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PCR-RFLP检测载脂蛋白CⅢ基因T-455C多态性方法的建立及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测栽脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)T-455C多态性的方法,探讨南通汉族人群中apoCⅢ多态性与高三酰甘油血症(HTG)的相关性。方法:用PCR扩增apoCⅢ基因启动子区包含T-455C多态性在内的DNA片段,扩增产物用限制性内切酶BseG Ⅰ酶切后电泳,分析apoCⅢ基因型,同时采用生化方法检测研究对象的血脂和载脂蛋白水平。结果:检测到3种基因型,分别为-455TF、-455TC和-455CC。HTG患者组和健康对照组apoCⅢ-455C等位基因频率(50.44%比33.11%)和apoCⅢ-455CC基因型频率(26.55%比12.16%)均有显著差异(P〈0.01);C等位基因携带者患HTG的风险是非携带者的2.06倍(95%CI:1.31~3.24);-455C等位基因携带者有较高的三酰甘油(TG)和apoCⅢ蛋白水平(P〈0.05)。结论:PCR-RFLP是一种快速、敏感的分析apoCⅢ基因启动子区T-455C多态性的方法;apoCⅢ-455C等位基因与HTG的发生相关。 相似文献
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应用荧光偏振免疫分析法和时间分辨荧光免疫分析法分别测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和血清叶酸(FA)、维生素B12(VitB12)的水平,探讨其在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的临床价值。选择137例糖尿病(DM)患者,并根据尿微量白蛋白(uMA)的排泄率及血肌酐(SCr)水平将其分为糖尿病无肾病组、DN初期组、临床DN组和氮质血症组,同时测定以40名健康人作对照组,检测其Hcy、FA和VitB12。采用SPSS10.0统计软件,进行直线回归相关分析。结果显示:四组DM患者血浆Hcy水平分别与对照组比较均显著性增高(P<0.05~0.01),并随DN患者肾脏损伤程度的加重而升高,每两组间相比有显著性差异(P<0.01)。四组DM患者血清FA、VitB12水平分别与对照组比较,除糖尿病无肾病组无显著性差异(P>0.05)外,其余三组均有显著性差异(P<0.01),每两组间比较均有显著性差异(P<0.01)并与血浆Hcy水平呈现负相关。结论:高Hcy血症是DM和DN患者的危险因素,血浆Hcy水平可作为DM和DN病情监测的有效指标,FA、VitB12的降低可能是诱发高Hcy血症的一个重要因素。 相似文献
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目的:探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)反应体系中各种成分的优化,建立检测载脂蛋白CⅢ(ApoCⅢ)T-455C多态性的方法。方法:采用PCR—RFLP检测ApoCⅢ基因T-455C多态性,同时通过对参与反应体系的成分,在一定范围内设置不同的浓度或参数组,进行正交试验和单因素逐项试验,观测各成分在不同条件下对结果的影响。结果:ApoCⅢ基因检测到3种基因型。PCR反应体系中不同模板含量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg^2+浓度、退火温度和酶切体系中PCR产物量、内切酶量、酶切时间等对反应结果均有不同程度的影响。结论:该研究建立的PCR—RFLP体系检测Apo CⅢ基因T-455C多态性技术,是一种高效快速、简单敏感、准确可靠的分析方法,适合常规实验室开展。 相似文献
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正已绝经3年的朱女士,腹部膨隆如同足月的孕妇,她以为自己只是下腹赘肉比较多,一直没有去医院就诊检查,直至近期因痔疮原因需要手术住院,才发现腹部的赘肉不一般。绝经后突然发福,努力减肥唯独肚子减不下来朱女士今年55岁,平时身体不错,没什么大毛病,也没有哪里特别不舒服。她说,10多年前,单位组织体检,曾经发现自己患了卵巢 相似文献
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微流控芯片电泳测定血清小而密低密度脂蛋白及临床应用价值 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立微流控芯片电泳分离血清小而密低密度脂蛋白(sdLDL)的方法并探讨其临床应用价值。方法利用自制的微流控芯片,选择Tricine缓冲液为电泳缓冲液,SDS作为添加剂,电泳分离经硝基苯并噁二唑-C6-酰基鞘胺醇(NBD C6-ceram-ide)预染的脂蛋白,激光诱导荧光技术检测。结果大而轻低密度脂蛋白(lLDL)、sdLDL、极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)在3 min内得到有效分离。冠心病(CHD)组,sdLDL检出率显著高于正常对照组(P<0.01)。CHD患者血清经连续3次分析,sdLDL出峰时间和峰面积相对标准差分别为2.18%和2.94%。sdLDL阳性组TG水平增高,HDL-C水平降低,均与阴性组存在显著差异(P<0.01和P<0.05)。CHD患者sdLDL与三酰甘油(TG)、载脂蛋白B(apoB)呈正相关(r=0.82和0.79,P<0.0001)。结论微流控芯片电泳可望成为sdLDL的常规分析手段,用于CHD危险性的评估。 相似文献
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目的 探讨血清Tracp5b、CEA和CA15-3水平和乳腺癌骨转移的关系.方法 应用采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免疫分析(CLIA)检测78例乳腺癌术后患者血清Tracp5b、CEA、CA15-3水平,其中骨转移39例,无骨转移39例(含骨外转移9例)以及健康女性对照组30例.结果 骨转移组血清TRACP5b水平为(6.25±2.37),显著高于健康对照组(3.29±1.15)、无骨转移组(3.99±1.02)以及骨外转移组(4.08±1.10)(P〈0.05),无骨转移组和骨外转移组(P〉0.05);骨转移组血清CA15-3水平为(148.3±173.5),显著高于健康对照组(13.88±7.12)和无骨转移组(15.21±7.62)(P〈0.05),但和骨外转移组(90.7±79.3)(P〉0.05);骨转移组CEA水平为(19.8±10.20),显著高于健康对照组(2.69±1.10)和无骨转移组(3.19±1.32)(P〈0.05),但和骨外转移组(13.56±8.13)(P〉0.05).结论 血清TRACP5b的检测对乳腺癌骨转移具有较高的特异性和敏感性,而CA15-3、CEA在乳腺癌骨转移时具有较高的相关性,但不具备特异性. 相似文献
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