~2006年12月共捕获的2763只成蚊,经鉴定隶属4属8种,其中白纹伊蚊所占比例最高(32.75%),其次为致倦库蚊(26.06%)、三带喙库蚊(25.30%)、海滨库蚊(7.75%)、中华按蚊(3.84%)、骚扰阿蚊(3.18%),其他(常型曼蚊和巨型阿蚊等)(1.12%);在132组蚊研磨液的病毒细胞培养中,有7份标本出现CPE病变,使用黄病毒通用引物,RT-PCR反应能扩增出相应的阳性条带,其中白纹伊蚊组阳性3份,致倦库蚊组阳性3份,三带喙库蚊组阳性1份,但用日本脑炎病毒、登革病毒Ⅰ~Ⅳ型和西尼罗病毒等特异性引物,未能扩增出相应的阳性条带,说明可能存在着其它黄病毒类的病毒感染;采用荧光定量PCR法,对蚊悬液和细胞培养液日本脑炎、登革和西尼罗病毒进行检测,从1组海滨库蚊标本中检出日本脑炎病毒核酸阳性,但强度较弱,这与珠海地区是乙脑低发地区相一致。3.人群登革热和日本脑炎血清抗体检测:从东南亚的入境船员、本地发热病人和养猪场从业人员等血清标本511份中,登革病毒抗体IgG总阳性率为7.24%,其中以东南亚的入境船员的阳性率最高,为12.76%,没有检出登革病毒抗体IgM和日本脑炎IgM抗体。〔结论〕珠海地区存在日本脑炎的主要传播媒介,并且在蚊媒中携带有日本脑炎病毒;蚊标本细胞培养出现细胞病变和RT-PCR扩增出黄病毒基因的特异性片段,提示在捕获蚊标本中可能存在着其他病毒感染的可能;虽然养猪场猪群日本脑炎感染率不高,但存在着日本脑炎病毒的隐性感染或曾经感染过,提示不能够放松对乙型脑炎的预防控制工作,应采取积极的预防措施,防止人群和猪场日本脑炎的发生与流行。此外,研究结果表明东南亚船员有较高的登革热感染率,因此,在登革热流行期间,我国口岸应加强对来自东南亚国家交通工具员工和旅客的登革热的监测,以及有可能藏带、孳生蚊虫的废旧物品、集装箱等的检验检疫工作,以防止登革热的传入与流行。 相似文献
7.
布比卡因速发过敏性休克一例报告杜坚患者女,21岁,因左侧桡骨远端陈旧性斜形骨折即入院。在臂丛麻醉下行切开复位、钢板内固定术,既往无药物过敏史。术前心电图、血常规、肝功检查均正常。常规注射苯巴比妥钠0.1g、阿托品0.5mg。入手术室血压16/9.3k... 相似文献
8.
9.
[目的]探讨用彩色多谱勒超声心动图评价老年旅行者心脏功能的方法.[方法]130例老年旅行者行彩色多谱勒超声心动图检查,用左室射血分数、二尖瓣E/A比值等7项指标评价心脏收缩-舒张功能,按心脏收缩-舒张功能正常或/和异常分为4组,进行对照分析.[结果]心脏收缩-舒张功能均为异常组7项指标均有非常显著性差异.心脏收缩功能正常舒张功能异常组反映心脏舒张功能的3项指标均有显著性差异;而反映心脏收缩功能的4项指标均无显著性差异.心脏舒张功能正常而收缩功能异常组反映心脏收缩功能的4项指标均有非常显著性差异;反映心脏舒张功能的3项指标均无显著性差异.[结论]左室射血分数、二尖瓣E/A比值等7项指标可以准确的评价心脏收缩-舒张功能,为全面评价老年旅行者心脏功能提供依据,可以更好的保障旅行者的生命安全. 相似文献
10.
目的 建立能同时筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒的多重RT-PCR技术.方法 针对A型流感病毒的M基因、B型流感病毒的NS基因设计通用扩增引物,针对新型甲型H1N1流感病毒的HA基因设计特异性扩增引物,采用一步法建立多重RT-PCR反应体系.通过盲法实验与实时荧光RT-PCR进行比对来评价方法的准确性,并应用于临床评价方法的实用性和有效性.结果 琼脂糖凝胶电泳分析多重RT-PCR产物,结果显示目的扩增片段条带清晰明亮,没有非特异性产物出现,可见该方法扩增效率高,特异性强.50份样本的盲法实验结果显示两种方法检测结果完全一致,符合率为100%.结论 建立的多重RT-PCR方法能通过一次实验快速、准确地同时筛检A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒,是一项成本低廉、对流感的疫情监测和早期诊断具有实用价值的筛检技术.Abstract: Objective To developed a multiplex RT-PCR assay for simultaneous screening of type A, B and novel A (H1N1)influenza viruses. Methods Two pairs of universal primers in were designed for amplifying the M gene and NS gene of type A and B influenza viruses, respectively. A pair of specific primers of HA gene was designed to detect novel A (H1N1) influenza virus. A one-step method was used to establish the multiplex RT-PCR system. A blinded experiment was carried out to validate the accuracy of this assay in comparison with the results of real-time fluorescence RT-PCR. The clinical practicability and efficacy of this assay was also evaluated. Results The RT-PCR products were analyzed using agarose gel electrophoresis,which yielded distinct bands of the target fragments without non-specific reactions, suggesting the high efficiency and specificity of the multiplex RT-PCR. Blinded study of 50 samples demonstrated a concordance rate of 100%. Conclusion This multiplex RT-PCR assay allows one-step simultaneous detection of type A, B and novel A (H1N1) influenza viruses rapidly and accurately, and provides a valuable low-cost screening technique for influenza epidemic monitoring and early diagnosis. 相似文献