郑氏植物蛋白对乳腺癌及其癌前病变患者PBL的刺激作用及其意义

目的 :研究郑氏植物蛋白 (Zheng’splant protein ,ZPP)对淋巴细胞的刺激作用及其在乳腺癌早期诊断与治疗中的应用价值。方法 :采用3 H TdR掺入法测定人外周血淋巴细胞(PBL) )的增殖反应。用流式细胞仪测定ZPP对T淋巴细胞CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 抗原表达的调节作用。结果 :ZPP对乳腺癌及其前期病变患者PBL有较强的刺激作用 (SI分别为3.0 0± 1.4 5和 2 .5 3± 0 .80 ) ,明显高于对正常对照组和乳管上皮轻度增生患者PBL的刺激指数 (SI分别为 1.0 6± 0 .17和1.18± 0 .19) (P <0 .0 1)。而PHA对各组PBL的增殖反应均有不同程度的刺激作用 ,但各组间无明显差异 (P >0 .0 5 ) .经ZPP刺激后的PBL中CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞均发生增殖反应 ,其中CD4 + 和CD8+ 者更为明显。结论 :ZPP可选择性刺激乳腺癌及其前期病变患者的PBL中T细胞发生增殖反应 ,此作用有可能用于乳腺癌的早期诊断与治疗中     

参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤患者红细胞免疫功能的影响

红细胞免疫学作为现代免疫学的分支越来越受到人们的关注 ,本研究通过测定正常献血员及血液系统恶性肿瘤患者 RBC- C3h RR、 RBC- ICR、 TRR,探讨血液系统恶性肿瘤患者红细胞免疫功能变化及中药制剂参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤患者红细胞免疫功能的影响。1　临床资料1 .1　诊断标准 :全部淋巴瘤患者化疗前均经淋巴结切取活检 ,经病理证实。全部急性白血病患者化疗前均经骨髓穿刺病理证实。1 .2　一般资料 :正常献血员 30例及 1 999年 1 0月～2 0 0 0年 1 0月在河北省肿瘤医院血液科住院治疗的化疗间歇期的血液系统恶性肿瘤患者…     

转染CD40配体的卵巢癌细胞株OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究

Objective To examine the in vivo anti-metastatic effect of enhanced expression of CD40L cDNA in murinc ovarian cancer OVUM cells (CD4OL-OVHM) injected into the spleen on liver metastasis in mice. Methods OVUM cells were inoculated into the spleen of 6 ～ 8 week-old female B6C3F1 (C57BL/6N × C3H/He) mice. The established liver metastasis was identified by histopathology (HE staining). OVUM cells, DNA-pMKITneo-OVHM cells or CD40L-OVHM cells were inoculated into the spleen of female B6C3F1 mice and the expressions of CD11c in splenic cells were detected by flow cytometry. The specific cytotoxicity of splenic cells was detected by MTT assay, and the serum cytokines of IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL4 and IL-10 of the mice were measured by enzyme linked immunoabsorbent assay. The liver metastases and the survival time of the mice were also recorded. Results The mouse models with liver metastasis by injecting tumor cells into the spleen of mice were established. The expression of CD11c and the specific killing rote in CD40L-OVHM cells group was significantly higher than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group. The expressions of IFN-γ, TNF-α and IL-12 in the CD40L-OVHM cells group were much more increased than OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group, but the expressions of IL-4 and IL-10 in the CD40L-OVHM cells group were decreased significantly (P < 0.05). The average weights of livers and spleens of mice in CD40L-OVHM cells group were significantly lower than those of DNA-pMKITneo-OVHM cells group and OVHM cells group. The survival time of mice in CD40L-OVHM cells group was also significantly longer than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group (P < 0.05). Conclusion The data directly demonstrate that the expression of CD40L in ovarian cancer cells (CD40L-OVHM) can enhance the proliferation and differentiation of dendritic cells in the spleen and induce specific cytotoxic effect of T cells in the spleen, and may regulate the immune function of peripheral blood cells and the immune balance between Thl cells and Th2 cells, which maybe the possible mechanism induced by CD40L in mice inhibiting the development of liver metastasis.     

