经咽旁入路选择性切除大鼠垂体前叶的研究

目的研究经咽旁入路选择性的切除大鼠垂体前叶，以制备大鼠垂体前叶激素缺乏模型如生长激素（GH）缺乏模型。方法经腹侧咽旁入路，运用显微神经外科技术经基蝶骨底选择性地切除垂体前叶。然后采用竞争免疫沉淀法检测大鼠生长激素的含量，术后统计死亡率、成功率。结果切除垂体前叶后大鼠的死亡率为26．7％，成活率为73．3％，全切率为91％；成功制备大鼠模型的GH显著低于假手术组和对照组。结论运用显微外科技术可以成功的选择性的切除大鼠垂体前叶，制备出垂体前叶激素如生长激素缺乏的动物模型。     

钨丝微弹簧圈血管内栓塞36例外伤性颈内动脉海绵窦瘘

目的　探讨钨丝微弹簧圈栓塞治疗外伤性颈内动脉海绵窦瘘的可行性。方法　采用自制钨丝微弹簧圈经动脉途径栓塞治疗 ３６ 例外伤性颈内动脉海绵窦瘘。结果　所有病例全部一次栓塞成功,临床治愈率为 １００％ ,患侧颈内动脉通畅率为 ８８．９％ ,无严重神经系统并发症发生。随访 ３ 个月～３年,未见瘘口复发。结论　钨丝微弹簧圈栓塞治疗外伤性颈内动脉海绵窦瘘是一种有效的方法。     

三氧化二砷对人胶质瘤细胞株U251影响的实验研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)抗人胶质瘤细胞株U251的作用及机制。方法采用0．5、1．0、2．0、4．0μmol／L AS2O3诱导人胶质瘤细胞株U251,于培养第1、2、3、4、5、6d应用倒置相差显微镜、四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞仪观察人胶质瘤细胞株U251的存活,形态学改变及细胞DNA含量的变化。结果0．5～4μmol／L的As2O3明显抑制U251的增殖。流式细胞仪分析显示,加药组在G1期细胞前均出现亚二倍体峰,且G0/G1期细胞减少,诱导细胞凋亡。结论体外三氧化二砷能抑制人胶质瘤细胞U251增殖,提示有希望用于神经胶质瘤患者的治疗。     

变性高效液相色谱法筛选胶质瘤易感基因ERCC2的单核苷酸多态性

目的筛选和鉴定脑胶质瘤易感基因ERCC2——纠正鼠突变细胞切除修复缺陷基因的单核苷酸多态性（SNPs）。方法应用参考文献所报道的引物序列，PCR扩增179例胶质瘤患者肿瘤及血液标本和44例正常对照组血液标本ERCC2基因第22外显子及其邻近的部分内含子序列，采用DHPLC技术对扩增片段进行基因变异检测，将不同类型的PCR片段进行全序列测序并与参考序列对比分析。结果在此片段中验证了一个已知的SNP位点，初步鉴定了1个新的SNP位点，排除了1个已知在自种人存在的SNP位点和基因型。结论SNPs位点存在人种间差异；DHPLC预测结合全序列测序是一种高效、经济、简便、可靠的SNP筛选方法。     

三维重建单(双)靶点定向置管引流术治疗高血压壳核出血

目的回顾性分析三维重建单(双)靶点定向置管引流术治疗高血压壳核出血的疗效,验证该方法的有效性和可行性。方法将133例壳核脑出血病人的CT定位扫描资料输入计算机工作站,对血肿进行三维重建,根据血肿量的大小和形状设计1～2个靶点和引流管路径。应用立体定向技术将引流管(外径5mm,内径3mm)送至颅内预定靶点,术中应用10ml注射器轻柔抽吸血肿液化部分,术后将尿激酶(1～2万IU)注入血肿腔内,夹闭引流管2h后自然引流,每12h重复1次。复查CT证实剩余血肿量为最初的10%~15%时拔除引流管。结果平均置管1.5 d(1～3d),平均血肿排空率92.8%。术后1个月病死率6.0%,远期随访(平均22个月)病死率11.3%,优良率74.4%。结论该方法治疗高血压壳核脑出血,血肿排空较彻底,疗效可靠,尤其适用于血肿量较大(>25ml)且形态不规则的颅内血肿。     

