多发性硬化患者血清sCD62E的检测及意义

多发性硬化(ｍｕｌｔｉｐｌｅｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＭＳ)的病因及发病机制至今未明。目前认为 ,主要是由其Ｔ细胞介导而致中枢神经系统炎性脱髓鞘的自身免疫性疾病[1] 。由于可溶性Ｅ选择素 (又称ｓＣＤ6 2Ｅ)可介导白细胞 (中性粒、单核细胞及ＣＤ4 + 记忆性Ｔ细胞)在内皮细胞表面最初的滞留和滚动 ,以及随后迁移到炎症组织 ,推测其可能与Ｔ细胞介导的中枢神经损伤有关。为此 ,我们检测了ＭＳ患者ｓＣＤ6 2Ｅ ,以探讨其在ＭＳ发病中的作用。1　对象和方法1.1　对象　ＭＳ患者 4 5例 ,包括活动期 (ＡＭＳ) 2 5例 ,稳定期(ＳＭＳ) 2 0例。男性…     

脑淋巴引流阻滞及其对缺血性脑神经元损伤影响的研究

目的探讨脑淋巴引流途径的生理意义和在缺血性脑神经元损伤中的作用。方法应用摘除颈部浅、深淋巴结并结扎其输入和输出淋巴管的方法建立脑淋巴引流阻滞(CLB)大鼠模型 ,大脑中动脉线栓法制作局部脑梗塞(MCAO)大鼠模型。将动物分为假手术对照(SO)组、CLB组、MCAO组和CLB MCAO组。应用多种技术手段 ,检测动物不同时间点脑微区血流量(激光多普勒法)、皮层诱发电位 ,测定脑组织一氧化氮合酶(NOS)活性 ,丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性 ,干湿重比较法观察脑组织含水率 ,原子吸收分光光度法测定脑组织电解质含量 ,TUNEL法观察神经元凋亡 ,电子显微镜观察细胞损伤等指标。结果在术后观察7d内 ,与SO组大鼠比较 ,CLB组不同脑皮层部位微区血流量显著下降 ,体感诱发电位潜伏期明显延长(波幅未见明显变化) ,脑组织NOS活性逐渐升高 ,MDA含量增加SOD显著活性下降。脑组织水、Na 含量增加 ,伴有K 丢失和Ca2 积聚 ,在大脑新皮层和海马区可见TUNEL染色阳性的凋亡神经元。与MCAO组比较 ,CLB MCAO组大鼠神经功能损伤更为严重 ,同时脑微区血流量降低和MDA含量增加更显著 ,SOD活性明显下降 ,脑组织水、Na 含量增加、K 丢失和Ca2 积聚更为明显 ,神经元细胞器损伤更加严重。结论脑淋巴引流是维持脑组织内环境稳     

泰山白花丹参提取物对人脐血内皮祖细胞增殖、黏附及分泌NO的影响

目的:观察单味中药泰山白花丹参提取物(SBE)对人脐血内皮祖细胞(EPCs)增殖、黏附及分泌一氧化氮(NO)的影响。方法:采用密度梯度离心法从脐血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度SBE继续培养24h;分别采用MTT比色法、黏附能力测定实验和硝酸还原酶法测定EPCs的增殖、黏附和分泌NO能力。结果:与对照组比较,SBE组EPCs增殖、黏附能力提高,培养上清中NO浓度增加(P<0.05),其作用在一定范围内随SBE浓度增加而增强。结论:白花丹参显著改善EPCs功能,这可能是其内皮保护的新机制。     

血流波动在胶原蛋白Ⅲ黏附表面对血小板黏附的影响

目的 观察血流波动状态对血小板黏附功能的影响.方法 将血液在剪切率300S-1下流动10秒和在剪切率1000S-1时流动10秒之间交替进行,获得血流波动状态;血液分别保持在剪切率300S-1和1000S-1流动作为稳定血流;并应用单向灌流小室进行灌流,以胶原蛋白Ⅲ作为黏附表面,观察血小板黏附率和形态学变化.结果 血液灌流5分钟后,波动状态下的血小板黏附率比剪切率为300S-1时和1000S-1时明显增高(均P＜0.001),黏附血小板的形态成团块状分布.结论 血流波动能够增加血小板对胶原蛋白的黏附功能.     