五加皮Age蛋白在正常小鼠与荷瘤小鼠体内的组织分布

目的探讨五加皮抗肿瘤成分A ge蛋白在正常小鼠与荷瘤小鼠体内的组织分布。方法用氯胺T法对A ge蛋白进行125I标记(形成125I-A ge),由尾iv小鼠后,于不同时间取组织和血液标本,测定放射cpm比值。以放射参与量(即脏器与血液中cpm比值)作为125I-A ge在组织中分布的依据。结果在一次性快速iv125I-A ge 2 h后,正常小鼠和荷瘤小鼠体内均以肾脏中125I-A ge的分布量最高,肝脏和肺部放射参与量也较高,与心脏、脾脏等其他脏器相比差异有显著性(P<0.01);尿中125I-A ge的量很高。iv同等剂量125I-A ge后,荷瘤小鼠的肾脏、肝脏和肺部组织的放射参与量比正常小鼠偏高(P<0.05)。结论五加皮A ge蛋白在小鼠体内主要分布于血流丰富的组织,主要通过泌尿系统排泄,不易透过血脑屏障。     

白细胞介素23对结肠癌细胞凋亡率及Survivin的影响

肿瘤的发生发展与细胞凋亡有着非常密切的关系，细胞凋亡的发生涉及到促凋亡基因以及抑制凋亡基因的表达，细胞凋亡的改变与这两种基因的异常表达有关。Survivin是一个新发现的凋亡蛋白抑制剂(IAP)家族成员，具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重功能。白细胞介素23(IL-23)是Oppmann等在2000年新发现的一种新的细胞因子，已有研究证实，IL-23有一定的抗肿瘤作用。有关细胞因子抑制肿瘤对Survivin表达的影响尚未见详细报道。本研究目的是探讨逆转录病毒介导的小鼠IL-23对结肠癌细胞细胞凋亡率及Survivin表达的影响。     

对羟基桂皮醛诱导食管癌TE-13细胞分化及其作用机制

目的：探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛（p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP）对食管癌细胞株TE-13的分化作用及其机制。方法：用流式细胞术检测质量浓度为10、20、40 μg/ml的 CMSP处理TE-13细胞对该细胞凋亡和细胞周期分布的影响,用吉姆萨染色、电镜观察TE-13细胞形态学改变,Real-time PCR和ELISA方法检测TE-13细胞中肿瘤相关抗原CEA和SCC的表达,用克隆集落形成实验、Transwell迁移实验检测不同质量浓度CMSP对TE-13细胞的增殖、迁移能力的影响,Western blotting检测CMSP（20 μg/ml）对TE-13细胞中MAPK通路中各蛋白水平的影响。结果： CMSP可抑制食管癌Kyse30、TE-13、Eca109和Kyse180细胞的增殖\[(1.6±0.2)×104 vs （3.8±0.3)×104、(1.7±0.3)×104 vs (4.5±0.4)×104、 (2.5±0.1)×104 vs (4.0±0.4)×104、(1.5±0.1)×104 vs (2.5±0.3)×104个细胞, 均P<0.01\],而对人食管上皮细胞无明显作用(P>005)。CMSP处理TE-13细胞后：(1) 随CMSP质量浓度（10 、20 、40 μg/ml）和处理时间的增加（24、48、72 h）,G0/G1期细胞数量均增加、S期细胞数量减少（P<0.01或 P<0.05）,但细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）;(2) 细胞出现典型分枝状突起,且随CMSP质量浓度增加更显著（P<0.05）;（3）CEA和SCC水平显著降低（P<0.01）;（4）抑制TE-13细胞的增殖和迁移能力,诱导细胞分化;（5）p-P38蛋白水平明显升高（P<0.01）,而p-ERK、p-SPKA/JNK蛋白水平明显降低（P<0.01）。结论： CMSP抑制食管癌TE-13细胞的增殖、诱导其分化,其作用机制可能与上调MAPK信号通路中p-P38和下调p-ERK、p-SPKA/JNK有关。     