成年大鼠脑创伤后脑组织碱性成纤维细胞生长因子表达的变化

目的:研究液压冲击性脑损伤后成年大鼠脑组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达时程和空间分布的变化。方法:制作液压冲击性脑损伤模型,免疫组织化学法动态检测内源性bFGF的变化。结果:在正常脑组织中,bFGF免疫活性低水平表达,且主要位于胶质细胞核及神经元细胞质中。液压冲击伤后bFGF免疫活性增强,聚集核周边。此外,部分bFGF免疫活性聚集于神经元周围间隙中半定量分析显示液压冲击伤后3d,大脑皮质bFGF阳性细胞数量较正常对照组升高4.8倍;伤后7 d,bFGF免疫活性达高峰,伤后30 d消失。结论:液压冲击伤后,损伤的胶质细胞和神经元暂短地合成bFGF,并以旁分泌和自分泌形式起作用。     

脂质体和人工合成多聚物对人生长激素基因治疗体内实验影响的研究

目的 研究非病毒载体脂质体、人工合成多聚物对基因治疗体内实验的方法，以期筛选出能提高基因治疗体内实验方法表达效率的理想载体。方法 分子克隆方法构建多种人生长激素基因真核表达载体，分别和脂质体Lipofect AMINE^TM、多聚物聚乙烯吡咯烷酮(PVP)结合，大鼠胫前肌肌肉注射，2周时注射部位肌肉匀浆后PCR、RT-PCR分别检测hGH载体、hGHmRNA，放射免疫法检测血清中hGH。结果 构建的真核表达载体经酶切、PCR、测序鉴定正确，各hGH载体骨骼肌肌肉注射后PCR、RT-PCR均为阳性，血清也均得到表达。质粒载体与LipofectAMINE^TM、PVP结合后，hGH表达均高于裸露质粒组，并且Lipofect AMINE^TM的表达高于PVP。结论 对非病毒载体的基因治疗的体内实验中发现，脂质体Lipofect AMINETM、多聚物PVP能提高目的基因的表达效率。     

经咽旁入路选择性大鼠垂体前叶切除的研究

去垂体鼠是垂体有关研究非常重要的动物模型,常用于垂体激素尤其是生长激素(GH)的研究。我们采用显微外科技术,经咽旁入路选择性的切除大鼠垂体前叶,成功制备出GH缺乏动物模型。     

大鼠神经元液压伤后依钙蛋白酶的时程变化及亚低温的影响

目的研究常温时液压冲击伤后神经元内依钙蛋白酶活性变化及亚低温的干预效果。方法体外培养大鼠神经元并制作液压冲击伤模型，在不同时间点进行亚低温干预，以紫外分光光度法检测液压冲击伤后的神经元内Calpain的活性变化及在不同时段亚低温对Calpain活性的干预效应。结果常温时，在细胞损伤后Calpain的活性发生显著变化。亚低温组与常温组Calpain的活性不同，且亚低温对伤后Calpain活性的干预效应与作用起始时间密切相关。结论液压冲击伤后神经元内Calpain活性发生的改变参与细胞创伤的病理过程，亚低温可能通过这一机制具有一定保护创伤性脑损伤的作用。亚低温干预的效果与开始干预时间相关。     

多聚物PVP载体人生长激素基因在去垂体鼠体内表达的实验研究

目的以人工合成多聚物5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为基因治疗载体,研究人生长激素基因骨骼肌肌肉注射方法在生长激素(GH)缺乏症模型鼠中的表达.方法选用人GH基因的真核表达载体pCEP-hGH与PVP混合,采用不同剂量胫前肌肌肉注射方法,1～4周时取注射部位肌肉,匀浆后采用PCR、RT-PCR方法分别检测hGH载体、hGH mRNA,采用放射免疫法检测血清中hGH.结果构建的真核表达载体经酶切、PCR、测序鉴定正确,各组hGH载体骨骼肌肌肉注射后PCR、RT-PCR均为阳性,100μg、300μg剂量组4周内血清均得到表达,呈缓慢上升趋势.300μg剂量组表达大于100 μg剂量组,差异有极显著意义.结论应用PVP作载体,在去垂体鼠内骨骼肌肌肉注射hGH基因,能获得较长期的表达.