荧光定量聚合酶链反应法比较标准管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA在老年大鼠不同组织中的表达

背景:反转录聚合酶链反应用于基因表达分析越来越显示出其重要性,其中合适的内参基因选择很重要,目前并没有适合于所有体系可作为内参的管家基因.人鼠是常用动物模型,选择合适的大鼠管家基因作为内参尤其必要.目的:比较分析使用最广泛的4个标准管家摹因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA在老年大鼠肝、肾、心、肺组织和大脑皮质中的表达情况.设计、时间及地点:观察对比实验,于2007-07/08在泰山医学院生命科学研究所分子生物学实验室及泰安市疾控中心病毒检测中心实验室完成.材料:选用老年SD大鼠3只,用于检测管家基因表达情况.方法:采用反转录实时荧光聚合酶链反应技术检测老年大鼠肝、肾,心、肺组织和大脑皮质中有着不同表达丰度和功能的4个管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA的表达情况.主要观察指标:老年大鼠不同组织内4个管家基因的表达水平及不同组织间的表达差异.结果:①酸性核糖体磷蛋白P0在老年大鼠不同组织间表达差异最小.②老年大鼠肾组织中表达最稳定的管家基因是β-肌动蛋白:心脏组织和肺组织中表达最稳定的管家基因是3-磷酸甘油醛脱氢酶.结论:老年大鼠组织间信使RNA分析仅用1个内参基因是不合适的,至少应该使用两个参照基因,1个选用18S核糖体RNA:另一个基因的选择标准如下:适用于分析不同组织间基因表达情况的内参基因是酸性核糖体磷蛋白P0,而心脏和肺组织研究适用3-磷酸廿油醛脱氢酶,肾组织研究适用β-肌动蛋白.     

构建伴高血压与胰岛素抵抗的大鼠模型

目的:研究表明,长期食用以脂肪为代表的高热量饮食可导致胰岛素抵抗,而高盐饮食和高血压的发生密切相关.以高脂高盐饮食诱导Wistar大鼠建立伴高血压与胰岛素抵抗大鼠模型.方法:实验于2006-10/2007-03在泰山医学院生命科学研究所完成.①实验分组:选用SPF级雄性Wistar大鼠24只,8周龄,体质量140g左右,随机数字法将大鼠分为对照组和胰岛素抵抗组,每组12只.②实验方法:实验大鼠适应性饲养7 d后,对照组继续以普通标准大鼠饲料喂养,胰岛素抵抗组则以高脂饲料取代普通标准大鼠饲料喂养,两组均饮用大鼠专用纯净水,共16周.③实验评估:实验过程中每周测食量、水量和体质量,每4周测1次空腹血糖和尾动脉血压.实验结束前,取血测空腹血浆胰岛素并进行高胰岛素-正常血糖钳夹实验判定胰岛素敏感性.结果:24只大鼠全部进入结果分析.①实验前8周两组大鼠食量差异无显著性意义(P＞0.05),8周后胰岛素抵抗组食量较对照组有所下降(P＜0.05);实验全程中胰岛素抵抗组饮水量高于对照组(P＜0.01):两组大鼠体质量差异无显著性意义(P＞0.05).②喂饲高脂高盐饲料16周后,与对照组相比,胰岛素抵抗组尾动脉血压升高(P＜0.01);葡萄糖输注速率降低(P＜0.05);胰岛素抵抗组空腹胰岛素浓度高于对照组(P＜0.05);两组空腹血糖差异无显著性(P＞0.05).结论:长期高脂高盐饮食可成功诱导出伴高血压胰岛素抵抗大鼠模型.     