中药五加皮抗肿瘤作用体内外实验研究

目的：分离中药五加皮抗肿瘤活性物质,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据。经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。方法：用^3H—TdR掺入法测定了肿瘤细胞增殖反应;用凝胶层析法初步分离、纯化了五加皮抗肿瘤成分。结果：五加皮提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用(P<0．01),而且有较好的量效关系。五加皮提取物经口投入荷瘤小鼠后,实验组小鼠一般情况较对照组小鼠好,肿瘤生长较慢,生存期明显延长(P<0．01)。经凝胶层析分析,分离得到一种对肿瘤细胞增殖反应有抑制作用的蛋白质成分,分子量为64kda。结论：中药五加皮不仅在体外对多种肿瘤细胞增殖有抑制作用,在体内也有较好的抗肿瘤效果。其抗肿瘤活性与一种分子量为64kda的蛋白质成分有关,该成分的进一步分离、纯化和作用机理研究,对五加皮抗肿瘤作用的临床应用和新药开发提供科学依据。     

高位恶性胆道梗阻胆道双支架植入的疗效

目的 分析胆道双支架植入联合胆道外引流治疗高位恶性胆道梗阻（malignant high biliary obstruction,MHBO）临床疗效及应用价值。方法 MHBO患者96例,胆道双支架植入联合胆道外引流77例、胆道单支架植入并对侧引流11例、单纯胆道外引流8例;观察术后近、远期疗效。结果 胆道双支架植入联合胆道外引流77例,成功率为80.21%。96例MHBO患者术前总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶与术后第7、14天比较,差异有统计学意义（P<0.05）;术后第21天胆道双支架植入患者总胆红素下降率（92.56%）明显高于胆道单支架植入并对侧引流和单纯胆道外引流患者（61.53%）,差异有统计学意义（P<0.05）。77例胆道双支架植入患者3、6、9、12、15、18、21月生存率分别为98.70%、88.31%、76.62%、46.75%、18.18%、2.6%、1.3%。结论 胆道双支架植入联合胆道外引流治疗MHBO是一种安全有效的方法,不仅能够迅速退黄并恢复肝功能,为肿瘤的进一步治疗赢取了时间,而且能提高患者的生存质量及延长生存期。     

VEGF反义RNA对人食管癌细胞抑制作用的研究

目的: 研究血管内皮生长因子(VEGF)反义RNA对人食管癌细胞的抑制作用,探讨以VEGF反义RNA进行食管癌基因治疗的可行性.方法: 采用脂质体法将反义VEGFcDNA质粒转染入食管癌细胞TE-1;用MTT法检测细胞增殖情况;用免疫组化法检测VEGF蛋白表达;原位杂交和RT-PCR技术检测VEGFmRNA的表达.流式细胞术检测细胞的凋亡率和周期分布.结果: 被反义VEGFcDNA质粒转染的食管癌细胞有外源性VEGF反义基因的整合及表达,该细胞的VEGFmRNA及蛋白表达水平降低,但细胞生长速率无明显改变,未发生明显凋亡现象;接种裸鼠后,形成肿瘤的时间明显延长,肿瘤的体积和重量明显减小.结论: VEGF反义RNA可抑制食管癌细胞VEGF表达和裸鼠体内的肿瘤生长.该表达体系为食管癌基因治疗的进一步研究奠定了基础.     

间充质干细胞免疫调节活性的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一种多功能的非造血前体细胞,主要存在于骨髓,在其他某些组织器官如脂肪、胎盘、胎肝等,也有少量存在。MSC起源于中胚层,具有向内、中、外三胚层的多种细胞分化的能力。早期认为,MSC的主要功能是通过分泌各种细胞因子支持造血干细胞