一例药物性肝病患者的临床病例分析

病例介绍 患者,男性,15岁,因"皮疹1月,乏力纳差、身目黄染3周"来我院就诊. 患者1月前无明显诱因下出现四肢皮肤淡红色皮疹,凸起于皮面,不伴瘙痒,无腹痛、腹胀、关节痛等不适.于当地医院服中药治疗,皮疹消退,但随后出现剑突下持续性隐痛,与饮食无明显关系.     

环氧合酶-2与幽门螺杆菌感染

环氧合酶-2(COX-2)与胃癌关系研究的初步成果引起了国内外研究者的广泛关注，业已明确幽门螺杆菌(Hp)感染是胃癌发生的重要病因，Hp感染可诱导胃粘膜COX-2表达上调，而COX-2表达与胃癌形成密切相关，Hp根除治疗对COX-2表达的长期影响值得关注。Hp感染导致胃癌的发病机制可能与COX-2活性升高有关。     

人类DLK1基因的克隆、表达、纯化及抗体制备

目的 构建人类DLK1基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,为研究DLK1基因的功能奠定基础.方法 从GenBank中下载人类DLK1基因全长cDNA序列并针对不合信号肽的编码序列设计引物,应用RT-PCR获得目的片段,重组入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得重组DLK1蛋白免疫大鼠制备多克隆抗体,用ELISA检测抗体滴度.结果 成功构建了DLK1基因重组表达载体pET-28a-DLK1,表达的重组蛋白纯化经SDS-PAGE鉴定后免疫大鼠,得到了高滴度的多克隆抗体.结论 成功的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备为进一步研究DLK1基因的功能及其在肝肿瘤中的作用提供了基础.     

人类Foxm1b基因的原核表达、抗体制备及其对肝癌细胞中Foxm1b蛋白的识别

【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体，表达并纯化蛋白，制备多克隆抗体，并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达，为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pegene软件分析其可能的抗原表位，设计引物．应用RT—PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段，重组人原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL-21（DE31中诱导表达，应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体，用ELISA检测抗体滴度并用免疫细胞化学的方法检测此抗体对肝癌细胞中天然Foxm1b蛋白的识别。【结果】成功构建了Foxm1b基因重组表达载体pET-28a—Foxm1b，表达的蛋白经纯化后免疫大鼠得到了高滴度的多克隆抗体．该抗体可以识别肝癌细胞中的天然抗原。【结论】人类Foxm1b基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及有诊断价值的抗体的制备为后续的研究提供了基础。     

急性胰腺炎伴发心血管损害的临床分析

急性胰腺炎并发心血管功能紊乱症候群,有学者亦称胰心综合征(PCS)[1,2]。为提高对本病的认识,现将近五年来我院收治的PCS病例进行临床分析。1　临床资料1.1　诊断依据　本组病例既往均无心血管病史,符合急性胰腺炎(AcutePancreatitisAP)的诊断标准,并伴有心血管损害的临床表现,     

测定新生隐球菌活力的新方法

目前,对隐球菌性脑膜炎的抗真菌治疗,两性霉素B联合氟胞嘧啶或氟康唑被公认为是急性期最佳治疗方案.临床上经常遇到两性霉素B和氟胞嘧啶或氟康唑治疗一段时间后,不良反应明显,脑脊液隐球菌计数持续2～3个/mm³,这些隐球菌是死细胞还是活细胞?决定两性霉素B是否需要继续用下去.过去人们常通过显微镜脑脊液墨汁染色进行隐球菌计数,通过脑脊液真菌培养检验隐球菌是否存在及其活力,通过乳胶凝集实验观察治疗效果.虽然操作简便,但不能精确判定新生隐球菌的活力.因此,建立方便、有效的检测新生隐球菌活力的方法,便于指导隐球菌性脑膜炎的临床治疗.我们采用一种新型的穿透性核酸染色剂(SYTO9)和常规的核酸染色剂碘化丙啶(PI)进行双重染色后,用共聚焦激光扫描显微镜观察,能准确判定新生隐球菌的活力.同时使用维生素K3增强的四甲基偶氮唑盐(MTT)法进行活力测定比较.     