决明子富铬培育的实验研究

目的探讨决明子生芽及三氯化铬浓度和培育时间对决明予富铬的影响。方法用不同浓度的三氯化铬水溶液,37℃浸泡决明子过夜,收获浸泡后的决明子,作为0h时间点的样品,然后分别收获24、48、72、96h的决明子芽,用石墨炉原子吸收分光光度法测定铬含量。结果决明子富铬的最短培育时间是72h,适宜的三氯化铬浓度为600mg／L。结论三氯化铬浓度、培育时间对决明子富铬有影响。     

低分子肝素钙、阿司匹林联合治疗急性脑梗死的临床研究

 目的观察低分子肝素钙、阿司匹林及其联合应用治疗急性脑梗死的疗效及其安全性。方法共选择240例急性脑梗死患者,随机分为低分子肝素钙治疗组、阿司匹林治疗组、低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组及对照组,每组各60例。治疗前后分别作神经功能缺损程度评分及临床疗效判定,并观察每组的不良反应。结果低分子肝素钙治疗组、阿司匹林治疗组、低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组神经功能恢复均明显优于对照组,低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组临床疗效明显优于低分子肝素钙治疗组与阿司匹林治疗组,各组出血发生率无显著差异性。结论脑梗死急性期给予低分子肝素钙联合阿司匹林治疗安全有效,且明显优于单药治疗。     

大鼠局灶性脑梗死后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9的表达及白花丹参叶的干预效应

目的：观察大鼠局灶性脑梗死后促进细胞凋亡的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9表达的变化规律及白花丹参叶的保护作用方法：实验于2004—03／06在山东省泰山医学院微循环重点实验室完成。取50只Wistar大鼠，随机分为局灶性脑梗死组和白花丹参叶预处理组两组符25只，每组义按光照后时间分为30min．12，24，48，72h等5个亚组，每亚组5只。造模前，白花丹参叶预处理组大鼠给予20g／kg白花丹参叶水提物灌服，1次／d，连续7d，然后两组同时采用光化学法制作大鼠局灶性脑梗死的模型。利用免疫组化染色技术观察局灶性脑梗死后不同时间点大鼠脑半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9表达的变化，并观察大鼠一般情况。结果：50只大鼠全部进入结果分析。①局灶性脑梗死组大鼠梗死后30min即有半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3，9阳性细胞出现，呈半球状向四周放射样扩展，随梗死时间的延长逐渐增多，二者行均在48h表达至高峰，但半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达更显著（P〈0．05），阳性细胞局限于梗死区周围。②预防性应用白花丹叶水提物后，大鼠出现明显的嗜睡现象，受损皮质表面积红染区、蓝染区明显减小，各时点半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9的阳性反应均明显减少，较单钝梗死组有显性差异（P〈0．05）。结论：局灶性脑梗死后可诱导仁胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9的表达，白花丹参对脑梗死具有保护作用，其分子机制可能为抑制了半胱氨酸天冬氧酸蛋白酶3,9的表达。     

白花丹参对小鼠局灶性脑梗死ICAM-1表达及白细胞浸润的影响

目的 探讨白花丹参水提取物预处理对局灶性脑梗死细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达及白细胞浸润的影响。方法 小鼠随机分为假手术组、脑梗死组、白花丹参组，采用光化学法诱导小鼠局灶性脑梗死模型，免疫组化和ELISA法检测梗死侧皮层ICAM-1的表达变化，比色法检测梗死侧皮层髓过氧化物酶（MPO）的活性变化，2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法测定梗死体积。结果 假手术组ICAM-1表达低，各时间点无差异（P〉0．05）。脑梗死组ICAM-1表达于梗死后3h开始升高．12h达高峰，24h开始下降。与脑梗死组相应时间点比较，白花丹参组于梗死后3．6、12和24h ICAM-1的表达均降低（P〈0．05）。MPO的活性变化规律基本同ICAM-1的表达变化。与脑梗死组比较。白花丹参组梗死体积明显缩小（P〈0．01）。结论 白花丹参水提取物预处理对小鼠局灶性脑梗死有保护作用，其机制之一可能是降低梗死侧皮层ICAM-1的表达，减少中性粒细胞的浸润。