塞来昔布对MNNG诱导的大鼠胃腺癌组织Bax、Bcl-2、Fas表达的影响

【目的】探讨塞来昔布预防胃癌的非COX依赖性途径。【方法】86只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为6组：A组动物（5只）自由饮用蒸馏水不作特殊处理；B组动物（16只）饮用含N-甲基-N’-硝基-亚硝基胍（MNNG）100μg／mL的蒸馏水；C组（16只）、D组（17只）、E组（16只）、F组（16只）动物除饮用含MNNG100μg／mL的蒸馏水外，C组动物还灌喂吲哚美辛3mg／kg，1次／d，D组、E组、F组动物分别灌喂塞来昔布5mg／kg、10mg／kg和20mg／kg。1次／d。以上处理连续10个月，处理因素结束后2个月内处死动物观察腺胃肿瘤的发生率。用实时PCR和免疫组化方法检测各组动物胃肿瘤组织Bax、Bcl-2、FasmRNA表达及蛋白水平。【结果】A、B、C、D、E、F组动物胃癌的发生率分别为0％（0／5）、75％（12／16）、68．8％（11／16）、70．6％（12／17）、18．8％（3／16）和31.3％（5／16）（P=0．002）。与B组相比，C、D、E和F组胃癌组织Bax、Bcl-2、FasmRNA表达和蛋白水平均无显著性差异。【结论】选择性COX-2抑制剂塞来昔布预防胃癌的机制可能与凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas表达无关。     

白细胞介素32在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨白细胞介素32蛋白在胃癌及其癌旁组织中的表达情况,并分析与临床病理特征之间的相关性。方法采用免疫组织化学法检测胃癌和癌旁组织中白细胞介素32蛋白的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果胃癌组织中白细胞介素32蛋白的阳性表达率为95%(19/20),明显高于癌旁组织的表达率14.3%(1/7),差异有统计学意义(P<0.05)。白细胞介素32蛋白阳性表达与肿瘤细胞的浸润深度、TNM分期、性别、年龄及有无淋巴结转移无相关性(P>O.05)。结论白细胞介素32在胃癌组织中呈过表达,白细胞介素32蛋白的表达与年龄、性别、肿瘤浸润、肿瘤分期及淋巴转移无关。     

人类Foxm1b基因的原核表达、抗体制备及其对肝癌细胞中Foxm1b蛋白的识别

 【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体，表达并纯化蛋白，制备多克隆抗体，并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达，为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pegene软件分析其可能的抗原表位，设计引物．应用RT—PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段，重组人原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL-21（DE31中诱导表达，应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体，用ELISA检测抗体滴度并用免疫细胞化学的方法检测此抗体对肝癌细胞中天然Foxm1b蛋白的识别。【结果】成功构建了Foxm1b基因重组表达载体pET-28a—Foxm1b，表达的蛋白经纯化后免疫大鼠得到了高滴度的多克隆抗体．该抗体可以识别肝癌细胞中的天然抗原。【结论】人类Foxm1b基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及有诊断价值的抗体的制备为后续的研究提供了基础。     

塞来昔布对MNNG诱导的大鼠胃腺癌组织Bax、Bcl-2、Fas表达的影响

[目的]探讨塞来昔布预防胃癌的非COX依赖性途径。[方法]86只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为6组:A组动物(5只)自由饮用蒸馏水不作特殊处理;B组动物(16只)饮用含N-甲基-N’-硝基-亚硝基胍(MNNG)100μg/mL的蒸馏水;C组(16只)、D组(17只)、E组(16只)、F组(16只)动物除饮用含MNNG 100μg/mL的蒸馏水外,C组动物还灌喂吲哚美辛3 mg/kg,1次/d,D组、E组、F组动物分别灌喂塞来昔布5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg,1次,d。以上处理连续10个月,处理因素结束后2个月内处死动物观察腺胃肿瘤的发生率,用实时PCR和免疫组化方法检测各组动物胃肿瘤组织Bax、Bcl-2、Fas mRNA表达及蛋白水平。[结果]A、B、C、D、E、F组动物胃癌的发生率分别为0%(0/5)、75%(12/16)、68.8%(11/16)、70.6%(12/17)、18.8%(3/16)和31.3%(5,16)(P=0.002)。与B组相比,C、D、E和F组胃癌组织Bax、Bcl-2、Fas mRNA表达和蛋白水平均无显著性差异。[结论]选择性COX-2抑制剂塞来昔布预防胃癌的机制可能与凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas表达无关。